周毅
- 作品数：39 被引量：67H指数：6
- 供职机构：连云港出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学理学生物学轻工技术与工程更多>>
- 牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：6
- 2009年
- 从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。
- 周毅吴玉石段宏安张睿周祖涛毕丁仁石德时
- 关键词：牛白血病病毒原核表达间接ELISA
- 一种鲤疱疹病毒Ⅱ型夹心ELISA检测试剂盒及检测方法
- 本发明是一种鲤疱疹病毒Ⅱ型夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒的主要组成为：鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF90纯化单抗溶液；酶标ORF90多抗溶液；稀释液；TMB底物溶液；终止液；鲤疱疹病毒2型阳性对照；阴性对照；包被液；96孔酶标...
- 徐晔段宏安周毅丁超曹洁王凤芝程积进
- 文献传递
- 鱼立克次氏体病概述
- 鱼立克次氏体是由鱼立克次氏体(Piscirickettsia salmonis)引起的鲑科鱼病,1989年首次报道在智利饲养的银大马哈鱼中发现该病。该病主要危害银大马哈鱼、大鳞大马哈鱼、马苏大马哈鱼、虹鳟、细鳞大马哈鱼和...
- 徐晔段宏安周毅丁超刘建
- 关键词：病理检疫
- 三种鱼病病毒的单管RT－PCR检测的阳性对照的制备方法
- 本发明是一种病毒性出血性败血症病毒、鱼传染性造血器官坏死症病毒和传染性胰脏坏死症病毒的单管RT－PCR检测的阳性对照的制备方法，其特征在于，分别选取病毒性出血性败血症病毒的G基因、鱼传染性造血器官坏死症病毒的VP基因和传...
- 段宏安张睿姚燕林王海涛周毅李金华刘小琴
- 文献传递
- 金鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验
- 从患病金鱼的内脏组织中分离到一株革兰氏阴性短杆菌,将活金鱼样本与其他观赏鱼混合暂养时,24h内全部发病死亡,病死鱼内脏组织中均能分离到该菌。对分离株进行形态特征、生理生化特性以及16S rRNA序列分析,结果表明该分离株...
- 周毅张培培徐晔李金华曹洁孟学平段宏安
- 关键词：嗜水气单胞菌药敏试验
- 文献传递
- 四环素类药物在泥鳅体内残留消除规律的初步研究
- 在22-25℃水温中,四环素和强力霉素以10mg/L、土霉素和金霉素以100mg/L浓度分别连续药浴3天,每次2h,通过高效液相色谱-串联质谱法对停药后泥鳅组织(肉加皮)中四种药物的含量进行测定,分析四种四环素类药物在泥...
- 周毅姚燕林徐晔王海涛李金华曹洁段宏安
- 关键词：四环素类药物泥鳅
- 文献传递
- 鱼立克次氏体病研究进展被引量：1
- 2013年
- 鱼立克次氏体病是由鱼立克次氏体(Piscirickettsia salmonis)引起的鲑科鱼病,1989年首次报道在智利饲养的银大马哈鱼中发现该病。该病主要危害银大马哈鱼、大鳞大马哈鱼、马苏大马哈鱼、虹鳟、细鳞大马哈鱼和大西洋鲑等鱼类。阐述了鱼立克次氏体病的病原、流行病学、发病机理与病理学,概述了该病的检疫与诊断以及防控与预警方法,旨在为该病的检疫工作提供理论参考。
- 徐晔段宏安周毅丁超刘健
- 关键词：病理检疫
- 地方流行性牛白血病间接gp51-ELISA抗体检测试剂盒的研制被引量：1
- 2009年
- 利用重组牛白血病痛毒gp51蛋白作为包被抗原研制了gp51-ELISA诊断试剂盒。试剂盒主要成分包括抗原gp51包被96孔板、HRP标记的兔抗牛IgG和牛白血病阴性、阳性标准血清。对试剂盒进行了特异性、灵敏度、重复性及保存期试验。结果表明，试剂盒特异性好，灵敏度是AGIDT的4-8倍，批间和批内的变异系数分别小于10％和15％，于-20℃保存至少能保持6个月检测结果稳定。与法国Synbiotics公司同类试剂盒进行比对试验，诊断敏感性、特异性和符合率分别为75％、96.1％和94.6％。对采集于山东济南的164份奶牛血清和进口澳大利亚奶牛的398份血清进行检测，抗体阳性率分别6.10％和4.77％。
- 吴玉石周毅段宏安张睿徐晔毕丁仁石德时
- 关键词：间接ELISA诊断试剂盒
- 锦鲤疱疹病毒的PCR鉴定被引量：8
- 2008年
- 根据锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)的基因序列合成了2对引物,对送检的发病锦鲤样品提取DNA进行PCR检测,分别扩增出KHV的胸腺嘧啶脱氧核苷激酶基因(thymidine kinase,TK)409 bp和AF411803基因序列484 bp的条带,对484 bp的PCR扩增产物经限制性内切酶TaqⅠ和AluⅠ酶切,分别得到200 bp/284 bp和185 bp/299 bp的片段,484 bp的PCR扩增产物的测序结果与GenBank上已发表的KHV序列一致。结果显示发病锦鲤为KHV阳性。
- 段宏安张睿徐晔周毅姚燕林王海涛李金华刘小琴吴玉石
- 关键词：PCR锦鲤疱疹病毒
- 太湖藻类分布及其对鱼类的毒性试验被引量：4
- 2013年
- 对太湖9个水域藻类进行监测,结果表明,藻类平均密度在52万～2 660万个/L之间,梅梁湖最高,东部沿岸区最低;1月藻类在太湖地区分布最少,8月最多;蓝藻分布了39.7%,绿藻25.3%,隐藻16.9%,硅藻15.5%,祼藻及其他门类2.6%。微囊藻藻体冻融上清液用生理盐水稀释到1∶10时仍可使草鱼红细胞出现凝集现象,对照不凝聚。在腹腔注射藻细胞冻融液4 h后,草鱼出现死亡现象,其半数致死剂量为380 mg/kg,二次注射6 h后的半数致死剂量为180 mg/kg;腹腔注射的草鱼中毒症状为:游动迟缓、鳞片松散脱落,然后逐渐死亡。解剖后发现肝脏充血肿大,绿色胆汁外流,肝切片后发现细胞浸润,肝细胞分隔成网状,并变性坏死;肾脏淤血凝固,细胞变形。全藻体细胞对乌鳢灌胃毒性试验结果显示,乌鳢起初未见明显的体表症状,但肝脏略有肿大、充血并伴有出血点,以300 mg/kg剂量灌胃,48 h时乌鳢的死亡率为20%。
- 周毅石建华钱伟沈振华姚燕林孟祥龙徐晔范广宇王海涛张敬友王维志段宏安
- 关键词：太湖藻类毒素血凝试验腹腔注射毒理试验
