黄瑊
- 作品数:20 被引量:82H指数:5
- 供职机构:广州军区武汉总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市研究生教育教学改革研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 植物雌激素通过缺氧诱导因子-1α与核因子-κB下调缺氧肺泡上皮细胞膜联蛋白A1的表达被引量:4
- 2013年
- 目的从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70%,根据是否用药分为:对照组(溶剂DMSO对照)、染料木黄酮(genistein,Gen)组、大豆苷元(daidzein,DD)组,每组细胞再根据是否缺氧再分为常氧组(N)、缺氧组(H)。Gen组、DD组于缺氧处理前分别加入Gen及DD,终浓度均为15μmol/L。缺氧组细胞置于缺氧培养箱(1%O2)24 h。取细胞培养上清及细胞裂解离心上清,结合甲酰肽受体特异性抑制剂tBoc2,通过趋化实验,检测其甲酰肽受体激动活性。用Western blot分析AnxA1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)在蛋白水平的变化,用RT2-PCR法分析其mRNA水平的变化。结果缺氧后的细胞冻融上清及培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),而植物雌激素处理后,两种上清的趋化活性均显著高于对照组(P<0.05)。Western blot与RT2-PCR检测结果显示,缺氧组AnxA1在蛋白水平和mRNA水平均高于常氧组(P<0.05),两种植物雌激素不同程度地削弱了缺氧对AnxA1的上调效果,同时对HIF-1α、NF-κB的蛋白水平也产生同样的影响。结论植物雌激素削弱了缺氧对AnxA1基因表达的上调效应,其机制与HIF-1α、NF-κB信号途径有关。
- 杨娟李晓栩陈建官立彬黄瑊白志川
- 关键词:缺氧肺泡上皮细胞植物雌激素膜联蛋白A1
- 缺氧对肺腺癌细胞甲酰肽受体及其侵袭力的影响
- 2012年
- 目的探讨缺氧对人肺腺癌细胞甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)表达及其对肿瘤细胞侵袭力的影响。方法将人肺腺癌细胞株A549暴露于常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下培养4、12、24 h,应用RT-PCR检测FPR1 mRNA水平,采用Western blot检测培养上清FPR1激动剂脂联素1(Annexin 1,ANX1)的表达量。用趋化实验检测缺氧对A549细胞FPR1活性的影响。用FPR1外源性激动剂fMLP(formyl-met-leu-phe)刺激细胞后,用RT-PCR观察FPR1 mRNA的变化;同时采用体外侵袭实验检测其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果与常氧组相比,缺氧上调A549细胞FPR1表达的同时也增加A549细胞FPR1的趋化活性,增加FPR1内源性激动剂Annexin 1的产生。fMLP刺激细胞后,FPR1 mRNA表达水平上调。体外侵袭实验结果表明,缺氧细胞侵袭能力显著增强,加入FPR1拮抗剂Boc2后,缺氧细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论缺氧增加肺腺癌细胞FPR1激动剂产生与FPR1基因表达。FPR1激动剂的产生在缺氧诱导的FPR1基因表达上调中发挥了作用。缺氧引起A549细胞侵袭力增强与FPR1有关。
- 胡振红李振华李晓栩徐刚官立彬唐中伟蒋春华黄瑊
- 关键词:缺氧肺腺癌
- 低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响被引量:18
- 2007年
- 目的:研究低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡和Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性成年Wistar大鼠随机分为4组:常氧对照组、低氧5 d组、低氧15 d组和低氧30 d组(各组n=6)。常氧对照组在平原喂养;低氧5 d组、15 d组和30 d组分别在低压舱内模拟5 000 m高原喂养5、15、30 d。采用流式细胞术和TUNEL法检测低氧对睾丸生殖细胞凋亡的影响。运用Western印迹技术检测低氧对大鼠睾丸内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果:低氧5 d组、15 d组和30 d组睾丸内发生生殖细胞凋亡的生精小管数量[每100个生精小管中,含有凋亡生殖细胞的生精小管数分别为(20.50±5.07)、(21.25±7.85)、(14.00±2.45)个]均非常显著地高于常氧对照组[(6.00±2.16)个,P<0.01]。凋亡的生殖细胞以精原和精母细胞为主。低氧15 d组睾丸组织亚单倍体细胞百分率[(2.18±0.82)%]显著高于常氧对照组[(1.30±0.33)%,P<0.05],低氧30 d组[(3.08±0.93)%]极显著高于常氧对照组(P<0.01)。低氧30 d组睾丸组织Bax表达显著高于常氧对照组(P<0.05),其灰度值分别为17.34±4.54和10.50±2.82。低氧30 d组睾丸组织Bax/Bcl-2比值显著高于常氧对照组(P<0.01),比值分别为0.40±0.10和0.27±0.04。结论:低氧诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡增多,慢性低氧引起的睾丸生殖细胞凋亡增多与Bax表达增加有关。
- 廖卫公高钰琪蔡明春吴艺黄瑊范有明
- 关键词:细胞凋亡低氧生殖细胞BAXBCL-2
- 复制慢性高原病动物模型实验教学中注意事项分析被引量:5
- 2015年
- 该文主要介绍实验教学中高原红细胞增多症合并高原心脏病动物模型复制的方法和注意事项,通过模型的复制,以及对存在的具体问题和注意事项的逐步剖析,使学生全面了解实验方法和取材方法,在实验前熟悉低压舱使用、动物饲养及动物取材注意事项,为学生提供一个标准化的模型复制程序,使复制高原红细胞增多症合并高原心脏病的动物模型更加稳定,降低动物的死亡率,提高模型复制的成功率,确保模型复制过程中进舱人员的安全。
- 李晓栩黄瑊杨诚忠谭小玲蔡明春崔中来官立彬
- 关键词:高原病实验教学
- miR-124对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭的影响及机制被引量:3
- 2016年
- 目的观察miR-124对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的调控作用,并探讨其作用机制。方法取NSCLC细胞系A549,分为对照组(转染microRNA scramble)、miR-124组(转染miR-124 mimics)和miR-124+Smad4组(转染miR-124 mimics和pc DNA3.1-Smad4),采用细胞划痕实验和Transwell小室基质渗透实验观察三组细胞迁移和侵袭能力,蛋白印迹法测定E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达。将A549分为三组,野生型质粒组、突变型质粒组及阴性对照组,采用荧光素酶法鉴定miR-124与Smad4的靶向关系。结果 miR-124组的划痕愈合率低于miR-124+Smad4组和对照组,侵袭细胞数少于其他两组(P均<0.01)。miR-124组E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量高于miR-124+Smad4组和对照组,N-cadherin蛋白相对表达量低于其他两组(P均<0.05)。野生型质粒组萤光素酶活性显著低于阴性对照组和突变型质粒组,证实miR-124与Smad4之间存在靶向关系。结论miR-124通过抑制Smad4基因表达抑制上皮间质转化,进而抑制NSCLC细胞迁移和侵袭。
- 李振华黄瑊胡振红高山
- 关键词:肺癌上皮间质转化
- 缺氧对肺腺癌细胞生长特性及血管形成的影响被引量:2
- 2005年
- 目的 探讨缺氧对肺腺癌肿瘤生长及血管形成的影响。方法 人肺腺癌细胞株A549暴露于常氧(空气,5%CO2)、缺氧(1%O2,5%CO2,94%N2)、无氧(95%N2,5%CO2)环境48h后,将细胞接种于裸鼠皮下,观察其生长情况。通过免疫组化染色计数微血管密度,测定移植瘤组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平。结果 移植10天后,缺氧组肿瘤体积显著大于常氧组。移植25天后缺氧组肿瘤体积、重量、微血管密度以及瘤组织中VEGF、bFGF水平均显著高于常氧组,而无氧组显著低于常氧组。结论 适度缺氧可以刺激肺癌细胞VEGF、bFGF等生长因子的表达,促进移植瘤血管形成,提高肿瘤的生长能力;而严重缺氧损伤癌细胞,影响生长因子合成表达,阻碍血管形成,抑制肿瘤的生长。
- 胡振红黄瑊傅祖红司斌刘志遐
- 关键词:细胞低氧血管形成血管内皮生长因子类
- 慢性低氧大鼠骨骼肌线粒体的蛋白质组学研究被引量:3
- 2007年
- 目的:采用蛋白质组学方法研究慢性低氧大鼠线粒体蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法:Wistar大鼠随机分为2组:慢性低氧组和对照组。动物麻醉后取双侧腓肠肌标本,分离纯化线粒体蛋白进行二维电泳和ImageMaster分析,对差异蛋白质用MALDI-TOF-MS质谱仪进行肽指纹图谱测定。结果:建立了大鼠腓肠肌线粒体蛋白质二维凝胶图像;与对照组相比,慢性低氧组大鼠线粒体350-450个蛋白点中共有35个蛋白表达显著改变,其中27个表达下调,8个表达上调;并对低氧相关的线粒体蛋白进行了鉴定。结论:慢性低氧可诱导低氧相关线粒体蛋白表达改变,其作用可能与线粒体氧化磷酸化、物质转运和脂代谢有关。
- 高文祥陈建高钰琪黄瑊
- 关键词:缺氧骨骼蛋白质组
- “高原环境对人体体能的影响”实验的设计与教学实践
- 2015年
- 高原生理学是高原医学专业学生必修的专业课。高原环境对人体的影响是该课程重要的教学内容。为增强学生对高原环境的感性认识,培养学生综合应用知识和严谨的科研思维,利用大型高原环境模拟舱,设计"高原环境对人体体能的影响"实验。通过教学实践证明,该实验设计科学、合理、可行,可增强学生对高原环境的感性认识,培养学生科研思维和综合应用知识的能力,能满足教学目的和要求。通过实践教学,更感悟到激发学生兴趣、培养综合应用知识能力和科研思维意识在实践教学中的重要性。
- 官立彬杨诚忠黄瑊谭小玲蔡明春李晓栩
- 关键词:生理学教学
- 人带3蛋白对红细胞携氧过程调控的研究进展被引量:2
- 2015年
- 带3蛋白(band 3 protein,Band3)是一种红细胞膜蛋白,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳时分布于第3条带而得名。Band3在红细胞膜中含量约为膜蛋白的25%,其属于糖蛋白的一种,在质膜中穿越12~14次,是多次跨膜蛋白。
- 官立彬杨诚忠李晓栩黄瑊
- 关键词:带3蛋白血红蛋白
- 缺氧时一氧化氮、血小板活化因子释放与多形核白细胞与肺微血管内皮细胞粘附有关被引量:3
- 1999年
- 目的:本文旨在了解缺氧时多形核白细胞(PMN)与肺微血管内皮细胞(PMVEC)粘附对血管壁通透性影响的机理。方法:利用兔PMN悬液与PMVEC单层共育模型,观察缺氧时兔PMN与PMVEC粘附率、血小板活化因子(PAF)、一氧化氮的变化(NO),通过CD18 单抗封闭试验观察了粘附率与PAF、NO释放间的相关关系。结果与结论:缺氧时致的PMN- PMVEC粘附明显影响了PAF、NO的释放。
- 黄瑊陈剑鸿罗德成
- 关键词:缺氧PAF一氧化氮多形核白细胞