张世伟
- 作品数:64 被引量:148H指数:7
- 供职机构:深圳市计量质量检测研究院更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目深圳市科技计划项目广东省质量技术监督局科技项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程医药卫生理学农业科学更多>>
- 燕窝唾液酸糖蛋白间接竞争酶联免疫检测方法的建立
- 2022年
- 目的建立间接竞争酶联免疫(indirect competitive enzyme linked immunesorbent assay,IC-ELISA)检测燕窝中唾液酸糖蛋白的分析方法。方法以唾液酸糖蛋白为抗原,制备单克隆抗体,对IC-ELISA步骤中相关参数进行优化,确定最佳反应条件。结果最佳包被抗原为1:2000,抗体稀释倍数为1:5000;封闭液浓度为1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),封闭时间为150 min;竞争时间30 min;酶标二抗浓度稀释倍数为1:1000,孵育时间30 min;显色时间为10 min。建立的IC-ELISA检测方法半抑制浓度(50%inhibition concentration,IC_(50))为8.61μg/mL,线性范围为2.23~33.25μg/mL,回收率为82.7%~92.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)为1.7%~8.9%。结论该方法灵敏度较高、特异性强,可以有效地鉴别假冒伪劣燕窝产品,具有较好的实际应用价值。
- 何金麟王仍瑞张世伟冯荣虎范群艳柳训才徐敦明
- 食用植物油和地沟油中动物源性成分LAMP检测方法的建立被引量:6
- 2015年
- 建立了食用植物油和地沟油中动物源性成分的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对猪、牛、鸡、鸭的线粒体Cytb基因分别设计2条外引物(F3、B3)、2条内引物(FIP、BIP)和2条环引物(FLP、BLP),着重对内引物FIP/BIP、甜菜碱和Mg2+浓度等反应参数进行了优化,扩增产物采用恒温实时荧光法检测。对方法的特异性和灵敏度进行了评价。实验结果表明,在0.2μmol/L外引物(F3和B3)、1.6μmol/L内引物(FIP和BIP)、0.8μmol/L环引物(FLP和BLP)、1 mol/L甜菜碱、6 mmol/L Mg SO4、1.6 mmol/L d NTP、反应温度63℃等参数的优化条件下,上述四种物源性成分的扩增效果最佳,该方法可以检测出动物油脂质量比例为1%及地沟油质量比例为5%的混合油脂中的动物源性成分。本方法对猪、牛、鸡、鸭源性成份的检测具有很高的特异性和灵敏度,可以用于油脂中动物源性成分的检测,为油脂的鉴伪和地沟油的鉴别提供技术支持。
- 谭贵良刘垚李向丽赖心田张世伟
- 关键词:食用植物油地沟油环介导等温扩增动物源性成分CYTB基因
- 燕窝蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析被引量:7
- 2011年
- 燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质经液相等电聚焦电泳纯化后,再经双向电泳分离获得了质量较佳的2-DE图谱,由此可见液相等电聚焦电泳是对燕窝蛋白质进行纯化的有效手段。对纯化后的2个白燕窝和1个血燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质进行了双向电泳分析,结果显示两种方法制备蛋白质获得的2-DE图谱非常相似。燕窝水提蛋白质经丙酮沉淀制备样品时间较透析、冻干所需的时间短,这对于成分复杂蛋白质提取率较低的血燕窝则更为适用。
- 黄秀丽赖心田张世伟林霖詹家芬林俊芳杨国武
- 关键词:双向电泳
- 基于异源包被的地索奈德间接竞争酶联免疫检测方法被引量:2
- 2022年
- 为监控保健食品和化妆品中地索奈德的滥用情况,本研究建立了地索奈德间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。将地索奈德(Desonide,DES)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,获得地索奈德完整抗原DES-KLH;通过免疫小鼠和细胞融合获得抗地索奈德单克隆抗体。将地索奈德半抗原通过活泼酯法分别与牛血清白蛋白(bovine serumalbumin,BSA)偶联作为包被原,建立地索奈德同源及异源的间接竞争酶联免疫分析方法。在同源包被情况下,地索奈德灵敏度为7.9ng/m L,而DEX异源包下灵敏度为0.72ng/m L。对增强骨密度类保健食品、面霜、精华、眼霜、爽肤水的添加回收率在82%—105%之间。该方法能有效应用于食品和化妆品中地索奈德的快速筛查。
- 谭攀张世伟
- 关键词:糖皮质激素
- 双抗夹心酶联免疫分析法检测食品中鸡蛋过敏原被引量:7
- 2012年
- [目的]建立食品中鸡蛋过敏原的酶联免疫检测方法。[方法]以卵白蛋白为检测对象,分别制备抗卵白蛋白的多克隆和单克隆抗体。将单克隆抗体作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆抗体为二抗构建卵白蛋白的双抗夹心ELISA方法。[结果]该方法的IC50为260 ng/ml,检出限为10 ng/ml,样品的添加回收率为84.2%~89.8%,相对标准偏差小于10%。[结论]该试验建立的分析方法稳定可靠,能满足食品中鸡蛋过敏原准确、快速的检测需要。
- 张世伟赖心田洪晓明王珍妮李锐杨国武
- 关键词:鸡蛋卵白蛋白单克隆抗体ELISA
- 一种冬虫夏草酶联免疫检测试剂盒及其制备方法
- 本发明提供了一种冬虫夏草酶联免疫检测试剂盒的制备方法,包括以下步骤:S1、冬虫夏草70kDa糖蛋白提取分离;S2、单克隆抗体的制备;S3、酶联免疫检测方法的建立及评估;S4、试剂盒的组装。本发明还提供了一种冬虫夏草酶联免...
- 赖晓芳张世伟赖心田伍聪杨国武李碧芳冯荣虎王士峰马广东王珍妮
- 文献传递
- 阳离子交换高效液相色谱法快速测定蔬菜中灭蝇胺的残留量
- 2024年
- 取10 g蔬菜样品,加入20 mL体积比1∶99的乙酸-乙腈混合溶液,振荡提取20 min,加入6 g无水硫酸镁,振荡5 min,离心2 min,分取4 mL上清液,过活化好的氨基固相萃取柱,收集全部流出液。用2 mL体积比3∶1的乙腈-甲苯混合溶液洗脱柱子,收集洗脱液并合并至上述流出液中。所得溶液于40℃氮吹至近干,用1.0 mL体积比65∶35的含0.2%(体积分数)乙酸的20 mmol·L^(-1)乙酸钠溶液和乙腈的混合溶液(流动相)复溶,涡旋1 min,过0.22μm滤膜,滤液供高效液相色谱仪分析。在ZORBAX 300-SCX强阳离子交换色谱柱上以流动相等度洗脱分离滤液中的目标物,外标法定量。结果显示,灭蝇胺的质量浓度在0.02~2.00 mg·L^(-1)内和峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.006 mg·kg^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为83.6%~90.5%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.5%~9.0%。方法用于43批蔬菜样品的分析,灭蝇胺的检出率为28%,有3批豇豆中灭蝇胺的残留量超过GB 2763—2021规定的限量。
- 张凯旋刘奕雄朱雨田彭汝林冯玉桢杜业刚张世伟
- 关键词:灭蝇胺蔬菜残留量
- 液相色谱质谱法测定豆腐中74种抗生素残留
- 2021年
- 建立一种同时检测豆腐中74种抗生素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)高通量方法。豆腐样品采用Na2EDTA-Mcllvain缓冲液提取后,经亲水亲脂平衡固相萃取柱(PEP)净化,氮吹浓缩复溶后,以0.1%甲酸水和乙腈为流动相,C18柱分离,多反应离子监测(MRM)进行检测,基质工作曲线外标法定量。74种抗生素在0~100μg/kg范围内呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999,回收率介于73.5%至115.0%之间,相对标准偏差小于15%。该方法快速简便,准确性好,高通量的方法能对豆腐中抗生素的情况进行更全面的监测分析。
- 杜业刚吴益淳张斌刘奕雄刘文丽张世伟朱雨田郑燕燕
- 关键词:豆腐
- 基于异源包被的曲安奈德竞争酶联免疫检测方法被引量:4
- 2020年
- 为监控曲安奈德的滥用情况,本研究建立了曲安奈德竞争酶联免疫检测方法。将曲安奈德(Triamcinolone acetonide,TCA)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得曲安奈德完整抗原TCA-KLH;通过免疫小鼠、细胞融合及筛选获得一株能够稳定分泌抗曲安奈德的单克隆抗体细胞株,制备并纯化了腹水抗体。将TCA和地塞米松(Dexamethasone,DEX)半抗原通过活泼酯法分别与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联作为包被原,建立曲安奈德同源及异源的间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。在同源包被情况下,曲安奈德灵敏度为5.4 ng/mL,而DEX异源包下灵敏度为0.53 ng/mL。未观察该方法到对哈西奈德、布地奈德、安西奈德以外的其他糖皮质激素的交叉反应。在添加回收实验中,使用20%甲醇水溶液提取动物组织的添加回收率在75%~95%之间。该方法能有效应用于动物组织中曲安奈德的快速筛查。
- 王英姿闫剑勇张世伟
- 关键词:糖皮质激素曲安奈德
- 杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡
- 本发明公开了杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡,杏仁蛋白氨基酸序列是:RQQRQQPFGRPG。该序列具有很好的免疫原性,可以诱导出效价很好的杏仁蛋白特异性抗体。利用本发明制备的杏仁蛋白特异性抗体和已知的扁桃...
- 张世伟赖心田李碧芳黄静敏王士峰冯荣虎唐栋马广东陈极锋杨国武
- 文献传递