吴任
- 作品数：8 被引量：55H指数：4
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 克氏原螯虾热休克蛋白70基因表达的定量研究被引量：3
- 2009年
- 根据实验室克隆的克氏原螯虾（Procambarus clarkii）HSP70（SCHSP70）的核酸序列，制备内部缺失42bp的核酸片段作为竞争性模板。采用竞争性RT-PCR的方法，定量测定克氏原螯虾组织的SCHSP70mRNA的袁达量。结果显示，SCHSP70有广泛的组织分布，但是在正常情况下表达量均较低。经2h热休克处理，7种组织的SCHSP70 mRNA的表达量均显著上升，表明该SCHSP70可能是一种热诱导型HSP70。心脏组织scHSP70在热激前后的表达量均较高，分别为1．12×10^5和4．80×10^5分子／ug总RNA。而血细胞中SCHSP70的表达在热激前后均处于最低水平，分别为0．191×10^4和1．61×10^4分子μg总RNA。在0～8h长时间的热休克实验中，心脏组织scHSP70的表达随着热休克时间的延长，呈现增强的趋势，提示心脏组织在虾类的应激反应中发挥了重要的作用。
- 孙勇章力雷腊梅李慕婵吴任谢数涛
- 关键词：热休克蛋白70热休克
- 亚致死温度热休克对凡纳滨对虾的保护作用被引量：9
- 2005年
- 以亚致死温度(35℃)热休克凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei2 h,再进行致死温度(40℃)热刺激,凡纳滨对虾的存活率为54.2%。以亚致死温度对凡纳滨对虾热休克2 h,正常水温(25±0.5)℃下分别恢复2、6、12和24 h,再对其进行白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)注射感染,得到凡纳滨对虾的平均存活时间分别为101.43、98.07、76.92和63.28 h,与未经35℃热休克的对照组的平均存活时间(46.89 h)相比,均存在极显著差异性(P<0.01)。证明了适当的热休克应激,不仅能提高凡纳滨对虾对高温的热耐受性,还显著地增强了凡纳滨对虾对WSSV感染的抵抗性。
- 谢数涛吴任许忠能林小涛张其中
- 关键词：热休克白斑综合症病毒
- 克氏原螯虾一种诱导型HSP70基因克隆及分析被引量：5
- 2009年
- 克氏原螯虾是我国淡水虾类养殖的重要品种,具有很强的抵御各种环境胁迫和各种刺激的能力。本文以该虾为对象,通过基因克隆以及从基因水平探讨HSP70s与环境应激之间的关系,为深入研究水生无脊椎动物HSP70s功能提供基础。采用RT-PCR和RACE方法从克氏原螯虾(Procambarus clarkii)心脏组织中克隆得到一种HSP70 cDNA(scHSP70),其全长为2271bp,包括1902bp的完整编码序列、142bp的5′及221bp的3′端非翻译区,GenBank登陆号DQ301506。基因组DNA扩增表明该基因仅由一个外显子组成。根据cDNA序列推导出scHSP70由635个氨基酸组成,分子量为69.6kD,理论等电点为5.34。该序列存在真核细胞HSP70家族的三个特征标签。SWISS-MODEL蛋白三维结构预测显示scHSP70在N端形成ATP酶结构域,在近C端形成底物肽结合结构域。克氏原螯虾在系统发生树上的进化地位与传统分类学相一致。半定量RT-PCR实验表明,scHSP70有广泛的组织分布,在心脏中表达量最高,在血液中最少。热激后该基因大量表达,说明该基因是一种诱导型HSP70。这为从蛋白水平研究克氏原螯虾HSP70与环境应激之间的关系提供基础。
- 孙勇章力李慕婵吴任雷腊梅谢数涛
- 关键词：克氏原螯虾诱导型热休克蛋白70心脏
- 金藻基因组DNA的提取与PCR扩增被引量：11
- 2008年
- 以金藻门群体和单细胞藻类的典型代表——球形棕囊藻和绿色巴夫藻为研究对象,对金藻基因组DNA的提取方法进行了深入研究,并以psbA基因的PCR扩增结果对4种DNA提取方法进行了检测。结果显示,PVP法和高盐法安全、快速、经济,获得的基因组DNA产量高,但DNA杂质含量也较高。CTAB法虽然也具有安全、快速等优势,但提取的DNA产量较低。玻璃粉法提取的DNA质量好,产量也较高,但操作略为烦琐,经济费用高。结论:就球形棕囊藻而言,玻璃粉法是4种方法中最好的DNA提取方法。就绿色巴夫藻而言,4种方法都行,但是从经济和方便考虑,以高盐法为最好。
- 杨泽民章群谢数涛吴任
- 关键词：球形棕囊藻绿色巴夫藻CTAB法
- 高产5-氨基乙酰丙酸光合细菌株hemA基因的克隆与序列分析
- 2007年
- 对从不同生态环境中分离得到的20株光合细菌,进行5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)的产量检测,结果显示一株分离自广州市云溪公园池塘底泥的菌株R5,其5-ALA产量最高,达4.92 mg/L.根据GenBank上公布的5-氨基乙酰丙酸合成酶hemA基因序列,设计引物进行hemA基因的克隆.结果表明,菌株R5的hemA基因序列长1230 bp,不含HindⅢ酶切位点,G+C为64.68%,编码一个409个氨基酸的酶蛋白,分子质量为44.9 ku,与Rho-dopseudomonas palustrisKUGB306菌株的hemA基因序列相似性为98.6%,氨基酸序列相似性为100%.系统发生树显示,菌株R5与Rhodopseudomonas palustris处在一个分支,显示菌株R5可能是Rhodopseudomonas palustris,这与微生物鉴定实验的结果一致.本研究克隆的高产5-氨基乙酰丙酸菌株的hemA基因,为后期获取高产5-ALA的基因工程菌打下基础.
- 孙勇吴任章力李慕婵雷腊梅谢数涛
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸光合细菌沼泽红假单胞菌HEMA
- 凡纳滨对虾一种HSC70的cDNA克隆，原核表达及其体内表达分析
- 热休克蛋白（HSPs）也称为应激蛋白，是一个高度保守的蛋白质家族，广泛存在于所有的细菌、酵母、植物、无脊椎动物和脊椎动物的细胞内。细胞在正常生理情况下构成性地表达该应激蛋白（constitutive HSPs），也可由一...
- 吴任
- 关键词：热休克蛋白70分子伴侣凡纳滨对虾基因克隆原核表达
- 文献传递
- 凡纳滨对虾热休克蛋白70的原核高效表达被引量：26
- 2006年
- 将凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)热休克蛋白70基因(heat shock protein 70,HSP70)克隆到原核表达载体pET-3c中,经酶切和DNA测序鉴定后,将重组质粒转入表达宿主BL21(DE3),在不同温度、时间下经IPTG诱导表达,收集菌液,进行SDS-PAGE和Western blot检测,并用软件Bandscan分析蛋白表达水平。结果表明,成功构建含凡纳滨对虾HSP70基因的重组表达载体pET-3c/HSP70,表达的目标蛋白相对分子量约为72 kD,并能与小鼠抗人HSP70抗体特异性结合。37℃诱导5 h目标蛋白表达量最高;但25℃诱导目标蛋白的可溶性比例达80%,目标蛋白占全菌总蛋白70%以上,均较37℃为高。
- 吴任谢数涛孙勇完颜小青张其中
- 关键词：凡纳滨对虾热休克蛋白70原核表达
- 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)Hsp70基因PCR扩增及序列分析被引量：4
- 2005年
- 目的:为获得凡纳滨对虾的热休克蛋白70(Hsp70)基因并分析其基因序列.方法:根据GenBank中斑节对虾(Penaeusmonodon)Hsp70基因的cDNA序列,设计引物,对经高盐法提取的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)基因组DNA,采用优化的降落PCR(TouchDownPCR)程序,扩增凡纳滨对虾Hsp70基因的全长序列.结果:PCR扩增得到一条长1983bp的目的DNA片段,回收纯化该片段并测定其核酸序列.用DNAman软件分析发现,该核酸序列中不含内含子,编码区全长为1959bp;经BLASTn和BLASTx软件分析发现,该编码区核苷酸序列与斑节对虾、罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)的Hsp70基因序列的相似性分别为97%和62 2%.根据核苷酸序列所推导出的Hsp70氨基酸序列,其与斑节对虾、罗氏沼虾的相似性分别为99 9%和92 6%.结论:成功地从凡纳滨对虾基因组DNA中直接扩增出Hsp70基因的全长编码区序列.
- 吴任谢数涛张其中许忠能
- 关键词：HSP70基因降落PCR凡纳滨对虾
