隆霜
- 作品数：10 被引量：18H指数：2
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- 乳腺癌细胞源Exosomes介导的EGFR对人脐静脉内皮细胞MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路以及VEGF自分泌作用的研究
- 目的： 研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes介导的表皮生长因子受体(EGFR)对人脐静脉内皮细胞MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的影响，及其对VEGF自分泌作用的研究，初步探索肿瘤细胞源Ex...
- 隆霜
- 关键词：细胞外调节激酶乳腺癌PI3K/AKT信号通路
- MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响
- 2012年
- 目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24h后VEGF、VEGFR2及p-VEGFR2的蛋白表达情况;RT-PCR法检测HUVEC与exosome共培养24h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24h后的体外成管能力。结果 HUVEC与exosome共培养24h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);Westernblot结果显示,HUVEC与exosome共培养24h后VEGF和p-VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P<0.05);RT-PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24h后VEGF的基因表达水平增加(P<0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。
- 隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎
- 关键词：EXOSOME
- 一种新的细胞间的通讯方式：Exosomes
- 2011年
- 在多细胞生物中，细胞间的信息传递是由一系列信息分子参与完成的有序的级联反应，为维持机体的稳定状态，以适应各种生命活动是必不可少的。相对于已知的细胞通讯方式，目前一种起源于细胞内吞途径中的多泡体（Multivesicular bodv，MVB）的膜性小囊泡Exosomes在细胞信息传递中的作用日渐受到重视。
- 隆霜沈宜
- 关键词：EXOSOMES细胞间多细胞生物级联反应信息分子生命活动
- 乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用被引量：6
- 2012年
- 目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。
- 隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎
- 关键词：EXOSOMES胞外信号调节激酶乳腺癌
- 宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究
- 2011年
- 目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclinE)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结果:RT-PCR及Western blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高。结论:宫颈癌HeLa细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关。UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达。
- 孙迪沈宜谢莹珊隆霜
- 关键词：MAPK细胞周期素E
- 乳腺癌细胞源Exosomes在促肿瘤血管生成中的作用及机制
- 2015年
- 目的观察乳腺癌细胞源Exosomes对脐静脉内皮细胞(HUVECs)的生物学效应,初步探讨肿瘤细胞源Exosomes在恶性肿瘤血管病理新生中的作用。方法收集乳腺癌MDA-MB-231细胞培养上清液,以超速及密度梯度离心提取Exosomes;MTT法检测细胞增殖;用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell小室法检测迁移能力;基质胶成管实验观察成管结构的形成;PCR检测EGFR及VEGF mRNA表达;用ELISA及Western blot检测细胞EGFR及其下游ERK、Akt及VEGF/VEGFR2表达。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes以时间-剂量依赖性促进HUVECs细胞增殖(P<0.05)。并且,在作用24 h后,S期细胞比例增加,G1/S期细胞比例下降(P<0.05);同时,HUVEC迁移及体外管腔形成能力显著提高(P<0.05)。并且MDA-MB-231源Exosomes促进了HUVECs细胞EGFR蛋白的表达,使得磷酸化ERK与Akt蛋白的表达增加,同时促进了VEGF蛋白的分泌,并促进了VEGF/VEGFR2蛋白表达(P<0.05)。结论乳腺癌细胞源Exosomes促进HUVECs的增殖、迁移及体外成管能力,其机制可能与EGFR蛋白与其下游MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化,以及VEGF/VEGFR2蛋白的表达有关。
- 隆霜谢莹珊陈黎姜蓉王亚平沈宜
- 关键词：EXOSOMES乳腺癌肿瘤血管生成
- MDA-MB-231源Exosomes对内皮细胞增殖及MAPK/ERK和P13K/Akt信号通路的影响
- 目的:研究人乳腺癌MDA-MB-23 1细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞HUVECs的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Ak信号转导通路在此过程中的作用。方法:低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺...
- 隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎
- 关键词：EXOSOMES胞外信号调节激酶蛋白激酶B
- 文献传递
- 乳腺癌细胞exosomes对人脐静脉内皮作用的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell小室法检测HUVECs与exosomes混合培养24h后迁移能力的影响;观察HUVECs与exosomes混合培养24h后管腔样结构形成变化。结果:各浓度exosomes均具有促进HUVECs细胞增殖作用,且以时间剂量依赖性促进HUVEC细胞增殖(P<0.01);200μg/ml exosomes处理HUVECs细胞24小时,HUVEC细胞的迁移能力提高,差异具有显著性(P<0.01),且能显著提高HUVECs体外管腔形成能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MDA-MB-231细胞源exosomes以时间剂量依赖的方式促进HUVECs增殖,且可显著增强HUVECs的迁移能力及其体外管腔形成能力。
- 谢莹珊沈宜隆霜孙迪姜蓉陈黎
- 关键词：乳腺癌细胞株EXOSOMES脐静脉内皮细胞株管腔形成
- 乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes对血管内皮细胞EGFR表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes介导表皮生长因子受体(EGFR)对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)EGFR表达影响,探讨肿瘤组织血管内皮细胞异常表达EGFR的机制。方法超速离心及密度梯度离心法提取MDA-MB-231细胞源exosomes;免疫细胞化学法检测MDA-MB-231细胞EGFR的表达;Western blot法检测MDA-MB-231细胞、exosomes及HUVECs EGFR蛋白表达;免疫细胞化学法检测HUVECs与exosomes共培养24h后EGFR的表达;RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞与实验组HUVECs细胞EGFR mRNA的表达。结果 EGFR在MDA-MB-231细胞中呈高表达,MDA-MB-231细胞及exosomes可见相对分子质量为170×103的EGFR蛋白呈阳性反应带,HUVECs呈阴性反应带;HUVECs与exosomes共培养24h后,镜下可见实验组部分HUVECs细胞质有淡黄色或棕黄色颗粒,EGFR阳性表达率为(21.4±3.1)%,与对照组(无EGFR蛋白表达)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MDA-MB-231细胞EGFR mRNA表达阳性,而实验组HU-VECs EGFR mRNA表达阴性。结论 MDA-MB-231细胞源exosomes携带癌基因EGFR,并能介导其向周围血管内皮细胞转移,这可能是肿瘤内皮细胞异常表达EGFR的一种方式。
- 谢莹珊沈宜隆霜范维柯姜蓉陈黎
- 关键词：表皮生长因子脐静脉
