陈贵斌
- 作品数：12 被引量：33H指数：4
- 供职机构：天津大学化工学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 反相高效液相色谱法测定抗生素AGPM发酵液中的主要成分被引量：8
- 2003年
- 主要探讨了高效液相色谱法(HPLC)测定新型抗生素AGPM发酵液中主要成分的可行性,优化了反相高效液相色谱法分析发酵液组分的色谱条件。在WatersTMNova PakR ○C18色谱柱上,以甲醇 0 01mol/L乙酸铵溶液(pH5 20)为流动相,其中甲醇的体积分数按线性梯度方式在60min内从30%升至50%,流动相流速为1 0mL/min,在330nm处进行紫外检测,发酵液中各主要组分均能很好地分离。采用该方法对AGPM发酵液中5种主要组分的线性范围、检出限、相对标准偏差和回收率分析考察,结果表明其灵敏度高、定量准确、重现性好,适合于发酵液这种复杂体系中AGPM等主要组分的分离测定。
- 陈贵斌牛晋阳张建勇石炳兴元英进胡宗定
- 关键词：反相高效液相色谱法发酵液梯度洗脱
- 抗生素AGPM生物合成和调控机制的研究
- 抗生素生物合成和调控机制是代谢工程改造生物合成途径用来提高菌种生产能力以及获得新型杂合抗生素的基础。为了提高新型抗生素AGPM的生产以及获得类似结构新药物，本论文首次开展其生物合成和调控机制的研究。
首...
- 陈贵斌
- 关键词：生物合成代谢通量分析
- 文献传递
- 抗生素AGPM生物合成的代谢调控研究被引量：5
- 2003年
- 探讨了葡萄糖、铵离子及磷酸盐对抗生素AGPM生物合成的调控作用和机理。结果表明当葡萄糖、铵离子和磷酸盐浓度分别大于20 gL-1、20mmolL-1和25mmolL-1时,对抗生素AGPM合成均产生抑制作用。加入葡萄糖衍生物进一步证明葡萄糖的调控作用主要是通过其磷酸化过程来实现的;而对比分析不同铵离子浓度下细胞内酶活力则发现铵离子抑制糖代谢中的EMP途径和HMP途径有关酶,却刺激TCA循环关键酶;若培养基存在高浓度的磷酸盐时,胞内的6-磷酸葡萄糖会大量积累,说明糖进一步代谢受阻从而抑制抗生素合成。上述结果表明抗生素AGPM形成与营养组分浓度密切相关,而葡萄糖、铵离子和磷酸盐对其合成的调控主要是通过调节初级代谢控制抗生素合成前体浓度来达到调控目的的。
- 陈贵斌张建勇牛晋阳郑卉元英进胡宗定
- 关键词：代谢调控葡萄糖铵离子磷酸盐
- 抗生素AGPM生物合成途径的初步研究被引量：6
- 2003年
- 采用前体添加实验法、静息细胞培养法以及酶抑制剂法对藤黄灰链霉菌中抗生素AG PM生物合成途径进行了初步探讨。研究表明能转化成聚酮合成所需活性前体的氨基酸如异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、谷氨酸等以及短链脂肪酸乙酸、丙酸、丁酸盐对抗生素AGPM合成均有明显促进作用 ;另外 ,在培养基中添加脂肪酸和聚酮生物合成途径的专一性抑制剂浅蓝菌素 (2 5μg mL)或脂肪酸合成抑制剂碘乙酰胺 (0 5mmol L)时 ,菌体生长不受影响 ,而抗生素AGPM合成受到强烈抑制 ,分别为对照的 35 3 %和 2 6 2 % ;当碘乙酰胺的浓度为 1mmol L时 ,抗生素AGPM合成几乎完全受到抑制。由此初步推断抗生素AGPM是由聚酮途径合成。
- 陈贵斌牛晋阳张建勇元英进胡宗定
- 关键词：生物合成途径
- 抗生素AGPM发酵过程中蛋白质表达差异的研究被引量：3
- 2003年
- 由土壤中筛选到一能产生新型抗肿瘤抗生素AGPM的藤黄灰链霉菌株 ,应用蛋白质双向电泳方法 ,比较了藤黄灰链霉菌在发酵 2 4h与 72h蛋白质表达的差异 ,发现在发酵 72h有17个蛋白质差异点出现 ,此外还发现一些蛋白质的含量明显高于 2 4h的同种蛋白含量 。
- 牛晋阳乔建军陈贵斌张建勇元英进
- 关键词：蛋白质组二维凝胶电泳
- 新型抗生素AGPM产生菌藤黄灰链霉菌的诱变育种被引量：12
- 2003年
- 从土壤中分离得到一株藤黄灰链霉菌的新菌株 0 99,该菌株能产生一种具有显著抗肿瘤活性的新型抗生素AGPM。产生菌经紫外线单因子诱变、紫外线加氯化锂 (LiCl)复合诱变等两种诱变方式诱变处理后 ,其AGPM产量达到了 1 8 7μg/mL ,较出发菌株提高了 1 2倍。研究发现最优的紫外辐射时间和氯化锂浓度分别是 30～ 6 0s和 0 0 5～ 0 0 9mol/L ,并且由于氯化锂的协同效应 ,菌株在经氯化锂处理后 ,对紫外线的敏感性明显增强了。 30L发酵罐发酵试验表明 ,利用高产突变株发酵 ,AGPM产量能达到 1 8 5 μg/mL ;而利用出发菌株发酵 ,AGPM产量仅为 8 5 μg/mL。
- 张建勇牛晋阳陈贵斌元英进胡宗定
- 关键词：抗生素产生菌诱变育种
- 抗生素AGPM高产菌株选育及其蛋白差异分析被引量：4
- 2003年
- 从土壤中分离得到一株能产生新型抗生素AGPM的藤黄灰链霉菌菌株.利用紫外线和硫酸二乙酯对新型抗生素AGPM产生菌藤黄灰链霉菌099菌株进行了联合诱变处理.最终得到了一株高产菌株TD0551,其抗生素AGPM产量可达到16.45mg/L,为出发菌株的2.1倍.应用蛋白质二维凝胶电泳技术分析了藤黄灰链霉菌的蛋白质组,比较了高产菌株与低产菌株在分泌AGPM过程中的蛋白质组差异.结果表明,在高产菌株的蛋白样品中有11个特异点,而在低产菌株的蛋白样品中有3个特异点,这些蛋白特异点可能与新型抗生素AGPM的合成有关.
- 牛晋阳乔建军陈贵斌张建勇元英进
- 关键词：抗生素菌株选育蛋白质组二维凝胶电泳
- 多烯紫杉醇注射液细菌内毒素检查方法探讨被引量：3
- 2003年
- 目的 :通过试验探讨采用干扰初筛法检测多烯紫杉醇注射液中细菌内毒素方法的可行性。方法 :运用干扰初筛法对供试品进行干扰试验和内毒素限量检查。结果 :选用 0 .12 5EU·ml-1以上灵敏度的鲎试剂可以消除供试品对内毒素检查的干扰 ,并且干扰初筛试验法一步就可以确定出多烯紫杉醇注射液对内毒素检查无干扰的有效稀释范围以及所需的鲎试剂灵敏度范围。结论 :采用干扰初筛法检查多烯紫杉醇注射液中细菌内毒素不但可以大大减少通常内毒素检查中的工作量 ,而且切实可行。
- 牛晋阳陈贵斌元英进葛志强
- 关键词：细菌内毒素检查鲎试剂
- 提高链霉菌种发酵液中分泌的抗肿瘤抗生素含量的方法
- 本发明公布了一种提高链霉菌种发酵液中分泌的抗肿瘤抗生素含量的方法。属于利用链霉菌种制备抗肿瘤抗生素技术。该方法对筛选得到的链霉菌菌株进行诱变,经菌种的培养及发酵过程,得到含有抗肿瘤抗生素的发酵液,其特征在于以硫酸二乙酯为...
- 元英进牛晋阳石炳兴陈贵斌张建勇马忠海
- 文献传递
- 一种微生物发酵制备的抗肿瘤抗生素
- 本发明公开了一种微生物发酵制备的抗肿瘤抗生素。该抗生素是从我国海南省三亚地区土壤中筛选得到的链霉菌菌株经菌种培养、发酵、发酵液的过滤、吸附洗脱、萃取、浓缩、层析分离纯化、冷冻干燥等步骤得到的,纯度达到95%以上,该抗生素...
- 元英进石炳兴胡宗定陈海涛马忠海赵红路明刘喜朋牛晋阳陈贵斌
- 文献传递
