付润饶
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:四川农业大学动物医学院更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 检测鸡传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA方法的研究
- 鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的高度接触性急性传染病。该病在世界各地广泛流行,病患鸡常表现咳嗽,打喷嚏和气管哕音等呼吸道症状,并导致蛋鸡产蛋量和蛋品质的下降,肉鸡饲料转化率降低、平均日增重小...
- 付润饶
- 关键词:鸡传染性支气管炎间接ELISA法疫苗质量
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:5
- 2013年
- 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IBV M蛋白单克隆抗体。对制备的单抗进行单抗亚型、腹水ELISA效价、特异性、交叉反应性鉴定及Western blot分析。结果获得2株能稳定分泌抗IBV M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2C10和7H6,单抗亚型分别为IgM和IgG1;腹水ELISA效价分别为1∶25 600和1∶12 800;2株单抗均只与IBV发生特异性反应,而与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型、AIV H5抗原和鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)均不反应;2株单抗与5种基因型的其他10株IBV均有良好的反应性。结论制备出2株针对IBV M蛋白的单抗,为今后更深入地研究该蛋白的分子生物学功能、抗原表位的鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立等提供了有力的工具。
- 王富妍任雅邹年莉郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:4
- 2014年
- 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)S1蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法用差速离心纯化的IBV四川分离株Sczy3免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。利用IBV鼠高免血清建立间接ELISA,筛选杂交瘤细胞。强阳性孔经有限稀释法亚克隆,获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备腹水。用鼠单克隆抗体亚型鉴定试剂盒鉴定单抗的亚型,Western blot法分析单抗的反应原性,ELISA法分析单抗的特异性及其与不同IBV毒株的交叉反应性。结果经连续4次亚克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗IBV Sczy3株单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C8C1和2C10E7,其腹水效价分别为1∶12 800和1∶25 600。2株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgM亚型;均可特异性识别S1蛋白;2株单抗只与IBV发生特异性反应,与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型和AIV H5抗原均不反应,与其他5种基因型的10株IBV毒株均可产生交叉反应。结论成功制备了2株IBV S1蛋白单克隆抗体,为IBV的检测、抗原表位筛选及致病机理的研究等提供了材料。
- 邹年莉王富妍段真真郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体