徐进文
- 作品数：44 被引量：187H指数：8
- 供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省高等教育教学改革项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- PPARγ基因RNA干扰质粒的构建与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的构建表达细胞转录因子 PPARγ的 RNA 干扰(RNAi)质粒,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路以及 PPARγ为靶点的基因治疗提供稳定转染的 RNA 干扰质粒。方法选取PPARγ基因的 19 nt 特异性序列,设计针对 PPARγ的 shRNA 序列,应用基因重组技术克隆到 pSilencer 1.0-U6表达载体中,用 EcoR I、Apa I 进行双酶切和 DNA 测序鉴定重组克隆 , 在脂质体的介导下将包含 PPARγ基因的 RNAi 重组载体转染前列腺癌细胞 PC-3。转染 48 h 后 , 收集细胞裂解液,Western blotting 分析对照组与转染组 PPARγ蛋白的表达水平。结果双酶切证实 shRNA 正确插入 pSilencer 1.0-U6 质粒,DNA 测序证实插入的序列正确;含 PPARγ基因的 RNAi 载体转染前列腺癌细胞 PC-3 细胞成功;Western blotting 结果显示,与空质粒对照组相比,转染组细胞 PPARγ表达下调。结论成功构建含人 PPARγ基因的 RNAi 载体,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路提供了稳定转染的 RNA 干扰质粒。同时,阻断PPARγ的信号通路将为基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以 PPARγ为靶点的基因治疗提供了有利工具。
- 龚青徐进文徐祖敏高国全
- 关键词：PPAR-ΓRNAI
- 补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR2B mRNA表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR2B mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制。方法 SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2、24h两个观察时间点。连续给药5 d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌后2、24 h采用RT-PCR技术检测各组大鼠皮质神经细胞NMDA受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor)亚单位NR2B的mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组2h、24h等2个不同时间点,NR2B的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,药物组再灌注后2h、24h等2个不同时间点,NR2B mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论补阳还五汤干预对全脑缺血再灌注模型大鼠大脑皮层神经元NR2B mRNA表达水平的增高有调低作用。
- 关莉刘微闫福曼周乐全李小英徐进文刘海梅
- 关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注大脑皮质NR2B
- 毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响被引量：10
- 2015年
- 目的考察毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组,模型组,毛冬青皂苷E低、中、高剂量对照组(10,50,250μg·m L-1)、毛冬青皂苷E低、中、高剂量治疗组(10,50,250μg·m L-1)。造模前24 h给予相应浓度的药物预处理,缺氧4 h,复氧4 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,并采用蛋白印迹法(Western Blot)检测Caspase-3和Cleaved caspase-3凋亡蛋白的表达。结果缺氧/复氧后,与正常对照组比较,模型组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量显著升高(P<0.01),毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,细胞存活率增加,ROS含量降低。缺氧/复氧损伤可使Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达增加。毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达均下降。结论毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS生成,抑制凋亡相关蛋白Caspase-3和Cleaved caspase-3的表达有关。
- 张双伟李润美徐进文汪芳强皎李爱群张军
- 关键词：H9C2心肌细胞
- 二仙汤对卵巢切除大鼠胰岛素敏感性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察二仙汤对卵巢切除大鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。方法取SD大鼠40只,随机分为5组,每组8只,即假手术组,模型组,二仙汤低、高剂量组(30,60 mg·kg-1),雌激素组(0.01 mg·kg-1)。灌胃给药连续治疗14周后,检测各组大鼠血糖、血清胰岛素、糖耐量,并计算胰岛素抵抗指数;应用CT检测各组大鼠腹腔内脂肪及皮下脂肪的相对量;应用q PCR技术检测各组大鼠腹腔内脂肪中MCP-1、脂联素的m RNA相对量。结果各组大鼠空腹血糖水平差异无统计学意义;模型组大鼠血清胰岛素水平显著高于假手术组;模型组大鼠胰岛素抵抗指数显著高于假手术组,二仙汤治疗后可降低卵巢切除大鼠胰岛素抵抗指数;CT结果显示,卵巢切除大鼠腹腔内脂肪含量显著高于假手术组,二仙汤治疗后脂肪含量显著下降;二仙汤治疗后能改善卵巢切除大鼠糖耐量并降低胰岛素抵抗指数;卵巢切除后大鼠腹腔内脂肪中MCP-1 m RNA水平表达升高而脂联素的m RNA表达水平下降,二仙汤治疗后脂肪MCP-1的m RNA表达水平下降而脂联素的m RNA表达水平升高。结论二仙汤可提高卵巢切除大鼠胰岛素敏感性,这可能与其改善卵巢切除大鼠腹腔内脂肪内分泌功能有关。
- 薛倩倩许筱凰周乐全刘海梅闫福曼李小英李润美徐进文
- 关键词：二仙汤卵巢切除大鼠绝经胰岛素敏感性
- 雌激素通过改善内脏脂肪功能影响血脂、胰岛素敏感性
- 绝经期妇女最为显著的生理变化之一是性激素水平的骤然下降，尤其是雌激素水平的降低。这可能是导致绝经期妇女心血管疾病发病风险升高的重要原因。研究发现雌激素主要通过两种方式发挥对心血管系统的保护作用。一方面，雌激素可直接作用于...
- 徐进文
- 关键词：绝经期综合征雌激素疗法17Β-雌二醇实验药理
- 文献传递
- TBL教学在生理学教学中的应用被引量：13
- 2013年
- TBL(Team-based learning)教学是一种基于PBL(Problem-bosed learning)的强调以小组为单位的集体性学习,对提升整个组织的学习能力,创新能力和可持续发展能力具有十分重要的作用。本研究通过在生理学适当章节推行TBL教学,并和传统教学方法进行研究对比。结果提示TBL教学可培养学生的学习兴趣及学习积极性,使学生掌握科学的学习、思维方法,并增强团队合作能力;同时也促进了师生间的相互交流,提高了生理学教学质量。
- 刘海梅闫福曼徐进文李小英周乐全张晓东
- 关键词：生理学教学方法
- 川芎嗪对内毒素血症大鼠胸主动脉收缩性的影响
- 2013年
- 目的观察川芎嗪对内毒素血症大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素收缩反应性的影响,并探讨血管平滑肌中iNOS、p65蛋白在其中的作用。方法 24只雄性SD大鼠分为四组:对照组、lps注射组、川芎嗪干预组、注射lps后川芎嗪治疗组。lps注射后6 h,应用体外血管条张力测定技术检测各组大鼠胸主动脉环对不同浓度去甲肾上腺素的收缩反应;应用免疫荧光法检测大鼠胸主动脉血管平滑肌中p65及iNOS蛋白的表达。结果与对照组相比,注射lps后大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素的收缩反应产生的张力显著降低;川芎嗪治疗后内毒素血症大鼠胸主动脉对去甲肾上腺素的反应性显著升高。内毒素血症大鼠胸主动脉血管平滑肌表达iNOS及p65蛋白较对照组显著升高,川芎嗪治疗后可抑制内毒素血症大鼠血管平滑肌中iNOS及p65蛋白的表达。结论川芎嗪可增强内毒素血症大鼠血管对去甲肾上腺素的收缩反应性,这与川芎嗪降低血管平滑肌中iNOS及p65蛋白表达有关。
- 徐进文李润美李小英许筱凰周乐全许洁安刘海梅
- 关键词：川芎嗪P65INOS
- 二仙汤对卵巢切除大鼠棕色脂肪产热相关蛋白表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的研究二仙汤对卵巢切除大鼠肩胛区棕色脂肪中产热相关蛋白表达的影响。方法 40只雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组(SHAM),卵巢切除模型组(OVX),二仙汤低剂量治疗组(EXDL),二仙汤高剂量治疗组(EXDH),雌激素治疗组(E),并分别给予相应的药液连续灌胃给药14周。检测各组大鼠血脂4项;HE染色观察各组大鼠肩胛区棕色脂肪形态学变化;应用Western-blot及q PCR检测各组大鼠肩胛区棕色脂肪中脱偶联蛋白-1(UCP-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)的蛋白及其m RNA的表达水平。结果卵巢切除模型大鼠体质量、腹腔内脂肪质量与假手术组大鼠相比显著增加,卵巢切除大鼠血清总胆固醇水平较假手术组大鼠显著升高;二仙汤治疗后可降低卵巢切除大鼠体质量及腹腔内脂肪质量并降低血清总胆固醇水平。卵巢切除大鼠肩胛区棕色脂肪中UCP-1及PGC-1α的蛋白及其m RNA的表达水平下降,二仙汤治疗后可提高卵巢切除大鼠肩胛区棕色脂肪中UCP-1及PGC-1α的蛋白及其m RNA的表达水平。结论二仙汤可降低卵巢切除大鼠的体质量和腹腔内脂肪的质量并降低血清中总胆固醇的水平,这可能与其提高卵巢切除大鼠肩胛区棕色脂肪中产热相关蛋白UCP-1及PGC-1α的蛋白及其m RNA表达水平有关。
- 曾宁溪关莉周乐全刘海梅李小英薛倩倩徐进文李润美
- 关键词：二仙汤棕色脂肪绝经
- 兔颈总动脉球囊损伤后17β-雌二醇介导iNOS及NO对血管新生内膜增殖抑制的作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)对17β-雌二醇抑制兔颈总动脉球囊损伤反应中新生内膜及中膜增殖的影响。方法在去势雌性兔中建立右颈总动脉球囊损伤模型,实验分为假手术组(sham)、单纯去势组(OVX)、去势后球囊损伤组(OVX+Inj)、去势球囊损伤后补充雌激素组(OVX+Inj+E2)。分别检测各组血管壁新生内膜及中膜的厚度、血浆中NO含量、血管组织中iNOS含量及活性。结果与sham组相比,OVX+Inj组血管组织新生内膜增厚,中膜增生明显,血浆中NO含量及血管组织中iNOS活性降低,E2(estrogen)补充治疗后,可明显增加NO含量及i-NOS活性;western blot结果显示,OVX+Inj组iNOS蛋白表达明显降低,而雌激素替代治疗后iNOS蛋白表达显著增加。结论E2可通过增加血管组织iNOS活性及蛋白表达,促进NO合成,抑制血管损伤后新生内膜及中膜增殖,发挥其血管保护作用。
- 刘海梅林桂平谈智徐进文王庭槐
- 关键词：17Β雌二醇一氧化氮诱导型一氧化氮合酶
- 17β-雌二醇对新生牛血清诱导的血管平滑肌细胞增殖反应的影响及其机制被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇(17β-雌二醇)对新生牛血清诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖反应的影响及其机制。方法:用新生牛血清刺激培养的VSMCs增殖,MTT法检测17β-雌二醇对新生牛血清诱导的VSMCs增殖的影响,并用Western blot检测caveolin-1蛋白,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及NO在此过程中的变化。结果:与对照组比,新生牛血清可促进VSMCs增殖(P<0.05),17β-雌二醇作用24 h后能明显抑制上述作用(P<0.05);17β-雌二醇预处理可抑制新生牛血清诱导的VSMCs中caveolin-1,iNOS蛋白表达下降及NO释放(P<0.05);17β-雌二醇受体阻断剂1-{4-[2-(n,n-二甲氨基)乙氧基]苯}-1,2-二苯-1-丁烯(他莫昔芬)预处理可部分逆转17β-雌二醇的抑制作用(P<0.05)。结论:17β-雌二醇通过其受体可抑制新生牛血清诱导的VSMCs增殖,此过程与上调caveolin-1蛋白表达,激活iNOS,增加NO释放有关。
- 刘海梅赵晓峰徐进文林桂平王庭槐
- 关键词：17Β-雌二醇CAVEOLIN-1诱导型一氧化氮合酶
