孔伟
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌抑制基因-1与转运功能相关的451bp序列区的确定被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:肝癌抑制基因-1(HCCS1)是一种潜在的肝癌抑制基因,并且在细胞内蛋白分拣运输中也发挥着重要作用,其抑癌作用有可能是通过其蛋白转运的功能而发挥的,本文以寻找HCCS1序列中与转运相关的最小功能序列区域为目的。方法:通过亚克隆技术,构建以pEGFP-C2为载体的含不同长度HCCS1cDNA片段的亚克隆,将构建的亚克隆转染子宫颈癌HeLa细胞,通过免疫荧光共聚焦显微镜观察不同长度HCCS1蛋白的分布,以及与6-磷酸甘露糖受体(M6PR)的共定位。结果:成功构建了以pEGFP-C2为载体的10个含有不同长度HCCS1片段的亚克隆;HCCS1cDNA从3'端向5'端逐渐缺失的片段中:2100bp片段至778bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈颗粒状分布于核周的胞质内,其中2100bp片段至1571bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内,且与M6PR有共定位;而1120bp片段至778bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周,但极性分布消失,且与M6PR共定位消失;HCCS1cDNA片段678bp片段至339bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈散点状弥散分布于胞质以及胞核内。结论:确定了HCCS1cDNA1571bp片段的3'端451bp的序列为与HCCS1转运功能相关的最小区域范围。
- 孔伟甘愉胡晶莹朱明洁赵仰星赵新泰
- 关键词：转运
