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中国人金属基质蛋白酶组织抑制因子-1基因的克隆与表达被引量：1: 2003年; 目的:克隆和表达中国人金属基质蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1;TIMP-1)基因,获得具有抗原性的人TIMP-1蛋白。方法:用RT-nest-PCR扩增TIMP-1编码区基因片段,用基因重组技术构建含该片段的重组质粒并进行序列分析。在大肠杆菌E.coli中表达融合蛋白MBP-TIMP-1,用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析鉴定,并用亲和层析试剂盒纯化融合蛋白MBP-TIMP-1。结果:经核苷酸序列分析表明,本研究克隆的中国人TIMP-1为624bp,与报道的国外TIMP-1基因序列同源。经SDS-PAGE和Western blot表明,表达的融合蛋白NBP-TIMP-1分子质量为66Ku,具有TIMP-1的抗原性,并可进行亲和层析纯化。结论:克隆了中国人TIMP-1基因,表达和纯化了具有免疫原性的融合蛋白MBP-TIMP-1,他将对肝纤维化的诊断有一定作用。; 刘双虎谭德明侯珏胡国龄; 关键词：中国人基因克隆基因表达肝纤维化

186株鲍曼不动杆菌药敏结果分析被引量：1: 2003年; 目的　了解鲍曼不动杆菌对抗生素的敏感性。　方法　分离鲍曼不动杆菌并进行药敏试验。　结果　亚胺培南对该菌最敏感 ,氨苄西林耐药。　结论　鲍曼不动杆菌对不同抗生素敏感性不同。; 阎祖炜李闻文侯珏龚道科余俊龙; 关键词：鲍曼不动杆菌药敏试验抗生素

人成熟型转化生长因子-β_1融合蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备与初步临床应用被引量：1: 2007年; 目的获得兔抗人成熟型转化生长因子-β1(TGF-β1)多克隆抗体,并将其初步应用于临床检测。方法将人成熟型TGF-β1融合蛋白经亲和层析法纯化,并将其作为抗原免疫家兔,获得兔抗血清,经饱和硫酸铵纯化,获得初步纯化的兔抗人TGF-β1多克隆抗体。采用双抗夹心间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定健康对照者、慢性肝病及肝硬化患者血清TGF-β1的OD值。结果获得初步纯化的兔抗人TGF-β1特异性多克隆抗体,该抗体能与人TGF-β1起反应。各组血清TGF-β1的检测OD450值为:轻、中度慢性肝炎组11.333±6.136,慢性重症肝炎组16.400±6.959,肝硬化组14.975±6.090,健康对照组7.275±3.222;前三组分别与健康对照组比较,差异均有显著性(P<0.01);慢性重症肝炎组、肝硬化组分别与轻、中度慢性肝炎组比较,差异亦有显著性(P<0.01)。结论制备的TGF-β1多克隆抗体可初步用于临床检测,判断肝纤维化程度。; 龚环宇胡国龄谭德明侯珏; 关键词：融合蛋白亲和层析法多克隆抗体

人成熟型TGF-β_1基因T克隆载体的构建被引量：1: 2003年; 目的　构建人成熟型TGF β1基因T克隆载体 ,为进一步研究人成熟型TGF β1的原核表达和功能打下基础。方法　应用RT PCR技术从人外周血单个核细胞扩增人成熟型TGF β1编码区cDNA基因 (336bp) ,并将其克隆至pUCM T载体 ,经限制性核酸内切酶EcoRI,HindIII的酶谱分析和DNA测序分析证实。结果　成功构建人TGF β1/T载体 ,可进一步用于基因表达和表达产物的功能研究。结论　人TGF β1/T载体的构建 ,为进一步研究其基因表达和功能打下基础。; 龚环宇胡国龄谭德明侯珏; 关键词：人外周血单个核细胞基因表达肝纤维化

CCR5基因5′侧翼区的克隆及调控功能初步研究: 2002年; 目的 :研究CCR5基因 5′侧翼区的调控序列。方法 :分段构建CCR5基因 5′侧翼区的pCAT报告基因载体 ;分析各片段在Hela细胞中的CAT调节活性。结果 :CCR5基因 5′侧翼区基因 - 1～ - 4 86bp序列的pCAT重组质粒在Hela细胞中能明显表现CAT上调活性 ,其活性比pCATenhancervector的活性高 3倍。结论 :CCR5基因 5′侧翼区基因 - 1～ - 4; 沙新平胡国龄谢玉桃陈曦刘映霞龚环宇侯珏李萍; 关键词：克隆 CCR5基因启动子增强子

人基质金属蛋白酶-1融合蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备与初步应用: 2003年; 目的 :获得兔抗人基质金属蛋白酶 1 (MMP 1 )多克隆抗体 ,并将其初步应用于临床检测。方法 :将人MMP 1融合蛋白经亲和层析法纯化 ,并将其作为抗原免疫家兔 ,获得兔抗血清 ,经饱和硫酸铵纯化 ,获得初步纯化的兔抗人MMP 1多克隆抗体。用双抗夹心间接酶联免疫吸附实验 (ELISA)测定正常对照、慢性肝病、肝硬化患者血清MMP 1的OD值。结果 :获得初步纯化的兔抗人MMP 1特异性多克隆抗体 ,该抗体能与人MMP 1起反应。结论:制备的MMP; 侯珏胡国龄刘双虎谭德明刘映霞沙新平; 关键词：纯化多克隆抗体

浅谈习题集对教学的辅助作用被引量：1: 2005年; 随着卫生部规划教材出版,相应的习题集便随着出版。习题集是教学的辅助教材,有益于教学抓重点,拓宽思路,帮助教学。但也有其局限性,促使学生为考试而围绕习题集学习,老师授课也时有受习题集影响,存在一些利与弊。试提出几点讨论,以提高对习题集的正确认识与应用。; 李闻文侯珏; 关键词：习题集教学试卷教材出版

人基质金属蛋白酶-1的基因克隆、表达及其产物抗原性的分析: 2003年; 目的　构建人基质金属蛋白酶 1(MMP 1)基因重组质粒的克隆 ,获得具有抗原性的人MMP 1融合蛋白。方法　从人肝组织提取总RNA ,以此为模板 ,逆转录巢式PCR扩增MMP 1全编码区基因片段 ,构建含目的片段的T载体克隆及原核表达载体 pMAL c2x重组质粒亚克隆 ,经异丙基 β D半乳糖苷酶 (IPTG)诱导表达MMP 1重组质粒菌 ,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western blot对重组蛋白进行分析鉴定。结果　经核苷酸序列测定和免疫印迹鉴定 ,成功地构建了人MMP 1重组质粒基因工程菌 ,并表达具有MMP 1抗原性的融合蛋白。结论　构建了人MMP 1重组质粒克隆 ,获得了具有抗原性的MMP 1融合蛋白 ,这将有助于今后制备MMP 1多克隆抗体。; 侯珏胡国龄刘双虎谭德明欧阳颗; 关键词：基因克隆基因表达原核表达抗原性肝纤维化

人成熟型TGF-β_1基因克隆、表达纯化及抗原性的检测: 2003年; 目的 :构建人成熟型TGF - β1基因原核表达载体 ,表达并纯化人成熟型TGF - β1融合蛋白。方法 :应用基因重组的方法 ,构建成熟型TGF - β1原核表达载体 ,诱导表达人成熟型TGF - β1的融合蛋白 ,并应用亲和层析法纯化重组融合蛋白 ,应用Western -Blot鉴定其抗原性。结果 :成功构建人成熟型TGF - β1原核表达载体 ,获得人成熟型TGF - β1融合蛋白 ,其抗原性较好。结论 :人成熟型TGF - β1基因原核表达载体的成功构建 ,可高效表达人成熟型TGF - β1融合蛋白 ,为进一步研究其功能和获得其多克隆抗体奠定了基础 ,并为开发国产人TGF - β1诊断试剂做必要的准备 ,对肝纤维化的防治具有较大意义。; 龚环宇胡国龄谭德明汪玲侯珏刘映霞; 关键词：基因重组融合蛋白

综合性大学医学临床免疫学教学改革的探索与实践被引量：1: 2012年; 临床免疫学和免疫检验是临床实验诊断学的主干课程之一,将临床免疫学教学作为一门相对独立的医学理论和实验技术应用课进行设计,转变教学模式,临床免疫学实验室的基本技术和常用技术的原理、操作、应用和临床意义为基础,适当突出临床运用广泛的相关内容,免疫系统疾病的特异性,靶向性为契机,弥补教材上知识与当前实际临床运用知识更新脱节的缺陷,在总结目前临床实际运用的新技术、新手段,帮助医学生拥有最新的医学视觉,最新的医学触觉,掌握最新的医学动态,提高医学生学习能力、研究能力和创新性思维,更好临床医疗直接接轨.重视实验教学,引入最新的型号的临床实验室使用的新仪器,直接培养临床需要的实验人才和医学人才.; 高戈徐克前李闻文侯珏张文玲龚道科阎祖炜高洁生; 关键词：临床检验诊断学临床免疫学教学改革

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侯珏

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