徐冉行
- 作品数:44 被引量:84H指数:5
- 供职机构:宁波市第六医院更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金宁波市自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 糖尿病患者外周血白细胞HCMV pp65基因表达状态研究被引量:1
- 2006年
- 目的建立检测人巨细胞病毒(HCMV)感染的聚合酶链反应/逆转录—聚合酶链反应(PCR/RT-PCR)方法,并探讨糖尿病与HCMV感染的关系。方法在HCMV 65 kD低基质磷蛋白基因(pp65)内设计一对引物,建立PCR/RT-PCR法检测727例糖尿病患者及230名健康体检人员(对照组)外周血白细胞HCMV pp65 DNA及其mRNA转录水平,同时应用间接免疫荧光法分析外周血白细胞HCMV PP65抗原。结果糖尿病患者HCMVpp65 DNA,mRNA及PP65抗原阳性率分别为36.04%,16.64%和10.04%,与对照组4.78%,2.17%及1.30%相比,差异均有显著性(P<0.01)。发病年龄<30岁患者组中HCMV pp65 mRNA和PP65抗原阳性率明显高于其他年龄组(P<0.05)。病程<1年的糖尿病患者HCMV pp65 mRNA和PP65抗原阳性检出率最高,分别为27.54%与15.94%;而HCMV pp65 DNA则相反,其最高检出率分别是年龄≥60岁(42.19%)或病程≥15年患者(44.68%)。结论糖尿病患者易发生活动性HCMV感染,外周血白细胞pp65 DNA,mRNA及PP65抗原检测是临床快速诊断HCMV感染的有效手段,联合使用能更有效地提高诊断水平。
- 林伟良刘文虎徐冉行凌志强
- 关键词:人巨细胞病毒
- 常见性病患者巨细胞病毒感染状况调查被引量:1
- 2001年
- 何国产张建英徐冉行凌志强
- 关键词:性病患者巨细胞病毒CMVHCMV全身感染
- 斑点免疫酶渗滤法检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原
- 2001年
- 目的:建立分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原快速斑点免疫酶渗滤法(DIEFA)。方法:应用DIEFA检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原,并与常规淋病奈瑟氏菌培养及间接免疫荧光染色法进行比较研究。结果:DIEFA检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原敏感性高于常规培养法及间接兔疫荧光染色法。整个检测过程在3h内完成。斑点色泽鲜艳,结果易于判断。结论:DIEFA敏感性高、特异性强、且简便、快速,具有实际应用价值。
- 张勤张新萍徐冉行单小云胡野
- 关键词:分泌物细菌培养
- 胃肠道恶性肿瘤C-myc基因荧光PCR方法的研究
- 2010年
- 目的建立胃肠癌中C-myc基因的荧光定量PCR(FQ-PCR)方法。方法胃肠癌细胞中的C-myc基因与质粒PGEM-T Easy Vector重组,转化大肠杆菌E.coli DH5α,获得克隆的C-myc基因标准模板。用ABI PRISM 7700PCR仪检测FQ-PCR扩增产物制成标准曲线来检测未知标本中C-myc的含量。结果 FQ-PCR扩增产物呈"S"形动力学曲线;ct(循环阈值)与PCR体系中起始模板拷贝数的对数值之间存在严格的线性关系,显示了FQ-PCR定量的准确性。结论 FQ-PCR是一种快速、简便、灵敏、准确的定量C-myc基因的方法。
- 毛海红徐冉行刘东海
- 关键词:胃肠癌
- 系统性红斑狼疮并发海蓝组织细胞增多症1例
- 2012年
- 患者女,21岁。因无明显诱因下出现反复腰背部酸痛、双上肢肿痛1个月人院。入院后查体:神志清,精神可,脉搏72次/min,呼吸18次/min,血压106/62mmHg.体温36.8℃。双上肢上举未见明显受限,活动可,双手肿胀,
- 王福斌徐冉行毛海红罗晶刘东海
- 关键词:海蓝组织细胞增多症系统性红斑狼疮并发双上肢入院后手肿胀
- 建立固相酶联免疫吸附试验技术诊断社区糖尿病患者人巨细胞病毒活动性感染被引量:1
- 2011年
- 目的建立检测人巨细胞病毒(HCMV)抗原特异性IgM的抗体捕捉酶联免疫吸附试验(Capture-ELISA),并分析糖尿病患者HCMV活动性感染状态。方法利用抗人IgM(μ链特异性)抗体包被固相载体,作为捕捉抗体吸附待检血清中的IgM,经过洗涤除去血清中IgG及其他成分,再加入特异性抗原与捕捉到的相应IgM抗体结合,然后加入酶标抗体和底物显色进行测定;同时,应用建立的酶联免疫捕获法诊断糖尿病患者HCMV近期感染状态,并与常用的间接酶联免疫吸附试验(In-ELISA)及RT-PCR进行比较。结果 Capture-ELISA的特异性及敏感性均高于间接法,且不受RF因子的影响。结论 Capture-ELISA操作简单、快速,且具有较高的特异性和灵敏度,是检测IgM抗体理想的方法之一。
- 张建英徐冉行林伟良刘文虎凌志强
- 关键词:人巨细胞病毒间接酶联免疫吸附试验
- 重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定被引量:1
- 2005年
- 目的构建人绒毛膜促性腺激素(HCGβ)原核表达载体PG5-HCGβ,使HCGβ在大肠杆菌中获得高效表达。建立一条简单、快速、高效的纯化复性路线,获得具有生物活性的高纯度rHCGβ。方法以本室克隆的PCRII/HCGβ为模板,构建PG5-HCGβ,转化大肠杆菌BL21表达HCGβ。表达蛋白顺次用凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化。结果酶切及序列结果显示,PG5-HCGβ构建正确,HCGβ表达约占菌体总蛋白的20%。经过凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化,获得rHCGβ纯度达95%以上。复性的rHCGβ具有促进小鼠子宫生长的生物学活性。结论构建的PG5-HCGβ表达载体在大肠杆菌中获得高效表达,纯化复性的rHCGβ蛋白具有较高的生物学活性,为今后的rHCGβ生产打下了良好的基础。
- 徐冉行刘东海冯伟云张顺毛联钢
- 关键词:原核表达纯化生物活性
- 预真空高温高压蒸汽对手术包的灭菌效果观察被引量:9
- 2011年
- 目的验证采用预真空高温高压蒸汽对骨科手术包和妇科手术包的灭菌效果。方法将大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌作为指示菌,包裹于手术包内进行预真空高温高压蒸汽灭菌处理,以此来验证预真空高温高压蒸汽灭菌的灭菌效果。结果预真空高温高压蒸汽灭菌对妇科手术包中4种试验菌株灭菌率为100.0%,对骨科手术包中的大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞和金黄色葡萄球菌的灭菌率均为100.0%,对骨科手术包中的蜡样芽胞杆菌灭菌率为85.7%。结论预真空高温高压蒸汽灭菌能够满足绝大部分手术包的灭菌要求,但是在实际应用过程中,需要对于其灭菌效果需要进行验证。
- 徐冉行张建英周林福
- 肝炎患者中TT病毒DNA及其IgG抗体的检测被引量:2
- 2003年
- 目的 了解肝炎患者中 TTV的感染情况。方法 应用 Nested- PCR对 137份甲~庚型肝炎、31份非甲~庚型肝炎及 10 4份献血员进行 TTV DNA检测 ,同时用 EL ISA法检测抗 TTVIg G。结果 TTV基因检出率分别为甲~庚型肝炎 2 0 .4 4 %、非甲~庚型肝炎 2 9.0 3% ,献血员 13.4 6 % ;抗 TTV Ig G检出率分别为甲~庚型肝炎 2 7.74 %、非甲~庚型肝炎 35 .4 8% ,献血员 14 .4 2 % ;甲~庚型肝炎、非甲~庚型肝炎与献血组相比 TTV DNA及抗 TTV Ig G均存在显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 肝病中存在 TTV感染 ,TTV存在健康携带状态。
- 徐冉行凌志强张勤
- 关键词:输血传播病毒免疫球蛋白G带病原状态
- 定量荧光PCR法验证流式细胞术测定人类白细胞抗原B27临界值标本的研究被引量:3
- 2013年
- 目的观察用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法来验证流式细胞术(FCM)检测人类白细胞抗原表达为临界值标本,评价其在强直性脊柱炎(AS)的临床诊治价值。方法分别对482例患者用流式细胞术检测人类白细胞抗原表达为阳性、临界值、阴性的样本及100名健康人群样本,以实时定量荧光PCR检测外周血HLA-B27DNA,确定样本的阳性率。结果 PCR法检测出阳性组调查282例阳性率100.00%、临界值组调查80例阳性率91.25%、阴性组调查120例阳性率为0.83%;健康对照组调查100名,阳性率3.00%。结论以定量荧光PCR检测>103为标准,FCM检测临界值组阳性率过高,差异有统计学意义,存在假阳性;阳性组和阴性组无明显差异,但阴性组有假阴性产生,定量PCR法对流式细胞术检测为临界值标本具有较高诊断价值,可防止假阳性和假阴性的产生,进一步提高AS诊断率和可靠性。
- 徐冉行李宇宁姚亚萍刘东海
- 关键词:聚合酶链反应强直性脊柱炎流式细胞术