韩丽丽
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苏云金芽胞杆菌sigK基因插入失活突变体的特点及其对cry3A基因启动子活性的影响被引量：3
- 2011年
- 【目的】构建苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)sigK基因插入失活突变体,分析突变体特点并明确其对cry3A基因启动子的影响。【方法】采用同源重组技术在苏云金芽胞杆菌HD-73菌株sigK基因中插入卡那霉素抗性基因,构建了sigK基因插入失活突变体。通过生长曲线测定、扫描电子显微镜观察晶体、芽胞形成情况和芽胞计数及SDS-PAGE等方法分析了突变体的特点;构建了遗传恢复菌株对上述性状进行了功能验证;利用启动子融合lacZ技术检测了cry3A基因启动子的转录活性。【结果】获得了苏云金芽胞杆菌HD-73菌株sigK基因突变体,生长曲线测定表明,突变体较出发菌株在稳定期后期生长较慢;扫描电子显微镜观察和芽胞计数分析显示,突变体丧失了形成芽胞和晶体的能力;SDS-PAGE分析表明突变体中伴胞晶体蛋白的表达量明显低于出发菌株和恢复菌株。利用载体pHT315携带sigK基因及其启动子在突变株中表达,所获得的遗传恢复菌株恢复了突变株产生芽胞和晶体的能力;sigK基因的突变可以提高cry3A基因启动子在产胞后期的转录活性,对cry3A启动子指导的Cry蛋白表达量没有显著影响。【结论】本研究证明sigK基因为苏云金芽胞杆菌芽胞形成所必需,并影响伴胞晶体蛋白的产量;sigK基因功能的丧失有利于cry3A基因启动子在产胞后期的转录。
- 杜立新魏娟韩丽丽陈榛张杰宋福平黄大昉
- 关键词：苏云金芽胞杆菌
- 苏云金芽胞杆菌gab基因簇表达与调控的研究
- 氨基丁酸(γ-Aminobutyric Acid,GABA)是四碳、非编码蛋白氨基酸,存在于大多数的原核和真核生物中.GABA 代谢途径是三羧酸循环(TCA)的支路,谷氨酸在谷氨酸脱羧酶催化下产生GABA,释放CO2; ...
- 韩丽丽王维彭琦束长龙张杰黄大昉宋福平
- 关键词：Γ-氨基丁酸启动子活性EMSA
- 苏云金芽胞杆菌gab基因簇表达与调控的研究
- γ-氨基丁酸(γ-Aminobulyric Acid，GABA)是四碳、非编码蛋白氨基酸，存在于大多数的原核和真核生物中。目前在微生物中对于GABA代谢旁路和其代谢物的功能了解很少，特别是在细菌芽胞杆菌属中报道的更少。本...
- 韩丽丽王维彭琦束长龙张杰黄大昉宋福平
- 关键词：Γ-氨基丁酸苏云金芽胞杆菌代谢途径
- 母细胞产生内含物的芽胞杆菌分析
- 2012年
- 在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)分离过程中发现有些芽胞杆菌产生与Bt相似的芽胞,但并不形成伴胞晶体,特别是发现它们在芽胞期的母细胞中含有丰富的内含物,对该类菌株的性质需要进一步明确。本研究选择6株该类型的菌株,对其种属、质粒、蛋白谱和杀虫活性等进行了初步分析。芽胞形态和质粒图谱分析结果显示,其与Bt菌株相似;肽指纹图谱分析发现选取的蛋白与蜡样芽胞杆菌(B.cereus)族细菌的蛋白匹配度最高;16SrDNA聚类研究表明,所分离的菌株的确与蜡样芽胞杆菌(B.cereus)族(包括Bc和Bt)同源性最高;从生物杀虫活性测定来看11-1菌株上清液对小菜蛾(Plutella xylostella)的校正死亡率达75.9%,而85-1和11-1菌株上清对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)的校正死亡率分别能达到100%和87.9%。本研究结果表明在Bt菌株的分离过程中,对于没有形成晶体但在芽胞形成时期还有内含物的菌株也应加以重视,这些菌株属于B.cereus族,具有潜在利用价值。
- 陈榛邵高祥韩丽丽束长龙张杰宋福平
- 关键词：肽指纹图谱芽胞杆菌
