孙书锋
- 作品数：12 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪Myostatin同源重组载体的构建被引量：1
- 2006年
- 根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了猪Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1.4 kb、4.4 kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%;对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建了猪的Myostatin表达Neor、Tk基因的双标记转基因载体。
- 潘求真陆泉枝孙书锋王海连正兴杨宁谭景和吴常信
- 关键词：TK基因聚合酶链式反应
- 基于单核细胞生物学特性的高抗病力检测试剂盒研制
- 李宁连正兴刘琳李海宁中华邓学梅孙书锋刘云波李俊英潘求真蒋桂芳张庆才张宇张宝路陈学辉杨泽霖
- 简要技术说明：（1）开发了外周血单核细胞快速分离的新型淋巴细胞分离液，且具如下优点：减少了样品和分离液混合的弊端，保证了样品的有效性；缩短加样时间，并可进行多个样品的同时分离；技术更新后采血量明显下降。（2）实现了单核／...
- 关键词：
- 关键词：单核细胞检测试剂盒
- 规模化奶牛场牛群结构的算法被引量：7
- 2008年
- 惠雪孙书锋吴中红王美芝刘继军
- 关键词：牛群结构奶牛场规模化生长发育阶段饲养环境生产管理
- 鸡单核细胞吞噬能力与抗病性关系的研究
- ＜正＞动物传染性疾病多难于控制和消灭,严重威胁着畜禽及人类的健康,并造成巨大经济损失。外周血单核细胞是机体免疫系统的重要组成部分,在免疫应答过程中发挥重要作用,吞噬行为是影响其免疫学功能发挥的重要因素。对不同抗病力鸡群外...
- 李海张宇孙书锋连正兴李宁
- 关键词：单核细胞抗病
- 一种监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法
- 本发明公开了一种监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法。本发明所提供的监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法，是检测动物的下述单核细胞活性中的一种或几种：吞噬性，细胞毒性，黏附性和溶酶体活性；所述几种指两种或三种或四种。本发...
- 连正兴孙书锋李宁
- 文献传递
- 鸡类囊胚获得及其生物学特性研究被引量：5
- 2005年
- 鸡胚是研究胚胎发育、组织分化、基因表达与调控良好的实验模型, 是动物功能基因组学研究的重要材料. 实验选取白来航蛋鸡所产新鲜种蛋, 采用纸环法收集胚盘, 机械打碎后进行悬浮培养, 获得了哺乳动物囊胚样结构, 命名为类囊胚. 体外培养12～24 h是类囊胚发育的高峰期, 其直径显著增加近1倍. FBS可促进类囊胚的发育, 而卵黄在12 h前对类囊胚发育没有明显影响, 但到24 h时可促进类囊胚的贴壁生长. 经碱性磷酸酶(AKP)染色初步显示类囊胚中含有大量碱性磷酸酶活性的胚胎干细胞, 胚胎干细胞特异性表面标志SSEA-1免疫荧光染色后呈阳性, 进一步肯定了类囊胚中ES细胞的存在, 最终从贴壁类囊胚中分化出神经样和成纤维样等多种类型细胞. 由此可以得出: 悬浮培养鸡胚盘细胞可以形成含有胚胎干细胞的、类似哺乳动物囊胚样的结构, 并能保持其内胚胎干细胞的特性和分化潜能.
- 李佳潘求真李俊英韩红兵孙书锋杨君徐曙光田亮连正兴杨宁李宁
- 关键词：基因表达与调控鸡类细胞特异性组织分化ES细胞分化潜能
- 山羊Myostatin基因打靶载体的构建被引量：3
- 2006年
- 根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列,设计引物,通过PCR方法扩增了山羊的Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1·4kb、4·5kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已知发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%。对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建表达Neo、Tk基因的哺乳动物双标记转基因载体,并命名为ploxp-M。
- 潘求真孙书锋陆泉枝王海连正兴杨宁李宁谭景和
- 关键词：TK基因聚合酶链式反应
- 单核细胞的生物学特性及其应用被引量：3
- 2007年
- 物种在长期进化过程中已经形成了比较完善的、抵御环境中病原微生物侵袭与感染的免疫系统,并随着物种的进化而进化。具有多能干细胞特性的外周血单核细胞,在非特异性免疫和特异性免疫过程中发挥着非常重要的作用,既能消灭侵入的病原微生物,又能够对病原微生物进行加工处理,将抗原呈递给其他免疫细胞,架起了先天免疫与获得性免疫的桥梁。单核细胞已经在药物靶向传送、消灭肿瘤、疾病监控、细胞治疗、抗病育种、新型疫苗研制、环境检测等领域发挥了重要作用,并获得了良好的实验效果。
- 连正兴孙书锋李海宁中华李宁
- 关键词：单核细胞细胞治疗免疫育种
- 绿色荧光蛋白基因转染猪骨髓基质干细胞
- 目的采用电穿孔法将带有GFP的质粒(pGFP-NEO)转染MSCs,经过G418筛选阳性克隆,用荧光显微镜检测GFP的表达情况。结果以电压150V,20ms一次脉冲进行转染。转染 GFP质粒的MSCs能在含有6418的培...
- 潘求真孙书锋韩红兵张宝路李海田亮李佳徐曙光连正兴杨宁
- 关键词：绿色荧光蛋白基因转染骨髓基质干细胞
- 文献传递
- 单核/巨噬细胞吞噬特性育种价值挖掘及其产业化应用
- 连正兴韩红兵宁中华李宁张德祥孙书锋麻慧李海牟进菲杨泽霖
- 次将单核/巨噬细胞吞噬能力作为选择指数用于鸡抗病育种选育，通过对大量鸡群单核/巨噬细胞吞噬能力的检测，选择高吞噬指数个体后，表现出了良好的抗病能力，如攻毒后死亡率较低、抗体水平较高、排菌量下降、预防接种后抗体水平较高等以...
- 关键词：
- 关键词：抗病育种
