黄志刚
- 作品数：37 被引量：99H指数：6
- 供职机构：河北工程大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 原发性肝癌微创介入治疗术后HBV再激活及相关影响因素研究
- 韩聚强曹建彪任永强李国安郭汉斌熊锦华李亚松王帅龚丽娟黄志刚
- 河南医疗服务价格调整对医疗费用影响及分析被引量：3
- 2011年
- 普查河南省50所三级医院,通过对医院2005—2006年医疗费用进行调查分析。提出现行医疗服务项目价格政策抑制了医疗费用过快增长,同时,政府应完善医疗补偿机制,制定相关控制医疗费用措施,降低医疗费用。
- 杜进林曾军杰黄志刚修良昌罗皓
- 关键词：价格调整
- 幽门螺杆菌Omp22-HpaA融合基因工程菌蛋白的表达
- 2007年
- 目的:优化幽门螺杆菌Omp22-HpaA基因工程菌pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达条件,并对其表达产物进行纯化和鉴定。方法:在不同诱导时机、不同诱导剂(IPTG)浓度和不同诱导时间条件下诱导pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量。在优化条件下诱导工程菌表达,并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,采用Amyloss树脂预装柱对可溶性Omp22-HpaA蛋白进行分离、纯化,对纯化后的蛋白行Westernblot分析。结果:工程菌培养2h时加入IPTG(终浓度为0.4mmol/L)诱导7h,目的蛋白Omp22-HpaA表达量达到菌体总蛋白的20%以上。经纯化得到了较高纯度(>90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性。结论:建立了从pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1可溶性表达产物中纯化较高纯度Omp22-HpaA融合蛋白的方法。
- 黄学勇任义段广才范清堂郗园林黄志刚宋春花
- 关键词：幽门螺杆菌基因工程菌纯化
- cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变菌株的构建及鉴定被引量：8
- 2006年
- 目的:构建cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变株.方法:运用基因同源重组方法将卡那霉素抗性基因(kmR)连接到PCR扩增cagA基因两端区域产生的2个基因片段之间,并共同插人到pBluescriptSKⅡ(-)载体的多克隆位点中,构建出带卡那霉素抗性标志的缺失突变载体pBs-cagA-mutant.将突变载体转化到含完整cagA基因的突变受体MEL-Hpylori27菌株中.卡那霉素筛选出cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变株,并经PCR和DNA测序鉴定.结果:构建的突变载体经限制性内切酶酶切分析显示,产生的条带与设计结果完全一致.PCR方法扩增突变株cagA,kmR基因显示,cagA基因已被完整敲除掉,DNA测序证实筛选得到了cagA基因缺失的幽门螺杆菌突变株.连续培养25代后证实,幽门螺杆菌突变株具有良好稳定性.结论:首次成功构建出1株中国人来源的、cagA基因缺失的幽门螺杆菌突变株.
- 黄志刚段广才范清堂黄学勇
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因突变体
- 幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）致病的分子机制研究
- 幽门螺杆菌/(Helicobacter pylori，H.pylori/)是一种可长期定植于人类胃粘膜的革兰氏阴性螺旋形微需氧菌，在全世界范围内感染率超过50％。H.pylori是引起慢性胃炎和胃十二指肠溃疡的致病因子，...
- 黄志刚
- 关键词：幽门螺杆菌基因敲除蛋白质组
- 文献传递
- 河南省医疗服务价格调整对医疗费用结构影响的评价被引量：5
- 2011年
- 目的:比较河南省医疗服务价格调整对医疗费用构成的影响,为评价医疗服务价格调整政策提供依据。方法:调查98所医疗机构,对医疗服务价格调整前后的医疗费用进行比较。结果:一是门诊次均费用增长率为-2.48%,住院次均费用增长率为0.26%;二是药品费用有大幅下降,门诊次均药品费用下降5.68%,住院次均药费下降4.75%;三是工作量较2005年有所增加。结论:现行医疗服务价格调整政策抑制了医疗费用的过快增长。
- 杜进林曾军杰黄志刚罗皓徐秀娟
- 关键词：价格调整
- 幽门螺杆菌外膜蛋白omp22和黏附素hpaA融合基因原核表达系统的构建与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:构建表达幽门螺杆菌(Hp)的外膜蛋白omp22和黏附素hpaA融合基因的重组蛋白质候选菌株,为Hp疫苗研究提供依据.方法:用PCR方法扩增出带3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因omp22-hpaA,将其克隆到表达载体pMAL-c2X中转化大肠杆菌(E.coliTB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western Blot鉴定其免疫原性.结果:测序结果显示,omp22-hpaA融合基因片段由1326bp组成,为编码440个氨基酸残基的多肽,接头序列GGTGGAGGC已成功地插入omp22-hpaA融合基因中;SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量约为53ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的20%.结论:成功克隆并构建了omp22-hpaA融合基因原核表达系统.
- 黄学勇段广才范清堂郗园林黄志刚宋春花
- 关键词：幽门螺杆菌克隆基因表达
- 幽门螺杆菌cagA基因影响胃粘膜上皮细胞肿瘤相关蛋白表达被引量：2
- 2010年
- 目的筛选和鉴定与幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关基因A(cagA)有关的宿主细胞肿瘤相关蛋白。方法用幽门螺杆菌野生株和cagA基因敲除株分别与胃粘膜上皮细胞Ges-1共培养10h(细菌与细胞的比例为100:1),提取2组细胞总蛋白,进行等电聚焦和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,比较2组细胞蛋白质表达谱差异,选取差异蛋白点进行质谱分析鉴定。结果经肽质量指纹图(PMFs)检索分析鉴定,与cagA基因敲除株比对,幽门螺杆菌野生株攻击后的胃粘膜上皮细胞Ges-1总蛋白中的磷酸丙糖异构酶、膜联蛋白A1和α-烯醇酶(2个相邻位点)4个差异蛋白点均呈高表达,质谱评分依次为:325,254,395,347;肽段匹配率分别为:95%,79%,77%,76%。结论 3种差异表达的蛋白均与幽门螺杆菌cagA基因有关,属于胃粘膜上皮细胞肿瘤相关蛋白。
- 黄志刚段广才唐焕文胡利人杜进林潘海燕
- 关键词：胃粘膜上皮细胞蛋白质组
- 幽门螺杆菌中国株cagA全长基因克隆及其分子特征分析被引量：2
- 2007年
- 目的克隆幽门螺杆菌中国株MEL-Hp 27cagA全长基因,并进行分子特征分析。方法参考Hp26695基因组序列,分别针对cagA基因编码区保守序列和位于cagA基因上、下游的基因序列设计两对PCR引物,交叉分段扩增包括cagA基因编码区、5′、3′非编码区在内的全长基因序列,并对cagA基因调控序列、编码序列及源自中国的CagA分子EPIYA基序分布特点进行分析。结果Hp27cagA基因编码区长3510bp,编码1169个氨基酸。5′端非编码区长649bp,-10区、-35区分别位于起始密码子ATG上游89bp和154bp处,3′端非编码区长476bp。Hp27cagA基因编码区核苷酸序列与东亚菌株同源性为96%,与西方菌株的同源性仅为86%左右。Hp27CagA分子存在典型的EPIYA基序,属于ABD型,与国际参考株NCTC11637的AB-CCC型不同。比较源自中国的HpCagA序列的EPIYA基序分布特点,未发现中国Hp分离株之间存在CagAEPIYA基序与疾病结局(胃癌、慢性胃炎和十二指肠溃疡)的聚类关系。结论成功克隆幽门螺杆菌全长ca-gA基因;cagA基因编码区及非编码区序列存在东西方差异;未发现中国Hp分离株之间存在CagA EPIYA基序与疾病结局的聚类关系。
- 黄志刚段广才范清堂郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因克隆
- 食管癌易感基因C20orf54的生物信息学分析
- 2016年
- 目的利用生物信息学方法对食管癌易感新基因C20orf54进行特征分析和功能预测,以获得该基因及其编码蛋白更多的功能提示。方法应用Blat、Blast、ProtParam、SOPMA、ScanProsite、SignalP4.1、TMHMM、PSORT和UniGene等软件或数据库,进行染色体定位、序列的相似性比较、理化性质、二级结构、亚细胞定位、功能位点识别。采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR),验证C20orf54基因在食管癌细胞和鼻咽癌细胞中的表达情况。结果 C20orf54基因进化保守,蛋白质不稳定,具有疏水性,定位于细胞膜的可能性最高,序列中预测有蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-糖基化位点及N-豆蔻酰化位点。二级结构主要是α螺旋和无规则卷曲。C20orf54基因可在食管癌细胞和鼻咽癌细胞中表达。结论人类C20orf54蛋白是定位于细胞膜上的不稳定疏水蛋白,可能在体内参与多种生物学过程,但可能并不是在食管癌组织特异表达的分子标志。
- 黄志刚洪秋娜陈婷婷李戈楠何臻伦嘉欣林婉赖玉仙杨威邓俏莲
- 关键词：食管肿瘤生物信息学
