乔福锋
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 特异AT序列结合蛋白-1促进胰岛素样生长因子结合蛋白-2在K562细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcDNA3.1-SATB1转染至K562细胞,通过6周G418的筛选获得阳性克隆,RT-PCR、实时PCR及Western印迹验证过表达情况,对阳性克隆细胞中IGFBP2的表达用RT-PCR、实时PCR及Western印迹方法进行检测;然后用RNAi的方法干扰阳性细胞中SATB1的表达后,同样用上述3种方法再次检测IGFBP2的表达状况;用生物信息学方法对IGFBP2基因进行MAR序列与SATB1结合位点搜索分析,寻找SATB1影响IGFBP2基因表达的机制.结果显示,在稳定转染的情况下,实验组K562-SATB1细胞与转染空载体pcDNA3.1的K562-3.1细胞和未转染细胞K562相比,IGFBP2 mRNA水平上调了近7倍,而蛋白水平变化不明显.RNA干扰后,IGFBP2的表达在mRNA水平也相应下调,蛋白水平的变化同样不明显.通过生物信息学分析发现,IGFBP2第1个内含子中可能存在2.5 kb MAR样序列,且MAR样序列上存在多个SATB1的潜在结合位点.综上所述,过表达SATB1可以使K562细胞中IGFBP2 mRNA表达水平提高,而且其调控机制可能与SATB1直接和IGFBP2基因中的MAR样序列结合有关.
- 乔福锋蔡蓉蔡霞许伟榕卢健
- 关键词：核基质结合区胰岛素样生长因子结合蛋白-2K562细胞
- SATB1参与K-562细胞中IGFBP2基因表达调控的研究
- 在真核生物基因组中，DNA以襻环状结构域附着在核基质上被隔离在不同的区域，这段与核基质特异结合的DNA序列即核基质结合区(MAR)。MAR大小在200bp到几个kb之间，通常在500bp左右，它不仅可以与细胞核骨架或核基...
- 乔福锋
- 关键词：肿瘤组织细胞调控基因表达
- 文献传递
