周巍
- 作品数：29 被引量：214H指数：7
- 供职机构：河北省食品安全重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划河北省科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 狐狸和貉子动物源性成分双重PCR鉴别被引量：5
- 2017年
- 根据狐狸和貉子线粒体基因中保守序列设计特异性引物,建立一种基于双重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的肉及肉制品狐狸和貉子源性成分鉴定方法,同时通过双重PCR体系可一次反应同时扩增出狐狸和貉子条带,凝胶电泳条带整齐,背景清晰。结果表明:建立的狐狸和貉子动物源性PCR测定方法具有良好的特异性和灵敏度,其中狐狸引物单体系最低检测量为10 pg,貉子引物单体系最低检测量为1 pg,双重PCR体系由于引物的竞争作用使狐狸和貉子两种引物的检测灵敏度均降低至单体系的1/10。
- 杜利强章晶晶张涛齐艳玲李顺才李岩周巍张岩
- 关键词：狐狸貉子双重PCR
- FTA滤膜用于基因芯片检测肉中常见食源性致病菌的研究
- 通过不对称PCR技术和基因芯片技术建立了一种准确、快速和高敏感性的检测肉中常见食源性致病菌的方法。用FTA滤膜从食品样品中直接提取模板DNA。用玻片作基因芯片的固相载体。选择常见的引起食物中毒的15株菌的16SrDNA基...
- 周巍
- 关键词：基因芯片致病菌FTA滤膜
- 文献传递
- 乳粉中常见致病菌的多重荧光PCR检测被引量：1
- 2014年
- 利用多重荧光PCR技术快速检测乳粉中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌.以沙门氏菌的invA基因、志贺氏菌的ipaH基因、金黄色葡萄球菌的nuc基因为靶基因,选择特异性引物,以参照菌种为对象,验证引物的特异性,建立多重荧光PCR检测方法,人工添加沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌,确定方法的检出限.结果表明该方法特异性强、灵敏度高,乳粉中检测的灵敏度为1CFU/mL,可在8h内完成对乳品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌的检测.
- 秦丽周巍张明杨帆贾昭斌张岩
- 关键词：多重PCR乳粉沙门氏菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌
- 酸乳中葡糖杆菌的LAMP检测方法研究被引量：2
- 2016年
- 为了给酸乳生产企业提供一种快捷、简便、灵敏的葡糖杆菌的LAMP检测方法,本研究选取葡糖杆菌属的模式菌株氧化葡糖杆菌为代表菌株。根据Gen Bank中公布的氧化葡糖杆菌的16S r RNA(X73820)基因的强特异性序列设计四条引物,优化引物、Mg2+、温度等反应条件,建立了环介导等温扩增技术检测酸乳中葡糖杆菌的方法。对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并与PCR方法的灵敏度进行比较。结果显示,该组引物的特异性强,对反应产物进行酶切分析,酶切产物的片段与理论值相符;该LAMP方法检测纯菌的灵敏度为7.5×101 CFU/m L,是PCR检测方法的10倍;用纯菌液对酸奶进行人工污染,提取模拟变质酸奶的DNA进行LAMP扩增,其最低检出限为7.5×102 CFU/m L。综上所述,本研究建立的LAMP检测方法特异性强、灵敏度高,耗时短,实现了对葡糖杆菌的快速检测,在食品检测行业具有很好的应用前景。
- 李月华张翠侠王爽章晶晶杨岚周巍张岩
- 关键词：葡糖杆菌属环介导等温扩增酸乳
- 光纤倏逝波生物传感器在食品安全检测中应用进展被引量：5
- 2014年
- 光纤倏逝波生物传感主要是利用倏逝波场来激发光纤表面标记在生物分子(抗体或核酸片段)上的荧光染料,从而检测通过特异性反应附着于纤芯表面倏逝波场范围内的生物分子的一项新兴免疫检测技术,具有灵敏度高、特异性强、使用便捷、检测速度快等特点,已被应用于食品安全快速检测过程中。本文对光纤倏逝波生物传感技术在食品安全检测领域的应用进行了综述,介绍了光纤倏逝波生物传感器的原理,通过分析光纤倏逝波生物传感器目前在食品检测项目的具体应用,主要包括:在食品微生物及其毒素检测中的应用,在食品理化检测中的应用,对其特点进行了讨论。我国在该领域的工作尚处于研发阶段,还有大量的工作需要开展,一旦获得成效势必给我国食品安全问题提供有力的保障,为我国食品工业发展提供重要支撑。
- 周巍张巍王赞刘涛张岩
- 关键词：生物传感器食品安全
- 高产酒精酵母SP-48的基本生理特性研究被引量：9
- 2004年
- 分别测定了SP -48菌株生长和发酵的最适温度、pH值 ,同时研究了温度、接种量、pH值对生长曲线和发酵曲线的影响。得出的结论为 :SP -48的最适生长温度为 3 6℃、最适生长pH为 4 5,最适发酵温度为3 0℃、最适发酵pH为 4 5;温度和接种量对生长和发酵影响较大 ,而pH影响较小。
- 张伟周巍程淑梅袁耀武李英军马雯
- 关键词：酒精生产酵母生理特性发酵条件
- 婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌解旋酶恒温基因扩增检测方法的建立被引量：7
- 2014年
- 目的:建立一种检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的解旋酶恒温基因扩增方法。方法:根据阪崎克罗诺杆菌ITS基因设计特异性引物,优化解旋酶恒温基因扩增法反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度,人工添加阪崎克罗诺杆菌确定检出限,多种致病菌在建立的解旋酶恒温基因扩增体系中扩增验证特异性,电泳检测扩增产物。结果:解旋酶恒温基因扩增法检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌得到与设计序列长度一致的100 bp基因片段,检出限为10 CFU/g,优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的终浓度分别为0.1、5.0μg。结论:解旋酶恒温基因扩增法用于检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的特异性强、灵敏度高、耗时短,为婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的快速检测提供了新的方法。
- 周巍张薇刘亮刘东李永波田浩张岩张志胜
- 关键词：婴儿配方乳粉
- FTA滤膜用于基因芯片检测肉中常见食源性致病菌的研究被引量：1
- 2008年
- 通过不对称PCR技术和基因芯片技术建立一种准确、快速和高敏感性的检测肉中常见食源性致病菌的方法。用FTA滤膜从食品样品中直接提取模板DNA,用玻片作基因芯片的固相载体。选择常见的可引起食物中毒的15株菌的16SrDNA基因的一个片段作为目的基因。设计这段基因的一对通用引物,下游引物用Cy5标记。设计25条种属的特异性探针,将它们氨基化修饰并点到玻片上,将不对称PCR的15种扩增产物与制作好的基因芯片杂交,用genepix4分析杂交结果。结果表明:10株食源性致病菌(金黄色葡萄球菌、肉毒梭状芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、宋内氏志贺氏菌、霍乱弧菌、普通变形杆菌、拟态弧菌、单核增生李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、腊样芽孢杆菌)的检测具有高敏感性和特异性;副溶血性弧菌的敏感性相对较低;河流弧菌同副溶血性弧菌存在很弱的错杂交;乙型溶血性链球菌的检测同单核增生李斯特菌和腊样芽孢杆菌存在很弱的错杂交,但是均不影响检测结果。大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌由于同源性非常高,可以通过多重PCR方法检测出来。整个样品的检测耗时6h。基因芯片与其它检测方法相比有很大的优势,它不仅准确、快速、高效,而且高通量,可广泛应用于食源性致病菌感染的诊断、应对和控制。
- 周巍张伟袁耀武李英军马晓燕
- 关键词：基因芯片食源性致病菌FTA滤膜
- 环介导等温扩增技术检测醋化醋杆菌
- 2016年
- 为实现醋酸菌的快速灵敏检测,以醋化醋杆菌为代表菌株,首次使用环介导等温扩增技术(LAMP)进行16S-23S ITS r RNA核酸扩增,通过特异性检测后对反应条件进行优化,并对扩增产物的检测方法进行比较。结果表明,该组引物特异性强,优化的25μL体系为:6 mmol/L Mg Cl2,1.4 mmol/L d NTPs,内引物(FIP和BIP)各0.8μmol/L,外引物(F3和B3)各0.2μmol/L,1×Bst DNA聚合酶反应缓冲液,8U Bst DNA聚合酶,0.8 mmol/L甜菜碱,2μL DNA模板,用灭菌蒸馏水补足体系。62℃反应30 min即可完成扩增反应,产物经琼脂糖凝胶电泳后检测灵敏度达3.63×101CFU/m L。用肉眼观察白色焦磷酸镁沉淀,仅观察到3.63×102 CFU/m L以上的阳性产物,而在终产物中加入10 000×0.1μL SYBR GreenⅠ后,可通过肉眼观察产物颜色变化,得到与琼脂糖凝胶电泳法相同的检出限,并且缩短了检测时间。
- 周巍付晓华章晶晶杨岚王红张岩张志胜
- 关键词：醋酸菌LAMP灵敏度
- 基于DNA条形码技术常见肉类掺假鉴别技术的研究被引量：19
- 2016年
- 根据市场上常见的肉类掺假情况,本研究通过提取生鲜牛肉、羊肉、猪肉和鸭肉基因组DNA,按一定比例进行预混合,构建牛肉掺猪肉、羊肉掺猪肉、牛肉掺鸭肉和羊肉掺鸭肉4种掺假模型。通过引物COI-1和COI-2进行PCR扩增和测序比对,建立基于COI基因的动物源性食品的掺假判别方法。根据实验所得纯肉DNA提取率T实现DNA水平到肉水平掺假比例的换算。在肉的掺假水平上,引物COI-2检测效果较好,对牛-猪、羊-猪、牛-鸭和羊-鸭模型掺假物的检出限分别为5%、8%、1%和4%。对采集的28个批次的肉制品进行检测,结果表明:28个样品中89%的样品与产品标签标识的成分相符。建立的基于DNA条形码技术的检测方法可作为一种简单、快速、有效的分子鉴定技术,可以直接应用于研究物源性食品的种类和掺假鉴定。
- 田晨曦周巍王爽王赞张翠侠李永艳张岩张志胜
- 关键词：DNA条形码掺假
