余为一
- 作品数：169 被引量：787H指数：14
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 免疫球蛋白G(IgG)三种提取方法比较被引量：18
- 2007年
- 比较3种提取猪血清中免疫球蛋白IgG方法的提取效果。分别用辛酸沉淀法,硫酸铵分步沉淀法,辛酸-硫酸铵沉淀法粗提猪血清免疫球蛋白IgG,并通过SDS-PAGE凝胶电泳、AlphaEaseFC凝胶成像分析软件、Bradford蛋白浓度测定法等比较3种方法的提取纯度和得率,同时比较3种方法的时效性和经济性。辛酸沉淀法提取IgG所用时间最短,只需1h,得率较高但纯度不高;硫酸铵盐析法提取的IgG纯度较高、得率也高,但时间较长;辛酸-硫酸铵分步沉淀法所得IgG纯度很高,但所用时间较长,得率也较低。3种提取方法各有特点,可根据不同的实验条件和目的选择不同的提取方法。
- 刘生杰朱茂英顾士彬唐梅周扬余为一
- 关键词：猪血清免疫球蛋白
- 一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定被引量：7
- 2009年
- [目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]先将原核表达产物His-PoIFN-γ免疫BALB/c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST-PoIFN-γ作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行间接ELISA和Western blot检测。[结果]试验获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Western blot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His-PoIFN-γ和GST-PoIFN-γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1∶160 000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链。[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。
- 张敬梅余为一李林张春玲
- 关键词：猪Γ-干扰素融合蛋白单克隆抗体
- 8株鳖源变形杆菌外膜蛋白的比较被引量：9
- 2001年
- 从 1 2批送检病鳖体内分离出 8株细菌 ,经形态学检查、生理生化特性测定、致病性测定和血清学鉴定 ,确定 7株为普通变形杆菌 ,1株为奇异变形杆菌。进一步采用十二烷基硫酸钠 (SDS)破菌法提取 8株鳖源变形杆菌的外膜蛋白 (OMP)进行SDS PAGE电泳 ,比较分析细菌OMP型。结果显示奇异变形杆菌的OMP型由 3条相对分子质量范围为 3 0× 1 0 4～4 3× 1 0 4的主要蛋白带组成 ;7株普通变形杆菌的主要外膜蛋白相对分子质量范围为 3 0× 1 0 4～6 7× 1 0 4,分属 2个OMP型 ,其中 4个分离株属OMP1型 ,由 4条主要蛋白带组成 ;其余 3个分离株属OMP2型 ,由 7条主要蛋白带组成。表明不同种变形杆菌的OMP型差异较大 ,同种不同株变形杆菌的OMP型相似 ,但蛋白带的迁移率及颜色深浅在菌株间仍有差异。此外 ,发现相对分子质量约为 4 3× 1 0 4的一条外膜蛋白带为所有菌株所共有 。
- 李槿年余为一祖国章葛萍
- 关键词：变形杆菌SDS-PAGE外膜蛋白型病原菌
- 细菌染色体DNA G+C mol%含量测定方法研究进展被引量：19
- 2003年
- 生物体的遗传物质DNA中四种碱基G、C、A、T的排列和比例是DNA特性的决定因素。染色体DNAG+Cmol%含量即DNA的碱基组成具有种特异性且不受菌龄和外界因素的影响,成为细菌分类和菌种鉴定的重要指标,其测定方法不断被改进和创新,主要包括纸层析法、浮力密度法、高效液相色谱法、热变性温度测定法(Tm法)和荧光法等,其中Tm法操作简便、精确度高、重复性好,最为常用,此法在国外早已发展,在国内也引起越来越多的重视,此法利用DNA的增色效应求Tm值(热变性温度),G+Cmol%含量与Tm值呈正比例关系。简略比较了测定细菌染色体DNAG+Cmol%含量的五种主要方法,具体介绍了Tm法测定细菌染色体DNAG+Cmol%含量的原理、测定程序、操作注意事项、G+Cmol%含量测定的意义和应用局限性及G+Cmol%含量测定方法的前景展望。
- 李琳李槿年余为一
- 关键词：细菌染色体DNA
- 蟹源拟态弧菌胞外产物的细胞毒性和致病性初步研究被引量：12
- 2004年
- 本试验对蟹源拟态弧菌(Vibriomimicus)HX-4菌株胞外产物(extracellularproductions,ECP)的细胞毒性和致病性进行了系统研究。采用微量板法检测胞外产物的细胞毒性,结果表明该菌胞外产物对HEp-2细胞具有较强的细胞毒性,病变细胞变圆,脱落;除100℃处理外,经56℃和胰酶处理后,胞外产物仍具有细胞毒性。通过动物实验测定了胞外产物的致病性,结果显示胞外产物对小鼠与中华绒螯蟹均有致死性,致死率均为100%。
- 李玉英李槿年余为一梁子安
- 关键词：拟态弧菌胞外产物细胞毒性
- DEAE-52层析对猪血清IgG提纯得率的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:提纯猪血清IgG,并分析DEAE-52层析对IgG得率的影响。方法:用硫酸铵盐析和DEAE-52阴离子交换层析两步法提纯猪血清IgG,以SDS-PAGE、Bradford法浓度测定和免疫双扩散来分析DEAE-52层析对IgG得率的影响。结果:DEAE-52层析获得两个分开明显无重叠洗脱峰,两峰均含有IgG,其中第一峰蛋白纯度达95.7%,得率为3.0～4.0mg/ml血清;第二峰IgG纯度59%。结论:DEAE-52层析能使猪血清IgG在两个洗脱峰中分布,两步法能从层析第一峰获得电泳纯IgG,对层析第二峰进一步纯化能大幅提高IgG得率。
- 刘生杰余为一朱茂英刘成文聂传朋李东伟
- 关键词：提纯层析得率
- 恒定链载体协助抗原肽结合MHCⅡ类分子并进入细胞内吞体
- 为探明鸡恒定链（Invariant chain,Ii）的胞浆区/跨膜区(Ii（Cyt/Tra）)作为载体是否可携带抗原肽在细胞内结合MHCⅡ类分子和进入转运途径的细胞器（内吞体）,构建4个基因目的片段(Ii、Ii（Cyt...
- 陈芳芳张旭林海彬谭红黎刘雪兰余为一
- 关键词：抗原递呈
- 文献传递
- 8株嗜温气单胞菌的外膜蛋白型及其聚类分析被引量：7
- 2005年
- 从送检病鳖、病鱼体内分离出 8株细菌 ,经形态学、生理生化特性、致病性和血清学鉴定 ,确定 3株 (BA1、BA3、BA6 )为嗜水气单胞菌 ,5株 (M1、BA 1 6、BA1 5、BA 1 0、XA2 3 )为温和气单胞菌。采用超声波破碎 - SI法提取其外膜蛋白(OMPs) ,进行 SDS- PAGE电泳 ,聚类分析 OMP型。结果表明 ,8株嗜温气单胞菌具有不同的 OMP型 ,与菌株来源、致病性及地域分布有关。 3株鳖源致病性温和气单胞菌 (BA1 6、BA1 5、BA1 0 )属同一 OMP型 ,鱼源非致病株 (M1 )与致病株 (XA2 3 )在 3 .2× 1 0 4 ～ 3 .5× 1 0 4 间有明显差异 ,鳖源非致病性嗜水气单胞菌 (BA6 )与致病株 (BA1、BA3 )的 OMP型相似 ,但蛋白带的迁移率及颜色深浅在菌株间仍有差异。根据 OMPs条带迁移率 ,通过类平均法对 8株嗜温气单胞菌进行系统聚类分析 。
- 吕爱军李槿年余为一屈艾温洪宇
- 关键词：外膜蛋白聚类分析
- 奶牛离体PBMC和体内免疫应答的个体差异及其机理的研究
- 1997年
- 检测１５头奶牛离体外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）和体内产生抗体免疫应答的结果表明，１．０μｇ／ｍｌ的ＰＷＭ或ＳＥＢ使ＰＢＭＣ增殖达最高值，但在分泌Ｉｇ中却表现出不同作用；还发现在群体内离体细胞增殖强度的变异程度（Ｃ．Ｖ≤１２．５％）小于分泌的Ｉｇ量的变异程度（Ｃ．Ｖ＝３１．９％～６２．２％，其中个别Ｉｇ量超出ｘ±２ＳＤ）。１５头奶牛在实验期间（１８０ｄ）的１２次血清样品中ＩｇＭ、ＩｇＧ１和ＩｇＧ２水平变异程度（Ｃ．Ｖ≤１０％）也小于它们个体之间的变异程度（Ｃ．Ｖ＝１１．８～１５．８％）。在对卵清蛋白为载体的异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）的特异性反应中，初次和再次反应的抗体滴度（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２）呈明显相关（ｒ＝０．６９８和０．８６７，ｎ＝１５；Ｐ＜０．０１）；而个体之间抗体滴度的变异程度大（Ｃ．Ｖ＝２８．４％～３６．７％），个别超出ｘ±２ＳＤ。分析表明，在ＰＢＭＣ分泌Ｉｇ水平或抗体反应滴度变异的个体与ＰＢＭＣ增殖强度和血清Ｉｇ水平无关。这些说明在免疫功能正常并相近的同种动物群体内，仍存在一定数量的个体。
- 余为一王志耕WolfgangLeibold
- 关键词：离体免疫应答遗传性乳牛
- 抓住动物免疫学知识特点 探讨其教学模式
- 2009年
- 针对动物免疫学发展迅速、抽象难懂、多学科交叉等知识特点,探讨了以提问式、启发式等多种教学方法结合的教学模式,同时也提出了动物免疫学教学改革的一些思路。
- 刘雪兰余为一李槿年
- 关键词：动物免疫学学科特点教学模式
