徐雪晶
- 作品数：13 被引量：43H指数：5
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 促红细胞生成素通过PI3-K/Akt信号通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的新生大鼠心脏成纤维细胞增殖被引量：12
- 2009年
- 目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响,以及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3-K/Akt)信号途径和一氧化氮合酶(NOS)的作用。方法:应用胰酶和胶原酶双酶和差速贴壁法分离培养新生大鼠CFs细胞,应用EPO、AngⅡ、PI3-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L-NAME不同因素干预。细胞计数和MTT法作出CFs的生长曲线,检测CFs的增殖。化学酶法检测CFs培养液中的一氧化氮(NO)浓度以及总NOS和其亚型的活性。Western blotting检测Akt、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达。结果:AngⅡ促CFs增殖的作用显著。EPO剂量依赖性的增加CFs培养液中的NO浓度,同时剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的CFs增殖。在给药后第4d,和单纯的AngⅡ相比,浓度为5×103U/L、1×104U/L和2×104U/LEPO对CFs增殖的抑制率分别达到了24.4%、41.5%和50.5%。EPO显著提高Akt的磷酸化水平,促进eNOS蛋白的表达。应用PI3-K抑制剂LY294002和NOS抑制剂L-NAME均能使培养液中的NO浓度也随之下降,EPO抑制AngⅡ诱导CFs增殖的作用均被阻断。但LY294002同时阻断了eNOS蛋白表达,而L-NAME对eNOS没有影响。结论:EPO可剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的新生大鼠CFs的增殖。其作用机制是通过激活PI3-K/Akt信号途径促使CFs中eNOS表达来促进NO的生成,从而抑制CFs的增殖。
- 张新金马业新文渊徐雪晶
- 关键词：促红细胞生成素一氧化氮合酶1-磷脂酰肌醇3-激酶
- 核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体1的表达
- 2011年
- 目的探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的表达是否是由NF-κB调控。方法 Wistar大鼠50只随机分为4组:①正常对照组(n=10):标准饲料喂养。②H组(n=12):高脂饲料喂养。③A+H组(n=14):高脂饲料喂养,ADMA[0.2mg/(kg.d)]灌胃,每日1次。④P+A+H组(n=14):高脂饲料喂养,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)[40 mg/(kg.d)]腹腔注射、ADMA[0.2mg/(kg.d)]灌胃,均为每日1次。18周后麻醉大鼠、取主动脉。以实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测LOX-1 mRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果①A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量较正常对照组和H组升高(P<0.05),P+A+H组较A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05)。②A+H组NF-κB活性较正常对照组和H组均显著升高(P<0.05),P+A+H组NF-κB活性较A+H组明显降低(P<0.05)。③相关分析:NF-κB活性与LOX-1 mRNA和蛋白表达量均呈正相关(相关系数r分别为0.79,0.81;P<0.05)。结论 ADMA可能通过NF-κB途径上调LOX-1表达而促进动脉粥样硬化的发生发展。
- 徐雪晶贺莉杜广胜洪李锋马业新
- 关键词：核因子-ΚB非对称性二甲基精氨酸动脉粥样硬化
- 促红细胞生成素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心脏成纤维细胞中转化生长因子β1和胶原的表达被引量：10
- 2008年
- 目的探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心脏成纤维细胞（CF）中转化生长因子（TGF）-β1蛋白表达和胶原生成的影响，以及磷脂酰肌醇-3-激酶（P13-K）／Akt信号途径和一氧化氮合酶（NOS）在其中的作用。方法应用胰酶和胶原酶双酶法分离培养新生大鼠CF细胞，应用EPO、AngⅡ、P13-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L-NAME等不同因素干预。ELISA法检测CF中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的浓度。化学酶法检测CF培养液中的NO浓度以及NOS总的活性及其亚型的活性。Westernblot检测Akt、P-Akt、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、iNOS和TGF-B1蛋白的表达。结果EPO剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的CF培养液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达以及提高NO的浓度。10U／ml的EPO对Ⅰ型和Ⅲ型胶原浓度的抑制分别达到了28％和46％，同时NO浓度则提高了154％。EPO也显著抑制了AngⅡ促CF中TGF．B1蛋白的表达，同时Akt的磷酸化水平显著提高，并促进eNOS蛋白的表达。应用LY294002使eNOS蛋白表达水平明显下降，培养液中的NO浓度也随之下降。L-NAME不能降低eNOS蛋白表达，但抑制了NO的生成。EPO抑制AngⅡ诱导的CF中TGF-β1蛋白的表达以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原合成作用均能被二者阻断。结论EPO可抑制AngⅡ诱导的新生大鼠CF中TGF-β1的表达以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达，可能是通过激活P13-K／Akt信号途径促使CF中eNOS表达，从而促进NO的表达来实现。
- 张新金马业新文渊徐雪晶
- 关键词：心内膜心肌纤维化症红细胞生成素成纤维细胞胶原
- 促红细胞生成素对培养的乳鼠心肌细胞肥大的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:观察促红细胞生成素(EPO)对乳鼠心肌细胞肥大的影响。方法:体外分离培养乳鼠心肌细胞,用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激产生肥大的心肌细胞,加入不同浓度的EPO对肥大心肌细胞进行干预,以细胞表面积和心钠素(ANF)mRNA表达作为细胞肥大的观察指标,采用Western blot方法检测细胞内信号分子转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2及p-Smad2蛋白表达。结果:20U/ml的EPO能有效逆转AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,低于此浓度未见明显效果;EPO能减弱促心肌细胞肥大信号分子TGF-β1、Smad2及p-Smad2蛋白表达。结论:EPO具有抗心肌细胞肥大作用,且这一作用与TGF-β1-Smad2信号途径有关。
- 文渊马业新洪李锋徐雪晶张新金冯达应
- 关键词：促红细胞生成素心肌细胞肥大转化生长因子Β1SMAD2
- NF-κB介导ADMA上调大鼠腹腔巨噬细胞LOX-1的表达被引量：6
- 2010年
- 目的探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠腹腔巨噬细胞的氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达是否受核因子-κB(NF-κB)的调控。方法分离培养大鼠腹腔巨噬细胞。实验分组:正常对照组,以含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育;氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)组,在培养液中加oxLDL(50 mg/L);A+O组,在培养液中加ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50 mg/L);P+A+O组,在培养液中加吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,25μmol/L)、ADMA(15μmol/L)o、xLDL(50 mg/L)。以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot分别检测LOX-1 mRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果 oxLDL组与A+O组LOX-1 mRNA和蛋白表达比对照组明显增强,以A+O组尤为明显(均P<0.05);P+A+O组LOX-1mRNA和蛋白表达较A+O组降低(P<0.05)。与对照组相比,oxLDL组与A+O组NF-κB活性明显增强,以A+O组尤为明显(均P<0.05);P+A+O组NF-κB活性较A+O组降低(P<0.05)。相关分析:NF-κB活性与LOX-1 mRNA和蛋白表达量呈正相关(均为r=0.82,P<0.05)。结论 ADMA可能通过NF-κB途径增强LOX-1表达而促进巨噬细胞转化为泡沫细胞,促进动脉粥样硬化的发生发展。
- 徐雪晶何军张新金文渊马业新
- 关键词：核因子-ΚB非对称性二甲基精氨酸巨噬细胞
- 核因子-κB在非对称性二甲基精氨酸诱导大鼠主动脉粥样硬化中的作用机制
- 研究背景和目的:
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一类发生在动脉血管壁的慢性进行性炎症反应性疾病，是众多心脑血管疾病共同的病理基础，严重危害人类健康。血管内皮细胞损伤、平滑肌细胞增殖及巨噬细胞...
- 徐雪晶
- 关键词：动脉粥样硬化非对称性二甲基精氨酸主动脉氧化型低密度脂蛋白血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1吡咯烷二硫代氨基甲酸盐
- RNA干扰技术抑制可溶性环氧化物水解酶对急性心肌缺血坏死的影响
- 2011年
- 目的应用RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术下调可溶性环氧化物水解酶（solubleEpoxideHydrolase，sEH）的表达，观察其对异丙肾上腺素（isoproterenol，ISO）诱导的急性缺血小鼠心肌的凋亡相关基因和心功能的影响。方法采用ISO注射液20mg／（kg·d）连续腹腔注射3d，建立小鼠急性心肌缺血模型，分为正常对照组（C组）、心肌缺血组（MI组）、缺血加阴性质粒组（PCN组）和缺血加EH-2质粒组（EH-2组）。利用构建好的靶向sEH基因的特异性小干扰RNA质粒EH-2，下调小鼠sEH基因的表达，用心脏超声观察各组左室舒张末期内径（LVEDd）、左室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）等变化。Westernblotting法检测各组Bcl-2、Bax和sEH的表达变化。结果与对照组相比，心肌缺血组EF和Fs值降低，LVEDd增加；心肌Bax表达升高，而Bcl-2表达降低（P〈0．01）。而缺血加EH-2质粒组sEH的表达降低，并且与MI组和PCN组相比，EF和Fs值增加，LVEDd减小；心肌Bax表达降低，Bcl-2表达升高（P〈0．01）。结论用RNA干扰技术可下调小鼠体内sEH的表达，从而增加抑凋亡基因Bcl-2的表达，改善ISO诱导的急性心肌缺血和心功能不全。
- 杜广胜徐雪晶贺莉马业新
- 关键词：异丙肾上腺素RNA干扰
- 间充质干细胞条件培养基治疗肝细胞氧化应激损伤中miRNA的表达与调控机制
- 目的:1.人脐带来源的间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)对肝细胞氧化应激损伤的研究。2.MSC-CM治疗肝细胞氧化应激损伤过程中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异性表达,探讨相关miRNA的调控机制。方...
- 徐雪晶
- 关键词：肝细胞氧化应激损伤间充质干细胞微小RNA
- 文献传递
- 促红细胞生成素对新生大鼠心脏成纤维细胞氧化应激时一氧化氮合酶系统的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对心脏成纤维细胞(CFs)氧化应激时一氧化氮合酶(NOS)系统的影响,以及PI3-K/Akt信号途径在其中的作用。方法:应用胰酶和胶原酶双酶法分离培养新生大鼠CFs,EPO、过氧化氢(H2O2)和PI3-K抑制剂LY294002不同因素干预。化学酶法检测CFs培养液中的NO浓度以及总NOS和其亚型的活性。Western blot检测Akt、p-Akt、eNOS、iNOS蛋白的表达。结果:氧化应激使CFs中iNOS的表达显著上调,活性增强;eNOS蛋白的表达明显下降。同时CFs培养液中NO的合成增加显著,达到(25.94±2.57)μmol/L,是对照组的4倍多(P<0.01)。EPO显著抑制CFs氧化应激时iNOS蛋白的表达,同时上调eNOS蛋白,总的NO浓度也显著下降。Akt磷酸化形式p-Akt的表达水平也明显提高。PI3-K抑制剂LY294002能阻断EPO促进eNOS和p-Akt蛋白表达的作用,但EPO抑制iNOS的作用不能完全被阻断。结论:EPO能促进新生大鼠CFs氧化应激时eNOS蛋白的合成,抑制iNOS蛋白的表达。其促进eNOS的表达是通过激活PI3-K/Akt细胞信号途径来实现,抑制iNOS的机制有待进一步探讨。
- 张新金马业新文渊徐雪晶
- 关键词：氧化应激促红细胞生成素一氧化氮合酶心脏成纤维细胞
- 间充质干细胞条件培养基治疗肝细胞氧化应激损伤中的miRNA表达与调控机制
- 徐雪晶鞠秀丽
