张留辉
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 利用固定化金属亲和层析和质谱技术鉴定化脓性链球菌铜结合蛋白被引量：2
- 2010年
- 化脓性链球菌是一种常见的高致病性革兰氏阳性菌,每年都在全球范围内引发大量的感染现象与病死案例。金属蛋白在微生物的代谢以及毒性构成中的作用已经逐渐得到重视。通过固定化金属离子亲合层析技术对化脓性链球菌中铜结合蛋白进行分离,配合质谱技术的使用,共鉴定出21个铜结合蛋白,这些蛋白分别在翻译、代谢、离子通道等各个生理进程中发挥相应作用。
- 贺翔银兴峰张留辉阳小燕孙雪松
- 关键词：化脓性链球菌IMAC金属蛋白
- 金属蛋白质组学研究锌离子匮乏对肺炎链球菌的影响
- 2017年
- 【目的】研究锌离子缺乏对肺炎链球菌的影响,找到其适应性生长机制。【方法】以肺炎链球菌为模型,利用加锌和不加锌的培养基对细菌进行培养,收集细胞蛋白,采用双向凝胶电泳,结合金属亲和层析和质谱技术鉴定差异表达蛋白,进而通过生物信息学分析蛋白质相互关系,从中找到细菌适应锌离子匮乏条件的关键代谢通路和蛋白。【结果】测定了在限制培养条件下肺炎链球菌的最适生长浓度,建立了锌离子调控蛋白双向凝胶电泳图谱,鉴定到了96个差异表达蛋白斑点,共67个差异蛋白,其中32个表达下调,35个表达上调,锌离子调控蛋白的作用可能主要体现在糖代谢、核酸代谢、氧化还原作用、辅助蛋白质翻译、合成及折叠等方面。建立了锌结合蛋白的差异表达图谱,鉴定到了10个差异表达蛋白斑点,共7个差异蛋白,其中1个表达下调,6个表达上调。锌离子结合蛋白的作用可能主要体现在应对压力、蛋白质折叠和转运、氨基酸代谢等方面。【结论】肺炎链球菌主要通过调控碳水化合物代谢和核酸代谢等多个代谢通路来应对宿主锌金属离子匮乏的环境,从而使自身能够存活并对宿主形成感染。本研究为揭示细菌在宿主环境,特别是金属离子匮乏条件下的适应性生长机制提供理论基础。
- 易叔红张留辉孙雪松
- 关键词：肺炎链球菌金属蛋白蛋白质组学
- 利用IMAC与LC-MS/MS技术分离和鉴定化脓链球菌中的锌结合蛋白
- 2011年
- 化脓链球菌是一种革兰氏阳性致病菌,能引起一系列疾病。运用固定化金属离子亲和层析技术(IMAC)富集化脓链球菌中锌结合蛋白,进行溶液酶解,利用先进的LC-MS/MS技术对富集的锌结合蛋白进行质谱分析。鉴定到48个在化脓链球菌中与锌结合相关蛋白,这些蛋白主要涉及到蛋白翻译、糖代谢、金属转运、氧化等重要生理过程。这些结果对于深入研究化脓链球菌的致病机制,寻找新的抗菌药物作用靶点和疫苗候选物具有重要意义。
- 阳小燕银兴峰张留辉贺翔孙雪松
- 关键词：IMAC
- 锌离子对肺炎链球菌影响的蛋白质组学研究
- 肺炎链球菌细菌为革兰氏阳性致病菌,能产生多种毒素,可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等,产毒株还可引起猩红热。由于该细菌的强大毒力性及对抗生素的抗性,这种感染的预防和治疗成为困扰国际医...
- 张留辉
- 关键词：锌离子双向电泳蛋白质组学
- 文献传递
- 肺炎链球菌蛋白质组双向电泳技术的建立及优化被引量：8
- 2010年
- 为了建立适合肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)蛋白质组的双向电泳技术,对蛋白样品提取、裂解、上样量、IEF和银染等关键步骤进行了优化,探索出一套有效的肺炎链球菌蛋白分析的双向电泳方法,即以裂解液[15 mmol/L Tris-HCl、7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%(m/v)CHAPS,使用前现加2%(v/v)IPG缓冲液、1%(m/v)二硫苏糖醇(DTT)和1%(m/v)蛋白酶抑制剂混合物]结合反复冻融和超声裂解菌体的方法来提取蛋白质样品,按80μg蛋白上样量,并结合适宜的双向电泳参数,可获得蛋白分辨率高、重复性较好的双向电泳图谱。
- 张留辉阳小燕贺翔孙雪松
- 关键词：肺炎链球菌蛋白质双向电泳技术
