魏澎
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定被引量：1
- 2009年
- 目的：对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法：以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果：dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论：通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。
- 郭奕阳马翠卿魏澎王秀荣冯惠东阎婉依魏林
- 关键词：A族链球菌单克隆抗体表位噬菌体肽库
- A族链球菌表面蛋白Fba保护性区段的鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的将A族链球菌表面蛋白Fba分段克隆、表达，免疫动物并攻毒，以鉴定各区段诱导的保护性免疫并确定保护性最强的区段。方法根据Fba蛋白的结构特点将其划分为4个重叠区域，以A族链球菌（GAS）的SSI-9为模板，PCR扩增4段蛋白的基因，克隆、表达后，Western印迹鉴定蛋白表达。4段蛋白纯化后分别免疫小鼠，同时设PBS对照组。ELISA检测各免疫组血清IgG水平，并用致死量的GAs（M＋Fba＋）攻击免疫3次后的小鼠，计算各组保护率。数据行方差检验和Fisher精确概率法。结果成功构建原核表达质粒pGEX-2T／FbaA1、pGEX-2T／FbaA2、pGEX2T／FhaA3和pGEX2T／FbaA4，成功表达了4段蛋白。Fba蛋白免疫小鼠后，实验组血清IgG随免疫次数的增加呈逐渐增高趋势。第3次免疫后，与PBS对照组比较，FbaA2蛋白组效价升高最为明显，达1：102400（F=1290．2，P〈0．01）。攻毒后，FbaA2蛋白组8只小鼠中有4只得到保护，FbaA1、FbaA3及FbaA4蛋白组各8只小鼠中，仅2只得到保护（P〈0．05）。结论成功构建、表达了Fba分段蛋白；初步确定FbaA2段可诱导较强的保护性免疫应答。
- 魏澎马翠卿郭奕阳顾海燕冯惠东王秀荣魏林
- 关键词：A族链球菌纤连蛋白类质粒
- A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘤细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104～108位氨基酸,该位点也是链球菌Fba蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。
- 马翠卿顾海燕郭奕阳胡光磊魏澎魏林
- 关键词：A族链球菌单克隆抗体表位
- GAS表面蛋白Fba保护性区段的鉴定及其表位的筛选
- 目的：A族乙型溶血性链球菌（GAS）是链球菌中致病性最强的一种，可长期寄居于人体鼻咽部和肠道中，引起各种化脓性炎症、猩红热、丹毒、新生儿败血症、脑膜炎、产褥热以及链球菌变态反应性疾病等。临床上存在着反复感染和难以治愈等问...
- 魏澎
- 关键词：A族链球菌免疫原性抗原表位
- 文献传递
