信洪一
- 作品数：9 被引量：55H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心更多>>
- 发文基金：四川省重点科学建设项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭瘟病毒UL24基因的分子特征分析被引量：1
- 2009年
- 根据本实验室获得的鸭瘟病毒的一段基因序列设计引物，利用PCR扩增UL24基因并克隆到pMD18-T载体，阳性重组质粒进行酶切鉴定、测序验证与生物信息学分析。结果显示，获得的UL24基因全长1230bp，编码409个氨基酸；与其他26株疱疹病毒科中α-疱疹病毒亚科的UL24基因的相似性较β和γ亚科高，其中与α亚科禽疱疹病毒属中的GaHV-3相似性最大（34．7％）；遗传进化树显示，该基因编码的蛋白与火鸡疱疹病毒的UL24蛋白的亲缘性最近。该蛋白是一种保守但不含信号肽的外膜蛋白，具有5个潜在的N-糖基化位点和19个磷酸化位点；编码的氨基酸Ala，Apn，Glu，Phe，Leu，Arg，Thr，Val具有一定的偏嗜性。二级结构分析显示，α螺旋和无规卷曲含量高，均达46．94％，而口折叠仅占6．11％；同源建模比对，未发现与之匹配的三级结构；预测的抗原表位主要位于肽链第36～48、241～323、344～379位区段。
- 贾仁勇程安春汪铭书葛菡朱德康信洪一齐雪峰陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒分子特征生物信息学分析
- 新城疫病毒B_(95)株的RT-PCR检测
- 2004年
- 根据文献发表的 F基因序列 ,设计了 1对新城疫病毒 B95株的特异引物 NDV- P1 / P2 ,探讨了以其进行 RT- PCR检测的可行性。结果证明 ,用该引物可以扩增出 1条 310 bp的特异核酸带 ,敏感性为 0 .0 0 4 3mg/ L。
- 申之义苗儒王俊平焦静波信洪一李平安
- 关键词：新城疫病毒B95株
- 鸭瘟病毒US3基因的发现、原核表达及应用研究
- 1鸭瘟病毒US3基因发现、克隆及分子特性分析鸭瘟病毒给养鸭业带来极大的危害,然而对于该病毒的分子生物学信息了解甚少。本文通过实验室构建的DEV基因组文库发现了一个编码DEV US3蛋白的开放阅读框,并通过PCR检测和克隆...
- 信洪一
- 关键词：鸭瘟病毒原核表达转录时相亚细胞定位ELISA免疫荧光
- 文献传递
- 鸡新城疫B<,95>株弱毒疫苗及B<,95>株病毒RT-PCR检测方法的研究
- 该试验首先就NDVB<,95>株在鸡胚和Vero细胞上的培养效果进行了比较,选择了培养效果好的鸡胚尿囊腔接种途径,增殖培养了B<,95>株病毒.经对培养的病毒尿囊液检测,EID<,50>达10<'7.75>.在无菌性检验...
- 信洪一
- 关键词：免疫效力免疫期PCR检测
- 文献传递
- Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：40
- 2007年
- 根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒（DHVⅠ）RNA聚合酶基因序列，应用Primer Premier5．0软件设计了1对引物，建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带，而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒（H5N2亚型）、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌（5：A）的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100％，对脾、肺、脑病料的检出率显著（P≤0．01）高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987～2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100％（19／19）、36．84％（7／19）和57．98％（11／19），对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100％（48／48）、56．25％（27／48）和75．00％（36／48）。结果表明，建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。
- 程安春汪铭书信洪一陈海军杨苗郭宇飞朱德康贾仁勇袁桂萍陈孝跃
- 鸭瘟病毒gC基因的克隆及其分子特性分析被引量：9
- 2008年
- 对已构建的鸭瘟病毒(DPV)DNA文库重组质粒测序后,运用ORF Finder、BLASTN等工具进行全面生物信息学分析,根据分析结果设计引物,以DPV DNA为模板进行PCR扩增和T克隆,获得完整基因,经测序和探针核酸斑点杂交进行验证。结果证实,获得的完整ORF片段(ORF1296)为DPV的gC基因(GenBank登录号EU076811),全长1 296 bp,与已报道的其他疱疹病毒gC基因具有较高的同源性,它编码432个氨基酸,蛋白分子质量为45 ku、等电点(PI)为5.292,具有疱疹病毒典型I型膜蛋白结构特征。gC基因进化树分析表明,DPV与α-疱疹病毒亚科的鸟源疱疹病毒亲缘关系最近,编码的gC蛋白多为柔性区域,富含无规卷曲,含少量α-螺旋和β-折叠,氨基酸序列的第21～24、50～58、67～70、161～171、273～281、387～393位最有可能为抗原表位。此结果为进一步开展DPV gC基因及其编码蛋白的深入研究提供了有用数据。
- 徐超李欣然信洪一练蓓程安春汪铭书朱德康贾仁勇罗启慧陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒GC基因克隆分子特性
- 鸭瘟病毒UL51基因在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：1
- 2009年
- 为阐明鸭瘟病毒(DPV)UL51基因的特性和功能,根据DPVUL51基因序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增UL51基因,并将其克隆至pMD18-T载体上,经双酶切和测序鉴定后,再将该目的片段亚克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体上,得到重组质粒pcDNA3.1-UL51,通过脂质体介导将其转入COS-7细胞;应用实时荧光RT-PCR、Western-blotting和间接免疫荧光法检测UL51基因在COS-7细胞中的转录、表达和定位情况。结果表明,UL51基因在转染后6 h即已开始转录,12 h开始表达,24 h时转录和表达量均达最高峰,之后逐渐降低。该基因在COS-7细胞中表达蛋白的分子质量为33 ku,比预测的分子质量(约27.1 ku)大。间接免疫荧光法显示,该基因产物早期聚集于COS-7细胞的近核区域,晚期位于胞浆和胞核中。
- 沈婵娟程安春汪铭书郭宇飞信洪一徐超贾仁勇韩新峰
- 关键词：鸭瘟病毒真核表达载体COS-7细胞实时荧光RT-PCR免疫印迹间接免疫荧光法
- 鸡新城疫病毒B_(95)株免疫研究被引量：2
- 2003年
- 本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95 株病毒。经对培养的尿囊液病毒价达EID50 107.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求 ,将其选作试验用疫苗进行了试验。结果表明 ,该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为105.75,拌料免疫最小剂量为106.75。以B95 株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡 ,在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力 ,免疫期可达4个月。同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果 ,攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著。拌料免疫效果良好 ,与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著。B95 株苗在0～4℃条件下保存4个月 ,免疫攻毒保护率达80% ;在室温下保存2个月 ,免疫攻毒保护率达100%。
- 申之义苗儒王俊平焦静波信洪一李平安
- 关键词：B95株免疫效力免疫期
- 鸡新城疫病毒B_(95)株的RT-PCR检测方法研究
- 2003年
- 本试验设计了一对B95 株的特异引物NDV -P1/P2,探讨了对其进行RT-PCR检测的可行性。结果证明 ,用该引物可以扩增出一条310bp的特异核酸带 ,敏感性为0.0043ng/ul。
- 申之义苗儒王俊平焦静波信洪一李平安
- 关键词：新城疫病毒B95株RT-PCR检测方法
