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酰胺类除草剂甲草胺的微生物降解研究进展被引量：3: 2009年; 主要介绍了氯乙酰胺类除草剂甲草胺微生物降解的研究现状。甲草胺是一种世界上广泛使用的芽前除草剂,也是普遍存在的危险且难矿化的有机污染物。在被污染的土壤中,有氧条件下的生物降解是其归宿的主要过程。部分土壤微生物能以甲草胺为唯一碳源和能量的方式进行代谢,但共代谢是去除土壤中母体化合物的主要途径。介绍了降解的甲草胺微生物及其主要代谢产物,但因为缺少实验室条件下足够的矿化信息,还不能提出完整的代谢路径。建议继续加强高效降解微生物(群落)的筛选,澄清甲草胺的代谢途径,应用宏基因组学的新技术发掘新的降解基因,并在此基础上探讨了工程微生物(群落)在原位生物修复过程中的作用。; 张建坤赵晓亚赵晖王振华; 关键词：甲草胺生物降解宏基因组微生物群落

草莓枯萎病菌的分离与鉴定被引量：4: 2014年; 从湖北省武汉市郊区草莓种植户的大棚内采集萎蔫的植株,分离致病菌,采用PCR扩增、病原菌形态鉴定、致病性、分子检测等方法检测草莓枯萎病菌。结果表明,形态观察为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),接种草莓后出现典型的草莓枯萎病菌症状;采用真菌的通用引物对ITS1和ITS4进行PCR检测,分离得到的致病菌株均能扩增出分子量为567 bp的特异性条带。结合形态、致病性测定和分子检测,确定分离和鉴定的病原菌为草莓枯萎病菌(Fusarium oxysporum Schlecht.f.sp.fragariae Winks et Williams)。; 王振华张建坤龚国祥邱国强陈建军冯汉利; 关键词：OXYSPORUM ET PCR检测

番茄顶缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测荧光探针、试剂盒及应用: 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种番茄顶缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3...; 王振华张建坤张华郑剑徐文兴徐雪孙俊华益

油菜茎基溃疡病菌与黑胫病菌菌丝的生长动态被引量：1: 2016年; 比较了油菜茎基溃疡病菌（Leptosphaeria maculans）和油菜黑胫病菌（L.biglobosa）在不同培养温度和2种培养基上的菌丝生长动态。结果表明,在PDA和V8培养基平板上都生长良好,油菜茎基溃疡病菌培养温度在28℃时,油菜黑胫病菌培养温度在25℃或28℃时,在PDA平板上菌丝生长最好;油菜黑胫病菌与油菜茎基溃疡病菌菌落生长速度相比,在最适培养温度（25℃或28℃）和相同的培养时间（21 d）内,二者在PDA平板上的菌落生长速度分别为5~7 mm/d和2.0 mm/d,前者的菌落直径约90 mm,是后者的2倍。因此,在温度为25℃或28℃的条件下,PDA培养基最适合这2种病菌的生长。; 叶芸张建坤王琴徐雪王振华; 关键词：菌丝生长

番茄雄性株类病毒对‘TOMR0902’番茄的生物学影响研究: 2023年; 0引言番茄雄性株类病毒(tomato planta macho viroid,TPMVd)属于马铃薯纺锤块茎类病毒科(Pospiviroidae)马铃薯块茎类病毒(Pospiviroid),大小约为360 nt[1-2]。最初,有研究者在结实率严重下降的番茄(Solanum lycopersicum L.)[3-4]植株中分离获得了一种具有侵染性的环状核苷酸,摩擦接种健康番茄可引起接种植株的结实率严重降低,经序列测定后命名为TPMVd。后来,有研究者也在野生马铃薯(Solanum cardiophyllum L.)中发现一种类似核酸分子,其核苷酸序列与TPMVd相似,命名为墨西哥薯类病毒(Mexican papita viroid,MPVd)[5]。; 李倩张建坤王琴郑剑王振华徐文兴; 关键词：马铃薯纺锤块茎类病毒马铃薯块茎侵染性生物学影响

草莓花枯病原真菌的PCR检测被引量：1: 2014年; 为了建立简易、快速的草莓花枯病原真菌(Rhizoctonia fragariae)的PCR检测技术,以从美国ATCC购买的标准菌株14691TM为试验材料,通过真菌的通用引物对ITS4和ITS5的PCR扩增,从受感染草莓的根、叶、花、果实4个部位分离的菌株扩增到长度为670 bp的特异性条带,DNA测序证实了这一扩增产物与NCBI的GenBank内草莓花枯病原真菌的相关序列有高度序列同源性。结合草莓根、叶、花、果实的接种及分离、病原菌形态观察及致病性鉴定等结果,确定通用引物PCR扩增技术可以作为草莓花枯病菌检测的基本方法。; 王振华张建坤徐家文龚国祥曾宪东郑剑邱国强; 关键词：植物检疫

马铃薯纺锤块茎类病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测荧光探针试剂盒及应用: 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种马铃薯纺锤块茎类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTT...; 王振华张建坤张华郑剑徐文兴李乔徐雪华益熊永红

云南景迈古茶园茶叶内生真菌多样性初步研究: 2021年; 采集云南景迈和芒景古茶园的茶叶样品,经75%乙醇和0.5%次氯酸钠表面消毒后接种在PDA平板上,以分离自然干燥茶叶的内生真菌。共获得103个真菌纯培养物,根据形态学特征挑选30个分离物进行rRNA基因ITS区域和TEF基因的PCR扩增和测序。结果表明,30个分离物属于2门3纲7目10科13属,其中鬼伞菌(Coprinellus spp.)分离物最多,占20.0%,多节孢菌(Nodulisporium spp.)、炭团菌(Hypoxylon spp.)和轮层炭菌(Daldinia spp.)依次排在其后,分别占16.7%、13.3%和10.0%。与已报道的文献相比,本研究为茶叶内生真菌增加了1目4科8属的分类单位,多个分离物(如6、10、18、21、24、26)极可能是真菌新种。云南景迈茶园不同于一般的人工栽培茶园,其内生真菌种类可能极其丰富、独特,值得进一步调查。; 张建坤周剑彭超王琴汪飞王振华; 关键词：茶树内生真菌 ITS 多样性

番茄褪绿矮缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测荧光探针、试剂盒及应用: 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种番茄褪绿矮缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC...; 王振华张建坤张华徐文兴孙俊李乔王琴

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张建坤