张咏
- 作品数：12 被引量：37H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肝细胞生成素受体的确定及特性被引量：6
- 2001年
- 目的 研究人重组肝细胞生成素 (rhHPO)特异性刺激肝细胞增殖的信号转导是否通过特异性受体结合介导。方法 通过受体结合和特异性竞争抑制实验及Scatchard分析原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞的特性。结果 原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞存在HPO受体 ,受体数量分别为 10 0 0 0个 /细胞、2 0 0 0 0个 /细胞和 5 5 0 0 0个 /细胞 ,平衡解离常数(Kd)分别为 2、1.4及 0 .7pmol,HPO与受体结合的复合物分子量约为 90× 10 3 ,推算出HPO与该受体结合具有饱合性和特异性 ,此结合不能被EGF、TGF α和胰岛素所竞争抑制。通过交联反应在SDS PAGE电泳上显示此受体分子量约 75× 10 3 。结论 HPO促肝细胞增殖作用是通过肝细胞表面这种特异性膜受体介导的。
- 王阁房殿春刘为纹冷恩仁胡辂王军杨晓明张咏贺福初
- 关键词：肝细胞生成素受体放射配基结合分析法肝再生
- 一个蛋白质家族的抗菌用途
- 本发明公开了一个蛋白质家族的抗菌用途。本发明利用抑制性差减杂交的方法，获得了一个新的天然Glyrichin蛋白质家族，该家族的蛋白质具有抗菌的活性，可用于制备细菌性感染疾病的治疗药物，或用于筛选促进或拮抗该家族蛋白质的抗...
- 赵士富赵彦林张咏唐芊芊
- 文献传递
- 具重复Kringle结构分子系列缺失体和嵌合体的构建方法及验证
- 1999年
- 确定肝细胞生长因子 (HGF)、巨噬细胞刺激蛋白 (MSP)各 4个Kringle结构的共有序列并以此为基础设计公用引物 ,利用此公用引物可扩增出含不同数目Kringle的系列片段 ;以不同的组合方式连接 ,得到了系列缺失体和嵌合体 ;测序结果表明公用引物的简并性及所扩增序列与理论预期一致 .对以此法所构建的HGF/MSPK1缺失体表达后进行活性测定 ,提出MSP的K1是重要的功能决定区 .此外 ,提出了对内部存在引物酶切位点的cDNA片段的克隆策略 .
- 宫锋董春娜张咏章扬培吴祖泽贺福初
- 关键词：KRINGLE肝细胞生长因子MSP嵌合体
- 长期培养后小鼠造血基质细胞差异表达基因的筛选被引量：10
- 2002年
- 为了进一步研究长期培养体系 (long termculture ,LTC)中造血基质细胞调控造血的分子基础及其作用机制 ,并发现新型造血调控因子 ,以LTC体系培养后小鼠骨髓造血基质细胞 (LTC St)为被扣除杂交组 ,以未经培养的小鼠骨髓细胞 (BMC)为扣除杂交组 ,采用抑制性扣除杂交法 (SSH)进行杂交 ,将杂交产物克隆并测序 ,进行生物信息学分析。结果 :获得了 131个差异表达EST克隆 ,这些克隆代表了 2 6种已知或部分已知的不同基因和 7条无任何线索的全新基因 ,5条具有完整开放阅读框架 ,无功能线索的新基因中 3条有信号肽。结论 :通过本实验得到了LTC体系中特异性表达的一个消减文库 ,获得了几条可能与造血调控相关的新型基因或EST 。
- 张咏崔春萍鱼咏涛李玉珍魏汉东任爱辉赵士富
- 关键词：差异基因表达造血功能
- 肝细胞生成素快速诱导肝再生相关基因mRNA的表达
- 2002年
- 目的:观察人重组肝细胞生成素(rhHPO)迅速诱导瞬时早期反应基因表达情况.方法:利用PT-PCR方法观察HPO刺激原代培养大鼠肝细胞24h内选择性肝再生相关基因mRNA表达情况.结果:HPO在原代培养大鼠肝细胞体系中可迅速诱导瞬时早期反应基因c-fos,LRF-1d的表达,对PC3和Tec基因也有诱导表达的作用,高峰出现在刺激后的0.5-2h,表达量增加3-5倍.结论:HPO可迅速诱导瞬时早期反应基因表达,可能是HPO促肝细胞增生的分子作用机制,首次报道PC3和Tec基因是一种与肝再生调控密切相关的早期反应基因.
- 王阁冷恩仁胡辂王军房殿春杨晓明张咏贺福初
- 关键词：肝再生肝细胞生成素C-MYC基因
- 小鼠胎肝和骨髓细胞基因表达差异的比较研究被引量：3
- 2003年
- 造血发育经历了从卵黄囊到胎肝、胎脾并最终定位于骨髓的复杂过程。虽然已有部分研究发现决定这一迁移过程的重要因素是造血微环境 ,但缺乏对不同造血器官微环境差别的系统性比较研究。为了探讨胎肝与成年骨髓造血微环境差别的分子基础 ,对小鼠胎肝和骨髓细胞RNA进行cDNA微阵列 (cDNAmicroarray)杂交 ,以生物信息学方法分析杂交结果 ,并以RT PCR和Northernblot对杂交结果进行进一步验证。结果表明 ,在 588种具有重要功能的已知基因中 ,二者相比 ,骨髓高表达的基因有 65种 ,胎肝高表达的基因有 13 1种。进一步分析发现骨髓高表达的基因中与造血相关的基因有 3 9种 ,胎肝高表达的基因中与造血相关的有 71种 ,分别占差异基因群的60 %和 54%。RT PCR和Northernblot验证的结果表明 ,CD18、CD44及PSGL 1基因在骨髓中高表达而在胎肝中低表达或不表达 ,此结果与微阵列杂交结果相符。同时还发现 ,CD18和CD44基因在胎肝中的表达水平随胎龄增加呈下调趋势。结论 :胎肝与骨髓细胞的基因表达谱显著不同 ,其中某些基因的表达随发育阶段不同而变化。这些基因的差异性表达 ,尤其是与造血细胞发育、迁移、植入等密切相关基因的差别性表达 ,可能是胎肝造血兴衰。
- 任爱辉张咏赵彦林赵蕾刘新宇赵士富
- 关键词：造血干细胞造血微环境胎肝细胞骨髓细胞
- 小鼠胚胎成纤维细胞差异表达基因的筛选
- 2002年
- 应用微阵列杂交法对培养前、后的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)mRNA进行检测 ,找到 2 4类差异表达的基因 ,为进一步筛选MEF可能表达的新基因 ,对培养前 (driver)、后 (tester)的MEFmRNA进行抑制性消减杂交 ,产物与pGEM T载体连接构建cDNA消减文库并转染JM10 9大肠杆菌。随机挑取阳性克隆 ,PCR扩增后对所得的差异表达基因进行测序及生物信息学分析。在随机挑取的 14 5个克隆中 ,测得了 12 8条EST序列 ,经生物信息学分析 ,它们代表了 4 2类不同基因和 3条新基因序列。结果表明 ,培养后MEF相对于培养前胚胎成纤维细胞确实存在差异表达基因群。提示 ,进一步的实验研究可能找出对ES细胞增殖分化有重要调控作用的基因或基因群。
- 杨滔张咏崔春萍鱼咏涛尉承泽任爱辉赵士富
- 关键词：胚胎学胚胎干细胞纤维母细胞核酸杂交
- 肝细胞生成素及肝部分切除诱导肝再生基因PC3的表达被引量：9
- 2002年
- 目的 观察重组人肝细胞生成素（rhHPO）和肝部分切除迅速诱导瞬时早期反应基因表达情况。方法 利用表达性差异显示分析技术和序列分析研究2/3肝部分切除后1h及原代培养大鼠肝细胞体系的选择性基因表达。结果 揭示EST库中的大部分为瞬时早期反应基因,发现一种可能与肝再生调控相关的新基因PC3,North-ern杂交证实2/3肝部分切除可迅速诱导PC3基因的表达,其表达高峰为术后1～2h。HPO在原代培养大鼠肝细胞体系中可迅速诱导瞬时早期反应基因（c-fos、LRF-1和PC3等）表达。结论HPO和肝部分切除可迅速诱导瞬时早期反应基因表达,PC3基因是一种与肝再生调控密切相关的早期反应基因。
- 王阁张晓荣胡辂王军冷恩仁房殿春杨晓明张咏贺福初
- 关键词：肝细胞生成素肝部分切除肝再生基因表达
- 具重复Kringle结构分子的缺失体和嵌合体的构建方法
- 1998年
- 确定肝细胞生长因子(HGF)和巨噬细胞刺激蛋白(MSP)各4个Kringle结构的共有序列并设计公用引物,此公用引物配合HGF和MSP上、下游引物,利用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,可在一次PCR反应中扩增出多条片段,以不同的组合方式将这些片段两两连接,得到了缺失不同Kringle的缺失体和两种分子间不同区域的缺失型嵌合体,从而为HGF和MSP结构与功能的研究奠定了基础。此方法可普遍适用于含有两个或两个以上Kringle分子的缺失体与嵌合体的构建。克隆过程中对存在引物酶切位点的cDNA片段的克隆方法的建立,为同类问题的解决提供了可靠的方法。
- 宫锋董春娜张咏吴祖泽贺福初
- 关键词：巨噬细胞刺激蛋白肝细胞生长因子KRINGLE嵌合体
- 肝细胞生成素及肝部分切除快速诱导肝再生相关基因Tec的表达被引量：3
- 2002年
- 目的 肝部分切除术后肝细胞生成素 (HPO)迅速增加 ,该文观察人重组肝细胞生成素(rhHPO)和肝部分切除 (PH)迅速诱导瞬时早期反应基因表达情况。方法 将Wister大鼠分为PH组和对照组 ,每组 3只。利用表达性差异显示分析技术和序列分析 ,检测 2 /3PH后 1h及原代培养大鼠肝细胞体系的选择性基因表达。结果 EST库中的大部分为瞬时早期反应基因 ,发现一种新的可能与肝再生调控相关的Tec基因 ,Northern杂交证实 2 /3PH可迅速诱导Tec基因的表达 ,其表达高峰为术后 1～ 2h。HPO在原代培养大鼠肝细胞体系中可迅速诱导瞬时早期反应基因 (c fos、LRF 1和Tec等 )表达。结论 HPO和PH可迅速诱导瞬时早期反应基因表达 ,首次报道Tec基因是一种与肝再生调控密切相关的早期反应基因。
- 王阁冷恩仁胡辂王军房殿春张咏贺福初杨晓明
- 关键词：肝细胞生成素肝部分切除肝再生基因表达
