陈晓航 作品数:17 被引量:45 H指数:3 供职机构: 兰州生物制品研究所有限责任公司 更多>> 发文基金: 甘肃省自然科学基金 甘肃省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
肺炎球菌结合疫苗诱导的抗荚膜多糖抗体活性研究 2003年 目的 研究肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物在小鼠体内诱导产生的功能性抗体活性。方法 用荚膜多糖及其结合物免疫BALB/c小鼠,用ELISA法测定小鼠血清IgG抗体,用KSCN解离法测定IgG抗体的亲和力,用体外调理吞噬实验测定血清的调理吞噬滴度。结果 18C-TT、19F-TT免疫小鼠后,抗体滴度显著升高,有免疫记忆反应,18C-TT第1针和第3针免后的抗体亲和指数(AI)分别为22.3%±4.8%和49.7%±1.8%,调理吞噬滴度分别达到16和32;19F-TT免后AI分别为52.6%±3.0%和61.6%±3.4%,调理吞噬滴度则分别为32和64。结论18C-TT和19F-TT免疫小鼠后,能有效地产生再次免疫应答,其IgG有良好的亲和力和补体依赖的调理吞噬功能,能有效地清除肺炎链球菌的感染。 乔瑞洁 王剑虹 王欣茹 陈美华 任克明 陈晓航 张勇 赵萍 孙述学关键词:肺炎球菌结合疫苗 抗体活性 18C型肺炎球菌荚膜多糖的水解及水解片段的特性 2007年 目的探索不同乙酸水解条件对18C型肺炎球菌多糖的水解效果。方法选择60℃和92℃2种温度,以不同乙酸浓度和不同时间对多糖进行水解,用层析法检测相对分子质量,免疫双扩散法和ELISA抑制法分别检测活性。结果0.2mol/L乙酸92℃水解16h,水解程度趋于稳定,相对分子质量可达57000;1.0mol/L乙酸60℃水解40h,水解程度趋于稳定,相对分子质量可达235000;用1.0mol/L乙酸在不同温度下水解时,随着温度升高,水解程度增加,而在92℃不同乙酸浓度对水解程度几乎无影响。上述条件所得水解片段均保留了抗原性,但随着相对分子质量的降低,抗原性有所减弱。结论在不同条件下,乙酸能将18C型肺炎球菌荚膜多糖水解为不同大小的片段,且未破坏抗原决定簇的基本结构。 乔瑞洁 陈晓航 谈晓梅 张轶 孔素娟 刘爱萍 沈荣 谢贵林 朱家鸿关键词:肺炎球菌荚膜多糖 水解 乙酸 18C型肺炎球菌荚膜多糖-TT结合物中多糖片段长度对其免疫原性的影响 被引量:1 2007年 目的研究18C型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素(TT)结合物中多糖片段的大小对其免疫原性的影响。方法采取乙酸水解多糖,Sephacryl S-300(XK-50)柱纯化多糖片段,ADH法制备结合物,免疫小鼠,检测血清的ELISA抗体滴度、亲和力以及调理吞噬能力。结果得到重复单位数分别为27、25、19、12、10、9和8的多糖片段。与TT制备的结合物在小鼠体内均能诱导产生IgG型抗体,并存在加强免疫效应,表现出T-细胞依赖型抗体免疫反应。随着链长度的缩短,血清GMT有增加的趋势,但只有8RUPn18C-TT与27RUPn18C-TT组之间差异有显著意义。当吞噬率为50%时,血清的稀释倍数分别为35.10、39.60、45.71、104.71、117.00、145.50和478.60。此趋势与抗体滴度呈正相关,但各组间亲和力差异无显著意义。结论较短多糖片段制备的结合物免疫原性高,血清GMT高,调理吞噬能力也强。 乔瑞洁 陈晓航 张勇 任克明 孔素娟 张轶 刘爱萍 沈荣 谢贵林 朱家鸿关键词:肺炎球菌 结合物 免疫原性 多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响 2009年 目的探讨多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响。方法分别用单一载体(破伤风类毒素)和混合载体(破伤风类毒素和白喉类毒素)作为多糖结合物的载体蛋白,制备5~9价肺炎链球菌荚膜多糖结合物,免疫NIH小鼠,采用间接ELISA法测定免疫小鼠血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体水平。结果多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物的免疫效果优于相应的单价结合物;随着结合物配制价数的增高,小鼠的免疫应答能力趋于下降;多价结合物中使用两种载体能缓解此现象,但载体含量过高时,依然会抑制免疫应答。结论多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物免疫小鼠后,随着载体剂量的增高,会出现载体诱导的表位抑制现象,使小鼠的免疫应答反应减弱。两种载体蛋白同时使用能缓解此现象。 任克明 陈晓航 张轶 刘爱萍 陈美华 王剑虹 沈荣关键词:结合物 破伤风类毒素 白喉类毒素 免疫应答 A型肉毒聚合类毒素的制备及免疫原性研究 2011年 通过制备A型肉毒聚合类毒素,研究获得较好的免疫原性和反应原性的方法。通过碳二亚胺法,聚合A型肉毒类毒素,免疫小鼠,用ELISA检测抗体,成功地制备了A型肉毒聚合类毒素,免疫小鼠获得高效价免疫血清,且该免疫血清具有中和活性,研究A型肉毒聚合类毒素抗原的作用机制,获得具有中和活性的保护性抗体,对肉毒毒素中毒的防治具有重要意义。 曹馨匀 何彦林 高建军 刘卫涛 张廷芬 陈晓航 罗树权关键词:碳二亚胺 酶联免疫吸附测定法 肺炎链球菌荚膜多糖分子大小及分子量分析方法的比较 被引量:10 2015年 目的 3种方法分析10个血清型肺炎链球菌荚膜多糖(pneumococcal capsular polysaccharides,Pn Ps)样品的分子大小及分子量,并对这3种方法进行比较。方法采用Sepharose CL-4B凝胶排阻层析(SEC)技术检测1型、2型、4型、8型、9N型、12F型、14型、18C型、19A型和23F型Pn Ps各2~3批次样品在色谱柱中的分配系数(KD)和样品组分特征;采用高效凝胶排阻色谱-示差折光检测器(high performance size-exclusion chromatography with refractive index,HPSEC-RI)法建立Pullulan标准品分子量标准曲线,计算各Pn Ps样品的重均分子量(weight-average molecular weight,Mw);采用高效凝胶排阻色谱-多角度激光光散射仪/示差折光检测器联用技术(high performance size-exclu-sion chromatography with multi-angle laser light scattering and refractive index,HPSEC-MALLS/RI)检测各Pn Ps样品的Mw、数均分子量(number-average molecular weight,Mn)、多分散水平(Mw/Mn)及均方根旋转半径(root mean square ratio of gyration,Rg);对HPSEC-RI法和HPSEC-MALLS/RI法检测Pullulan分子量标准品的结果进行比较。结果 SEC技术不同化学方法检测的同批次Pn Ps样品的KD值十分接近,且主峰形态也比较近似,个别批次Pn Ps不同化学方法获得的峰形有差别。经HPSEC-RI检测Pullulan分子量标准品获得的回归方程为y=-0.278 x+10.13,r2=0.998,各Pn Ps样品的分子量为1.812×105~1.246×106。HPSEC-MALLS/RI联用技术检测的各批Pn Ps样品的Mw分布于9.898×105~1.471×105,Rg为84.9~25.4 nm,同一血清型不同批次样品Rg间的大小关系与其Mw间的大小关系具有较好一致性。结论结合多种方法检测多糖样品的分子大小和分子量,可更客观、全面地了解Pn Ps分子的各种性质。 张轶 张新庄 王玺 刘倩 陈晓航 任克明 白贵杰 王剑虹 沈荣关键词:分子大小 分子量 肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠抗体应答的比较 2006年 目的比较肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠的抗体应答。方法选NIH小鼠,分别经皮下和腹腔途径免疫3次同等剂量的结合疫苗,每次间隔2周,用ELISA方法检测两种途径免疫小鼠的血清抗体滴度。结果结合疫苗经腹腔免疫后的抗体滴度优于皮下免疫。小鼠经腹腔免疫3次后,血清抗体的几何平均滴度分别是第1次免疫的6·6倍和3·5倍。结论结合疫苗经腹腔免疫较皮下免疫获得的抗体应答水平高。 沈荣 陈晓航 任克明 孔素娟 王剑虹 张勇关键词:破伤风类毒素 结合疫苗 免疫原性 18~60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平调查 被引量:2 2016年 目的了解18~60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平,为肺炎链球菌性疾病的预防与控制提供参考依据。方法选取甘肃、宁夏健康献浆员为调查对象,分为18~30、31~40、41~50、51~60岁4个年龄组,共调查347人。采用WHO推荐的标准化酶联免疫吸附试验检测12种肺炎链球菌血清型IgG抗体水平,并计算IgG抗体阳性率和几何平均浓度(Geometric mean concentration,GMC)。结果质控血清QC907的IgG抗体浓度均值与参考值之间的误差百分数均未超过±40%,测定值符合其参考值范围,各血清型抗体浓度检测结果的CV均〈30%。347份血清样品肺炎链球菌IgG抗体总阳性率为64.8%~96.0%,GMC为0.37~2.24μg/m L。不同血清型间IgG抗体GMC差异具有统计学意义(P〈0.05)。不同年龄组同种血清型IgG抗体阳性率及GMC均无统计学意义(P〉0.05)。除19F型外,不同地区同种血清型IgG抗体阳性率均有统计学意义(P〈0.05);除4、7F、14和18C型外,不同地区同种血清型IgG抗体GMC间差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 18~60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平普遍较高,对肺炎链球菌主要流行血清型均具有一定的保护力。 张轶 熊明郁 张新庄 任珍芸 刘倩 张丽芝 任克明 王玺 陈晓航 王剑虹 沈荣关键词:肺炎链球菌 抗体水平 酶联免疫吸附试验 5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的不同糖蛋白比与免疫原性的关系 被引量:3 2006年 实验中比较了以不同糖蛋白比结合的5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的免疫原性。以氨还原法制备的不同糖蛋白比的5型多糖结合疫苗分别经腹腔注射NIH小鼠,共免疫3次,间隔2周。末次免疫2周后采血分离血清,以间接ELISA测定血清抗体,t检验统计分析数据。结果显示,生理盐水组(R组)无免疫原性;5型荚膜多糖组(H组)免疫原性低,无免疫加强效应;结合疫苗M组、N组第1、2针有免疫加强效应,第2、3针无免疫加强效应,而F组和Q组的两针次间均有明显的免疫加强效应。说明5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的糖与蛋白比较高时能获得较好的免疫原性。 陈晓航 王剑虹 任克明 孔素娟 张勇 沈荣关键词:肺炎链球菌 结合疫苗 免疫原性 核磁共振波谱法在肺炎球菌荚膜多糖检定中的应用 被引量:19 2013年 目的建立1H-NMR波谱法检定23价肺炎球菌荚膜多糖结构的方法。方法用1H-NMR方法分析肺炎球菌荚膜多糖,选择(5.89~4.64)ppm区作为‘指纹’鉴定区,以默克公司公布的肺炎球菌荚膜多糖波谱为参照谱图,将检定样品的波谱与其相比较。对1H-NMR波谱进行专属性和耐用性验证。结果实验中应用1H-NMR波谱分析法对23价肺炎球菌多糖疫苗包含的所有血清型多糖的检定结果与默克公司公布的结果完全一致,该方法有很好的专属性和耐用性。结论实验中建立的1H-NMR波谱法适用于肺炎球菌荚膜多糖的检定,与传统方法相比,该方法有检测速度快,样品易于准备的优点等。 王玺 任克明 陈晓航 白贵杰 张新庄 张轶 沈荣关键词:肺炎球菌荚膜多糖 核磁共振 检定