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基因重组长效人促肾上腺皮质激素药理学活性: 2016年; 目的为了提高促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)的稳定性,针对ACTH中多种血液蛋白酶的作用位点,制备特定氨基酸位点突变(E5D、F7L、G10A及Y2S)基因重组长效人ACTH,分析比较哪一种点突变基因重组ACTH保留了天然野生型的生理活性。方法采用ELISA和q PCR等方法比较了4种突变型ATCH与野生型ACTH对体外培养的小鼠肾上腺皮质Y1细胞分泌糖皮质激素(glucocorticoids,GC)水平的影响,以及它们对ACTH合成的主要限速酶基因(STAR、P450-scc、3β-HSD)以及对STAR和P450-scc的合成发挥关键调节作用的类固醇合成因子1(SF-1)的转录水平的影响。结果 E5D及Y2S突变型ACTH对Y1细胞分泌GC以及对SF-1、STAR、P450-scc、3β-HSD等基因表达的影响与野生型ACTH比较,没有显著性差异。结论一级结构修饰的E5D和Y2S突变型ACTH的生理活性与野生型ACTH相当。; 黄永林韦双双裴业春吴昊王大勇; 关键词：促肾上腺皮质激素突变糖皮质激素药理学作用等效性

红皮红肉和红皮白肉火龙果果肉呈色相关基因差异表达分析被引量：4: 2021年; 火龙果为热带新兴水果,常见的有红皮红肉和红皮白肉两种类型。为探究这两种火龙果果色差异原因,发掘差异表达基因(differencially expressed genes,DEGs),本研究分别在青果期(授粉后第15天)和成熟期(授粉后35 d)采集红皮红肉火龙果(Hylocereu polyrhizus)和红皮白肉火龙果(Hylocereu undatus)的果肉样品,进行转录组测序。获得高质量序列共53240条。通过对DEGs进行分析,发现火龙果在同一品种不同时期间的差异比同一时期不同品种间的更大。分别在R1 vs R3和W3 vs R3两组进行GO功能富集分析和KEGG代谢通路分析,通过GO分析发现,在分子功能上,有部分基因显著富集在蛋白与转录因子结合活动上;通过KEGG分析,大部分基因富集在次生代谢产物合成通路、氨基酸和核酸代谢通路、酪氨酸代谢通路上,其中酪氨酸是甜菜色素合成的前体。综上所述,红皮红肉火龙果发育过程中伴随着大量甜菜色素的合成,酪氨酸作为前体在其中起关键作用,且该色素的合成需要大量氨基酸、酶及转录因子的参与。甜菜色素合成途径中的分子调控机制尚未明确,通过本研究可以发掘火龙果中甜菜色素合成相关的关键基因,是开展后续实验的基础,为甜菜色素代谢途径的完善提供了有用的信息。; 郭攀阳曾灿彬刘成立韦双双黄家权汤华; 关键词：转录组测序差异表达基因

β淀粉样多肽1-42对β2受体内化及AMPA依赖性mEPSC的影响及其作用机理: 目的:前期研究表明β2受体(β2AR)通过N末端与β淀粉样多肽1-42 (Aβ1-42)相互作用引起AMPA受体突触前活动非依赖性mEPSC.本研究在此研究基础上探讨Aβ1-42对β2AR内化和AMPA受体依赖性mEPS...; 王大勇韦双双吴昊

鱼类神经坏死病毒衣壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌外膜蛋白ompN1融合基因的原核表达被引量：1: 2020年; 目前在针对鱼类神经坏死病毒的疫苗研究中,主要是将神经坏死病毒某些蛋白作为抗原进行注射免疫,但是传统的注射免疫并不能有效地激发黏膜免疫。笔者将鱼类神经坏死病毒的衣壳蛋白(MCP)与鮰爱德华氏菌的跨粘膜蛋白ompN1融合表达,拟制备能够抵抗神经坏死病毒的粘膜疫苗;利用从NCBI GenBank库里获得的鱼类神经坏死病毒的外壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌的外膜蛋白ompN1的基因序列,将两者进行序列优化与全基因合成,分别构建原核表达载体:MCP-ompN1 pET28a和MCP pET28a和ompN1 pET28a,并在大肠杆菌内分别诱导表达融合蛋白MCP-ompN1,MCP,ompN1后,再利用包涵体纯化及透析复性获得MCPompN1,MCP,ompN1蛋白。SDS-PAGE结果显示,原核表达纯化得到了较纯的MCP-ompN1融合蛋白,Western Blotting结果表明,纯化得到的MCP-ompN1融合蛋白不仅具有MCP抗原性,还具有ompN1抗原性。本实验通过原核表达纯化得到了鱼类神经坏死病毒衣壳蛋白MCP和鮰爱德华氏菌外膜蛋白ompN1的融合蛋白MCP-ompN1,为进一步验证融合蛋白MCP-ompN1能否作为抵抗神经坏死病毒的粘膜疫苗奠定了基础。; 张转丹肖正泮武新丽孙艳罗应吴昊韦双双裴业春王大勇; 关键词：病毒性神经坏死病包涵体

TAIL-PCR的技术改良及对香蕉NBS-RGC5基因侧翼序列的克隆被引量：2: 2013年; 香蕉枯萎病是一种毁灭性真菌病害,对香蕉的种植和产业发展危害严重,研究香蕉枯萎病相关的抗性基因,具有重要的理论意义。对TAIL-PCR进行技术改良,以简并引物组合的方式与特异性引物进行扩增,代替最初的单一简并引物方式,在TAIL-PCR第一轮扩增的大循环中设置不同的退火温度;采用改良后的TAIL-PCR成功克隆了巴西蕉NBS型抗性蛋白(NBS-RGC5)基因的侧翼序列。; 罗静瑶陈云云谢俊韦双双夏幽泉汤华; 关键词：香蕉枯萎病侧翼序列

水稻贮藏蛋白质各组分在高温条件下的积累动态研究: 2014年; 稻米蛋白质的含量及组成是稻米品质和营养价值的重要指标,它既受遗传因素控制,也受到环境和栽培技术的影响。穗肥的施用明显提高了成熟期稻米粗蛋白的含量,但对各组分之间相对含量的影响不显著。高温胁迫处理较大程度改变了贮藏蛋白质组分的积累动态过程,包括57 kD以上多肽在内的溶于稀酸或稀碱的组分(被认为是谷蛋白的前体物质和谷蛋白聚合体),从灌浆一开始就维持在较高水平,高温胁迫后成熟的种子中谷蛋白多以高分子的聚合体状态存在,谷蛋白单体含量及醇溶蛋白含量降低。; 马启林李阳生邓用川袁潜华韦双双翟金玲罗越华; 关键词：灌浆期高温胁迫贮藏蛋白稻米品质

黑眶蟾蜍皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆与序列分析被引量：1: 2012年; [目的]克隆黑眶蟾蜍皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂基因。[方法]从海南海口产黑眶蟾蜍皮肤中抽提总RNA,经mRNA纯化后构建黑眶蟾蜍皮肤cDNA文库。根据已报道的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)序列,设计寡核苷酸引物用于筛选、克隆、测序。[结果]从所构建的cDNA文库中得到1个Serpin基因,命名为BmSP。对cDNA序列推导出的氨基酸序列分析表明,该BmSP蛋白属于Serpin家族中SERPIN B亚家族,与鼠鳞状细胞癌抗原2(SCCA2)同源。该蛋白C末端含有一个RCL环(Reactive center loop regions)和一段高度保守的五肽。[结论]与SERPIN B亚家族中其他类型蛋白氨基酸序列比较结果表明,黑眶蟾蜍BmSP与SERPIN B亚家族中其他类型成员氨基酸序列相似度较高,具有高度的保守性,可能在其防御天敌捕食的过程中发挥重要作用。; 韦双双关怀郑继平周海龙张英霞; 关键词：胰蛋白酶抑制剂黑眶蟾蜍 CDNA文库

香蕉枯萎病菌的分离鉴定与形态学研究被引量：4: 2010年; 香蕉枯萎病是一种毁灭性真菌病害,对香蕉的种植和产业发展危害严重,其病原为尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)。为了研究该病原菌的致病机理和香蕉的枯萎病抗性机理,笔者采用组织分离法,对分离纯化得到的候选真菌菌株进行了形态学和显微镜观察,采用CTAB法提取了真菌DNA,并对ITS序列进行了PCR扩增,通过ITS测序及生物信息学分析等手段,对该病原菌进行了分子鉴定。结果表明:分离得到的候选真菌为尖孢镰刀菌古巴专化型,是香蕉枯萎病的致病真菌。; 谢俊张旭一陈银华陈彩燕韦双双夏幽泉汤华; 关键词：香蕉枯萎病尖孢镰刀菌古巴专化型分子鉴定

香蕉对尖孢镰孢菌古巴专化型枯萎病的抗病分子机理研究: 汤华罗红丽陈银华谢俊韦双双夏幽泉柳晓磊严定平; 香蕉是最重要的热带水果之一。近年来，香蕉枯萎病的大面积爆发，使香蕉生产损失巨大。该项目经过3年攻关，研究香蕉枯萎病的分子病理机制，取得了如下成果：建立了香蕉枯萎病的病原菌分离和检测技术；建立了香蕉离体叶片的病原菌接种技术...; 关键词：; 关键词：香蕉枯萎病尖孢镰孢菌分子机制

香蕉枯萎病的抗病基因分离与抗性机制研究: 汤华谢俊韦双双; 香蕉是最主要的热带水果之一，经济地位重要。近年来，香蕉枯萎病的大面积爆发，使香蕉生产损失巨大。该项目从基因差异表达谱的角度入手，筛选差异基因，研究香蕉枯萎病的分子病理机制，取得了如下成果：建立了香蕉枯萎病的病原菌分离和检...; 关键词：; 关键词：香蕉枯萎病病原菌分离分子病理机制

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