高敏杰
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙戊酸钠增强骨髓瘤细胞对自然杀伤细胞敏感性及其机制的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察丙戊酸钠（VPA）对人类骨髓瘤细胞表面自然杀伤（NK）细胞活化性受体凝集素样同型二聚体（NKG2D）配体表达的影响，并研究VPA对NK细胞杀伤骨髓瘤细胞作用的影响及其机制，为骨髓瘤的免疫治疗提供实验依据。方法选用0．5、1、2、5mmol／LVPA处理人类骨髓瘤细胞ARK、OPM2，与无VPA处理的对照组进行比较，观察不同浓度VPA对细胞ARK、OPM2活力的影响。通过实时荧光定量PCR和流式细胞仪分别检测1mmol／LVPA处理的骨髓瘤ARK、OPM2细胞NKG2D配体在mRNA水平和蛋白质水平的变化。应用钙黄绿素释放法（CARE—LASS）检测VPA对NK细胞抗骨髓瘤活性的调节作用及机制。结果5mmol／LVPA处理ARK、OPM2细胞48h后，对骨髓瘤细胞活力有影响（P〈0．05）；与未处理细胞比较，1mmol／LVPA处理的两种骨髓瘤细胞MICA、MICB和ULBP2mRNA水平及蛋白质表达水平均增高（P〈0．05）。NK细胞对骨髓瘤细胞杀伤率增高，效靶比8：1时，VPA处理后ARK细胞杀伤率为60．2％，对照组为31．4％（P=0．018），VPA处理后OPM2细胞杀伤率为56．8％，对照组为22-3％（P=0．040）；且增强的杀伤率可以被NKG2D抗体特异性拮抗。NK细胞通过穿孔素和颗粒酶杀伤效应裂解肿瘤细胞。结论VPA明显上调骨髓瘤细胞的MICA／B、ULBP2表达，可增强NK细胞对骨髓瘤细胞的杀伤活性，NK细胞经穿孔素和颗粒酶杀伤途径杀伤骨髓瘤细胞，为骨髓瘤的临床免疫治疗提供了实验依据。
- 沙雪平蒋卫吴晓松高敏杰王宏梅施菊妹
- 关键词：丙戊酸NKG2D配体
- 自然杀伤细胞对人乳腺癌细胞株的杀伤作用及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察体外扩增自然杀伤(NK)细胞的表型,探讨其对不同乳腺癌细胞株的杀伤作用及其机制。方法抽取健康志愿者外周血15mL,分离单个核细胞,与基因修饰的K562细胞共培养,应用流式细胞仪采用Calcein释放法检测NK细胞的表型,计算NK细胞对乳腺癌细胞株MDA-MB231和MCF-7的杀伤率。结果扩增后NK细胞、自然杀伤T细胞(NKT细胞)、T淋巴细胞的平均含量分别为(74.2±12.9)%、(19.1±10.8)%、(4.3±0.8)%,与扩增前的(12.6±6.2)%、(7.7±2.7)%、(55.5±8.8)%比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。扩增后NK细胞的杀伤细胞活化受体NKG2D、NKp30、NKp44和DNAX辅助分子1(DNAM-1)的表达阳性率分别为(83.4±4.3)%、(80.6±5.1)%、(20.9±2.7)%和(87.2±3.9)%,均显著高于扩增前的(17.0±2.1)%、(18.0±1.8)%、(1.4±0.4)%和(50.1±4.9)%(P值均<0.05)。扩增后NK细胞对MDA-MB231、MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(61.7±8.0)%、(66.1±3.5)%,均显著高于扩增前的(28.2±3.2)%、(29.6±2.8)%(P值均<0.05)。扩增后主要活化分子的对照抗体、抗NKG2D抗体、抗NKp30抗体、抗NKp44抗体、抗NKp46抗体、抗DNAM-1抗体和联合全部抗体抑制NK细胞对MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(69.3±4.2)%、(43.6±3.5)%、(49.3±2.8)%、(47.1±4.9)%、(65.3±5.6)%、(41.1±3.8)%和(19.8±2.1)%。结论扩增后NK细胞表达部分活化分子增强,其对乳腺癌细胞的杀伤作用明显增强,扩增后NK细胞具有增强的抗肿瘤活性可能与这些活化分子高表达有关。
- 祖卫兵高敏杰高路杨洸姜卫星朱峰吴晓松施菊妹
- 关键词：自然杀伤细胞扩增体外乳腺癌
