陈巧芳
- 作品数:20 被引量:41H指数:4
- 供职机构:浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗人端粒重复序列结合因子(TRF1^(33-277))单克隆抗体的制备及生物学特性初步鉴定被引量:2
- 2002年
- 目的 制备抗人端粒重复序列结合因子片段 (TRF13 3 2 77)单克隆抗体 (单抗 ) ,探讨其生物学特性。方法 以GST TRF13 3 2 77融合蛋白为抗原 ,经细胞融合及ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞 ,对其进行染色体核型分析 ,将此单抗作为探针用于Westernblot和免疫组化检测标本。结果 获得1个抗TRF1蛋白的杂交瘤细胞株。以抗TRF13 3 2 77单抗作Westernblot检测正常人及急性白血病患者骨髓、大肠癌组织及近旁正常粘膜组织提取蛋白 ,在相对分子质量 6 0 0 0 0处有一特异性条带 ,与阳性对照纯化TRF1蛋白相一致 ,免疫组化显示该抗体在上皮细胞及骨髓造血细胞胞浆中阳性着色。结论 制备了具有高度特异性的抗TRF13 3 2 77单抗 ;建立了Westernblot和免疫组化检测组织表达TRF1蛋白的方法。
- 黄河施继敏陈巧芳罗依丁伟楼基余
- 关键词:生物学特性人端粒重复序列结合因子单克隆抗体免疫组化
- 抗人端粒重复序列结合因子单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定
- 本研究以GST-TRTI融合蛋白免疫Balb/c小鼠制备抗端粒重复序列结合因子(TRFI)单克隆抗体,并建立了以该单抗作免疫印迹法及免疫组化检测临床标本的方法,旨在从蛋白质水平研究TRFI在肿瘤发生中的作用.
- 黄河施继敏罗依陈巧芳丁伟楼基余
- 关键词:端粒酶肿瘤病理端粒重复序列结合因子免疫组化检测
- 文献传递
- 人端粒重复序列结合因子1^(33-277)在大肠杆菌中的克隆及高效表达被引量:5
- 2000年
- 目的 :建立能高效表达人端粒重复序列结合因子 1第 33- 2 77位 (TRF1 33- 2 77)氨基酸的菌株并制备多抗。方法 :设计一对引物 ,分别带有 Kpn 和 Eco RI位点 ,从已经克隆了 TRF1 c DNA全长的重组质粒 p CR -TOPO-TRF1扩增 TRF1 33- 2 77c DNA片段 ,克隆入 PGEM-T质粒 ,测序和酶切图谱鉴定 ,Eco RI酶切后亚克隆入 p GEX-3X的 Eco RI位点之间 ,筛选正向插入重组子。转化大肠杆菌 DH5 a,筛选高表达菌株。结果 :得到高效表达融合蛋白的菌株 DH5 a-TRF1 33- 2 77。其融合蛋白经western blot证实具 TRF1抗原性。结论 :所建立的菌株为 h TRF1单克隆和多克隆抗体制备提供蛋白来源。
- 黄河陈巧芳林茂芳
- 关键词:端粒端粒重复序列结合因子重组融合蛋白质类
- 人端粒重复序列结合因子(hTRF1)蛋白质在急性白血病中的表达水平与端粒酶活性关系的研究
- 目的:研究人端粒重复序列结合因子(TRF1)蛋白质在急性白血病(AL)及正常骨髓组织中的表达水平,AL及正常骨髓组织中端粒酶活性,研究TRF1蛋白质表达水平与端粒酶活性的关系。方法:定量分析AL及正常骨髓组织中TRF1蛋...
- 施继敏黄河陈巧芳林茂芳
- 文献传递
- 非亲缘异基因骨髓移植治疗慢性髓细胞性白血病被引量:2
- 1999年
- 为探讨非亲缘关系异基因骨髓移植在治疗血液系统恶性疾病中的临床应用,采用台湾慈济骨髓损赠资料中心捐赠的非亲缘异基因供体骨髓,患者以BU-CY预处理方案化疗,骁悉联合环孢菌素A(CsA)加短程MTX预防移植物抗宿主病。
- 黄河林茂芳孟海涛钱文斌罗依黄健胡晓蓉蔡真郦瑜陈水云陈巧芳周思文林修基佟红艳张洁谢万灼李政道严力行
- 关键词:异基因骨髓移植慢性髓细胞性白血病
- 抗人端粒重复序列结合因子多克隆抗体制备及纯化被引量:2
- 2001年
- 目的 制备并纯化抗人端粒重复序列结合因子片段 (TRF133 -277)的多克隆抗体。方法 运用基因工程的方法表达人工TRF133 -277,将表达蛋白经亲和层析大量纯化后免疫白兔 ,制备血清过柱纯化 ,将TRF133 -277 和GST交连于CNBr-活化的Sephrose4B柱 ,血清过GST柱以去除抗GST抗体 ,然后经GST-TRF1柱吸收抗TRF1抗体 ,获得兔抗人TRF1多克隆抗体。结果 用此抗体作为一抗 ,在人膀胱癌细胞总蛋白中检到68KD的特异条带 ,与阳性对照基本一致。 结论 兔抗人TRF1多克隆抗体制备方法有效 ,所获抗TRF133 -277
- 黄河陈水云陈巧芳郑伟燕罗依傅剑云
- 关键词:人端粒重复序列结合因子多克隆抗体纯化
- 系列人细胞色素P450转基因细胞系的建立及其在遗传毒理学研究中的应用
- 1997年
- 汪爱玲陈巧芳等
- 关键词:细胞色素P450遗传毒理学
- 老年冠心病严重度和心肌缺血程度对Q—T离散度的影响被引量:4
- 2000年
- 目的:探讨Q-T离散度(Q-Td)是否为评定老年冠心病严重度和疗效的新指标。方法:选择冠心病患者135例(〉60岁), 无症状性心肌缺血、心绞痛和心肌梗死等类型分组,测定各组Q-Td和心率校正Q-Td(Q-Tcd),比较各组间以及治疗前、后的Q-Td、Q-Tcd的差异,并对Q-Tcd和心肌缺血程度作相关性分析。结果:冠心病这三种类型患者的Q-Td、Q-Tcd随病情加重而显著增在(P〈0.01)。
- 范陈豪陈巧芳
- 关键词:Q-T离散度冠心病
- 人端粒酶重复序列结合因子(HTRF_1)的克隆、表达纯化和多抗制备
- 黄河陈巧芳林茂芳郑伟燕傅剑云陈水云
- 人端粒和端酶系统在恶性肿瘤发生、发展中的作用机理研究已成为恶性肿瘤研究的热点之一。TRF_1作为新发现的端粒—端粒酶系统的重要调节因子,在白血病发生发展 中的影响机理研究在国内外均未见报道。该项目以黄河博士在德国基尔大学...
- 关键词:
- 关键词:克隆表达纯化端粒酶
- 抗人端粒重复序列结合因子(TRF1<Sup>33-277</Sup>)单克隆抗体的制备及应用
- 一种抗人端粒重复序列结合因子(TRF1<Sup>33-277</Sup>)单克隆抗体的制备及应用,是运用杂交瘤技术,以GST-TRF1<Sup>33-277</Sup>融合蛋白为抗原,制备抗人端粒重复序列结合因子(TRF...
- 黄河施继敏陈巧芳
- 文献传递