黄永城
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ作为多肽呈现载体的可行性研究
- 2006年
- 为了研究大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ(L-asparaginaseⅡ,AnsB)能否作为多肽呈现载体。选取乙肝病毒表面抗原(HBSAg)preS2结构域的核心抗原表位区作为模型多肽,构建了两种表达载体pET28a-AnsB-preS2L和pET28a-AnsB-preS2C,分别转化至表达宿主菌E.coliBL-21,LB培养基(Kanr)培养,乳糖诱导高效表达,通过渗透休克,DEAE 52-cellulose柱层析纯化获得了在AnsB C端融合有线状和环状模型多肽的嵌合酶AnsB-preS2L和AnsB-preS2C,两种嵌合酶分别保留了AnsB 81%、25%的催化活力,两者的pH稳定性均与AnsB相符。ELISA检测结果显示AnsB-preS2L与抗preS2抗体的结合能力较AnsB-preS2C强。证明AnsB确实能够作为一种表面呈现载体将线性外源多肽以融合表达的方式呈现在酶分子的表面,最终形成一种在每个亚基表面呈现有多肽的嵌合酶。最后,用富含带电序列的8肽(KRKRKKSR)替换核心抗原表位区作为模型多肽,进一步验证了AnsB作为多肽呈现载体的可行性和通用性。
- 林洁黄永城王学军吴洁刘景晶
- 关键词:外源多肽抗原表位
- 表面呈现技术及应用被引量:3
- 2002年
- 用表面呈现技术构建文库并从中筛选新的生物活性物质,如抗体、受体或疫苗,已成为研究生物新药的捷径之一。文章就原理及相关应用对各种表面呈现技术进行了综述。
- 黄永城刘景晶
- 关键词:文库抗体受体疫苗
- 构象化多肽酶表面呈现系统的建立及应用
- 自从噬菌体表面呈现技术发明以来,呈现技术以其筛选通量大的特点逐渐被人们所重视和使用,该课题的目的便是试图发展出一种具有自身特点的呈现系统.利用加端PCR的方法,我们在门冬酰胺酶的C末端引入需要呈现的多肽--乙肝表面抗原前...
- 黄永城
- 关键词:表位门冬酰胺酶二硫键
- 文献传递