何建明
- 作品数：27 被引量：64H指数：5
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理生物学更多>>
- EGFR/IGFR-1β异二聚体形成对吉非替尼抑制结肠癌细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的:观察EGFR(epidermal growth factor receptor)和IGFR-1β(insulin-like growth factor receptor-1β)的相互作用,探讨IGFR-1β对吉非替尼(gefitinib)抑制结肠癌细胞增殖的影响。方法:以免疫共沉淀法和Western blotting检测EGFR和IGFR-1β之间以及受体与下游信号通路蛋白AKT、MAPK的结合。以IGFR-1酪氨酸激酶抑制剂AG1024和吉非替尼单独或联合作用于3种结肠癌细胞(LoVo,HT29,HCT116细胞),MTT法检测细胞增殖率。结果:LoVo细胞(吉非替尼敏感型)在有或无吉非替尼作用下均不出现与EGFR结合的IGFR-1β条带,HT29细胞(吉非替尼中度敏感型)在吉非替尼作用下可见该条带,而HCT116细胞(吉非替尼耐受型)在有或无吉非替尼作用下均可见条带。LoVo细胞的吉非替尼作用组、HT29细胞的联合用药组以及HCT116细胞的AG1024作用组EGFR结合的AKT、MAPK显著减少(P<0.05)。LoVo细胞在吉非替尼组的细胞增殖率较对照组明显下降(P<0.05),AG1024单独组的增殖率无明显降低,联合用药组与吉非替尼单独组相比较并未进一步降低;HT29细胞在单独应用吉非替尼或AG1024时增殖率均无明显降低,联合用药组的增殖率显著下降(P<0.05);HCT116细胞在吉非替尼作用下增殖率无明显降低,但在AG1024作用下增殖率显著降低(P<0.05),联合用药组与AG1024单独作用组相比较并未进一步降低。结论:结肠癌细胞耐受吉非替尼作用可能或者部分可能与EGFR/IGFR-1β异二聚体形成激活IGFR-1β信号通路有关,抑制IGFR-1β活性在一定程度上可以提高结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性。
- 杨黎何建明沈健李建军梁后杰
- 关键词：结肠癌细胞吉非替尼表皮生长因子受体增殖抑制作用
- 40例肺癌合并肺不张PET-CT图像分析及对靶区勾画意义的探讨
- 庞学利陈伟何建明肖红张永克邓鹏
- 关键词：肺癌肺不张靶区PET-CT
- 稳定干扰αv整合素表达的HT-29细胞系的建立
- 2011年
- 目的探讨逆转录病毒介导RNA干扰(RNAi)稳定抑制αv整合素表达的有效性,并建立稳定抑制αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。方法设计并合成3对针对αv整合素基因的短发夹RNA(shRNA)序列,构建逆转录病毒质粒;脂质体转染逆转录病毒质粒至结肠癌细胞株HT-29;G418筛选,局部消化法挑选阳性克隆;Western blotting检测蛋白表达水平。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,构建成功的逆转录病毒载体被HindⅢ限制性内切酶切为两个分别长1950bp与5800bp片段。测序结果显示,针对αv整合素基因的3对shRNA序列皆成功插入逆转录病毒质粒;转染逆转录病毒载体的HT-29细胞持续表达绿色荧光蛋白,并对G418具抗性;Western blotting结果显示逆转录病毒介导的shRNA能有效地抑制αv整合素表达。结论逆转录病毒介导的shRNA能够高效、稳定地抑制αv整合素表达,进而可以建立稳定干扰αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。
- 何建明江恒庞学利肖红陈克力胡绍毅黄海辉梁后杰
- 关键词：整合素逆转录病毒RNAI
- 细胞间粘附在肺腺癌细胞株A549群集耐药中作用探讨
- 2004年
- 目的 检测肺腺癌细胞株A5 49单层培养与三维培养时对阿霉素 (adriamycin ,ADM)药物敏感性的差异 ,并探讨细胞间粘附在肺腺癌群集耐药 (multicellulardrugresistance)中可能的作用机制。方法 以多细胞球 (multicellularspheroids ,MCSs)为模型 ,比较MCSs与单层细胞 (monolayercells ,MCs)对ADM药物敏感性的差异。透射电镜观察细胞超微结构。间接免疫荧光法流式细胞术检测Bcl 2 ,Bcl xL ,Bax的表达。结果 MCSs由多层细胞组成 ,细胞间粘附广泛而紧密 ;可见镶嵌连接。与MCs相比 ,MCSs的药物敏感性显著减弱。MCSs的Bcl 2 ,Bcl xL表达量显著高于MCs ,ADM处理后表达显著升高。结论 MCSs能够较好地模拟体内实体瘤的细胞间粘附 ,具有群集耐药性 ;其机制可能与Bcl xL ,Bcl 2高表达相关。
- 何建明梁后杰边志衡胡绍毅
- 关键词：肿瘤耐药
- 不同培养方式中肺腺癌细胞系A549表达E-钙粘素的差异及其意义被引量：6
- 2004年
- 目的 初步探讨E 钙粘素在肿瘤群集耐药中的可能机制。方法 采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法 ,进行肺腺癌细胞A5 49体外立体培养 ,同时进行普通平面培养 ,通过流式细胞技术、Westernblot、原位细胞凋亡检测试剂盒、四唑盐 (MTT)比色法及血球计数器计数法检测细胞周期 ,E 钙粘素的表达 ,细胞凋亡率及对阿霉素(ADM)敏感性。结果 ①立体培养细胞存在E 钙粘素的高表达 ;②同平面培养比较 ,立体培养细胞出现细胞周期G1 期阻滞、细胞凋亡率低、对ADM敏感性低等表现 ,给予E 钙粘素阻滞剂SHE78 7后 ,两者差异明显缩小。结论 E 钙粘素介导的细胞 细胞粘附作用可通过调控细胞周期以及细胞凋亡 ,影响肺腺癌A5 49细胞对ADM的敏感性 ,在肿瘤群集耐药中发挥作用。
- 黄海辉胡绍毅边志衡何建明梁后杰
- 关键词：肺腺癌细胞系A549E-钙粘素细胞周期细胞凋亡
- 两种体外培养条件下肺腺癌A549细胞生物学特性的变化被引量：6
- 2004年
- 目的 比较体外肺腺癌A5 4 9细胞在平面及立体培养条件下细胞周期、细胞凋亡及对化疗药物敏感性的变化。方法 采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法 ,进行肺腺癌A5 4 9细胞体外立体培养 ,并通过流式细胞技术、原位细胞凋亡检测试剂盒、四唑盐 (MTT)比色法及血球计数器计数法比较两种培养条件下肺腺癌A5 4 9细胞在细胞周期、细胞凋亡及对阿霉素 (ADM)敏感性方面的差异。结果 通过倒置显微镜、电镜观察及照相 ,确定了体外三维立体培养模型的建立 ;同平面培养比较 ,立体培养细胞存在细胞周期中G1期阻滞现象、细胞凋亡率低 ,对阿霉素的敏感性低的特征。结论 腺癌A5 4 9细胞在两种体外培养条件下生物学特性存在明显差异 ,三维立体细胞培养模型更接近实体瘤的体内实际情况。
- 黄海辉胡绍毅边志衡何建明梁后杰
- 关键词：肺腺癌A549细胞药物敏感性
- 结肠癌HT29多细胞球的培养及其结构与生物学特性的观察
- 2010年
- 目的建立结肠癌体外三维细胞培养模型HT29多细胞球,鉴定并检测其基本生物学特性。方法琼脂糖抑制细胞贴壁、水平回旋振荡法培养HT29多细胞球;扫描电镜、HE染色、免疫组化检测多细胞球的组织病理学性质;透射电镜检测细胞超微结构;Cell counting kit-8检测药物敏感性。结果成功培养由细胞相互黏附形成的多层细胞构成的结肠癌多细胞球模型;多细胞球内细胞接触广泛而紧密,可见大量细胞连接;多细胞球局部可见腺腔样结构,细胞角蛋白表达强弱与腺腔样结构有关;多细胞球药物敏感性显性降低,在500μg/L奥沙利铂处理48h条件下,单层细胞生存分数为(9.3±2.0)%,而多细胞球则为(42.9±4.0)%,二者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了结肠癌多细胞球模型,此模型是研究体内无血管的微小结肠癌及结肠癌无血管区的较理想模型。
- 何建明江恒陈克力黄海辉庞学利梁后杰
- 关键词：结肠癌细胞黏附耐药
- 肿瘤科胸腔穿刺术技能培训体会被引量：1
- 2010年
- 何建明庞学利梁后杰
- 关键词：胸腔穿刺肿瘤学
- 磷脂酰肌醇3激酶信号通路影响细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中的作用被引量：12
- 2004年
- 目的 探讨PI3K信号通路在肿瘤群集耐药中的作用。方法 采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法 ,进行肺腺癌A5 49细胞体外立体培养 ,通过Westernblot、原位细胞凋亡检测、四唑盐 (MTT)比色法及血球计数器计数法检测Akt、Bcl 2、Bad的表达、细胞凋亡率及对阿霉素 (ADM )敏感性。结果 ①立体培养细胞存在Akt的高表达 ;②同平面培养比较 ,立体培养细胞存在Bcl 2高表达 ,Bad低表达 ,细胞凋亡率低 ,对ADM敏感性低的特征 ,阻断PI3K信号通路后 ,两者差异明显缩小。结论 PI3K信号通路可通过抑制细胞凋亡在肺腺癌A5 49细胞群集耐药中发挥作用 。
- 黄海辉梁后杰胡绍毅边志衡何建明
- 关键词：肺腺癌A549细胞PI3K信号通路细胞凋亡药物敏感性
- 丝裂霉素渗漏性损伤处理方法的实验研究被引量：1
- 2004年
- 目的 寻找治疗丝裂霉素渗漏性损伤的有效方法。方法 制作丝裂霉素渗漏性损伤的家兔动物模型 ,以消退指数和消退时间作为检测指标 ,比较不同处理方法的治疗效果。结果 冰敷治疗组和冰敷 +阿米福汀治疗组效果最好 ,其消退时间最短 ,冰敷治疗组动物组织学检查发现无明显皮肤炎性改变及坏死。结论 出现丝裂霉素渗漏性损伤后尽早采取冰敷治疗措施 ,可有效防止皮肤炎性反应及坏死 ,是一种有效的治疗方法。
- 胡绍毅刘黛薇何建明边志衡
- 关键词：丝裂霉素渗漏性损伤
