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禽流感H11N9亚型病毒东方白鹳分离株的基因特征被引量：1: 2010年; 根据已知禽流感病毒(AIV)的8个基因序列设计合成12对特异引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,分别成功扩增出分离于东方白鹳(Ciconia boyciana)的1株H11N9亚型禽流感病毒的全基因序列,将其分别克隆到pMD18-T载体后进行序列测定。同时将8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较,绘制各基因的进化树。结果表明:所克隆到的8个片段均包含相应病毒基因的完整开放阅读框架,长度分别为2280、2274、2151、1692、1497、1413、759、838bp核苷酸,分别编码759、757、716、563、498、470、252/97、230/121个氨基酸。该毒株HA有7个潜在糖基化位点;在HA裂解位点序列为PAIASR↓GLFG,无连续的多个碱性氨基酸插入,具有典型的低致病性禽流感病毒特征。根据该毒株与参考毒株的序列比较分析结果推测,该分离株可能是不同亚型禽流感病毒通过互相基因交换所形成的基因重组体。; 张兰兰柴洪亮曾祥伟张进郭亮华育平; 关键词：禽流感病毒

野禽源AIV PB1-F2基因的遗传进化及部分氨基酸位点组成分析被引量：1: 2011年; 在完成14株野禽源AIV PB1-F2基因克隆、测序的基础上,对其进行了同源性、遗传进化关系及氨基酸编码特征的比较分析。结果发现,H5N1亚型高致病性毒株A/lesser_kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)PB1-F2的第37,48,50位氨基酸分别为精氨酸、脯氨酸、甘氨酸,与其他13个低致病性毒株均不相同(其分别为谷氨酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸)。为探讨这一现象,从NCBI Influenza Virus Resource中选取1 061个AIV毒株的PB1-F2基因序列进一步展开分析,结果表明:在第37,48,50位氨基酸位点上,97香港H5N1、其他H5N1及其他亚型AIV在此3个位点上氨基酸的构成存在着较为明显的差异,而且还呈现出了一定的规律和特点;并且研究还发现在此3个位点上,H9N2亚型毒株也表现出了较强的时间和空间分布特征。针对PB1-F2基因的遗传进化关系分析表明,H5N1及香港系毒株较其他AIV存在较远的遗传距离。随机的突变和重组似乎不足以解释这种差异及遗传距离形成的原因,其生物学意义有待于进一步探讨。; 张进李雁冰柴洪亮张兰兰华育平; 关键词：遗传进化氨基酸组成

虎源猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗的制备及初步应用被引量：6: 2009年; 【目的】研制出虎源猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗并对其应用效果进行评价。【方法】以FPV-HLJ为种毒,按培养液体积1/10(V/V)的接毒量,采用同步接毒的方法接于猫肾传代细胞系F81株,于37℃静置培养,待细胞病变(CPE)达到75%以上时,进行收毒。病毒悬液经甲醛灭活24h,加入佐剂氢氧化铝胶,制备成FPV-HLJ细胞培养灭活疫苗。将灭活苗皮下接种2月龄非免疫家猫,确定其能产生较好的保护后,将该苗接种2月龄左右幼虎。【结果】实验组免疫猫FPVHI抗体水平随免疫次数的增加而呈上升趋势,三免后FPVHI抗体效价为1∶1024～1∶2048,且免疫猫能抵抗FPV强毒攻击,具有100%的存活率。幼虎三免后抗体效价多数能达到1∶1024。【结论】表明此灭活苗可产生较为理想的免疫效果。; 于亚丽周明张进华育平王立刚刘熠楠刘丹夏咸柱; 关键词：猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗抗体检测

H6N1亚型禽流感病毒A/Mallard/Heilongjiang/301/2007非结构蛋白基因全序列扩增及分析被引量：1: 2008年; 2007年秋我们从迁徙水禽绿头鸭(Anas platyrhynchos)中分离出一株H6N1亚型低致病性禽流感病毒A/Mallard/ Heilongjiang/301/2007。通过设计特异性引物对其非结构蛋白基因(NS)进行了全序列的扩增,并在GenBank中的序列进行比较,发现A/Mallard/Heilongjiang/301/2007属于欧亚系禽流感病毒,此株病毒NS基因与duck/Hokkaido/Vac-1/ 2004 H5N1株NS基因同源率高达98.5%,可能与北海道地区禽流感病毒具有共同起源。另外此株病毒NS基因在263～277位并没有发生15碱基的缺失,所以应属于等位基因A,亚系Ⅰ型。; 李晓冰华育平张进; 关键词：禽流感非结构蛋白

野禽源AIV PB1-F2基因的克隆与遗传进化及部分氨基酸位点分析: 选取14株野禽源AIV,以新近发现的A型流感病毒蛋白PB1-F2为研究对象,在完成此14株AIV PB1-F2基因克隆、测序的基础上,对其进行了同源性、遗传进化关系及氨基酸编码特征的比较分析。我们发现H5N1亚型高致病性...; 张进; 关键词：禽流感病毒基因序列克隆技术

野生动物疫病流行的相关影响因素及其防控: 本文对影响野生动物疫病发生与传播流行的相关因素作了简要介绍，包括与野生动物自身特性有关的疫病传播作用、非生命环境和生物环境以及人类活动的影响作用。同时对野生动物疫病防控措施作了简要的介绍。; 华育平张进柴洪亮; 关键词：野生动物疫病流行防控措施; 文献传递

野鸭源H3N8亚型禽流感病毒NS基因的分子克隆及序列分析被引量：5: 2009年; 根据GeneBank上已发表的H3N8亚型禽流感的非结构蛋白基因(NS)序列,设计了一对特异性引物,成功地从A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)中克隆到NS基因序列,该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白。与其他H3N8亚型的NS基因进行了同源性比较,核苷酸同源性为65.5%～98.3%,推导的氨基酸序列同源性为65.4%～97.8%。NS基因遗传进化树形成两个分支,该分离株处于等位基因B组。另外,此毒株NS基因在263～277位没有发生15个碱基的缺失。A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)株149位为丙氨酸,其不能感染哺乳动物。; 郭亮柴洪亮张兰兰张进侯志军孙颖魏韬华育平; 关键词：野鸭禽流感 NS基因

A/Grganey/SanJiang/160/2006(H5N2)分离株HA基因克隆及序列分析: 2009年; 应用RT-PCR方法,对从一只野生白眉鸭(Anasquer quedula)中分离出的禽流感病毒分离株A/Gr-ganey/SanJiang/160/2006(H5N2)的HA基因进行了序列的克隆和测定。测序结果显示,克隆的HA基因全长为1731bp,共编码565个氨基酸。核苷酸和氨基酸的最大同源性比较结果表明,该毒株的HA基因与其它31株H5N2亚型禽流感病毒HA基因的同源性为71.0%～98.2%,氨基酸序列同源性为84.0%～98.2%;遗传进化关系表明,该毒株属于欧亚群系。通过血凝素裂解位点的氨基酸序列分析可知,该毒株的HA切割位点上未见到典型的高致病力毒株H5、H7所具有的一系列碱性氨基酸,符合低致病力禽流感毒株的分子特征。; 刘熠楠李晓冰柴洪亮张兰兰张进华育平; 关键词：H5N2亚型禽流感病毒 HA基因

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张进