徐霞
- 作品数:89 被引量:306H指数:10
- 供职机构:广州医学院第一临床学院医学检验系更多>>
- 发文基金:广州市医药卫生科技项目广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人心肌肌钙蛋白I基因的人工合成及高效表达被引量:1
- 2005年
- 目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白I(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达。方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技术将其插入温控型表达载体pBV220,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,构建cTnI基因的非融合表达菌hcTnI-pBV220/DH5α,热激后诱导非融合蛋白的表达,用单克隆抗体检测特异性hcTnI蛋白表达。结果序列分析表明克隆载体中的cTnI人工基因与设计相符,双酶切电泳结果证明表达载体构建成功,经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量(Mr)约24000,凝胶密度扫描约占菌体总蛋白的25%,能与cTnI单克隆抗体特异性结合。结论成功获得cTnI人工基因,构建了cTnI基因原核表达载体并获得了高效表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用奠定了基础。
- 徐霞杨能涂洪斌
- 关键词:密码子偏爱性克隆
- 把握检验医学发展趋势 培养高素质现代检验人才被引量:12
- 2002年
- 阐述了检验医学的发展现状和趋势,指出作为高等医学院校,应根据检验医学发展的需要,深化教育改革,培养适应新时代的高素质现代检验人才.
- 徐霞吴爱武陈柏铭
- 哮喘病人的HLA-DRB、LMP、TNFβ基因遗传多态性
- 2003年
- 目的 探讨人类HLA -DRB、LMP、TNFβ基因型在广州地区支气管哮喘患者中的分布 .方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR -SSP)和PCR -RFLP技术检测HLA -DRB和LMP、TNFβ的等位基因在 5 2例哮喘患者和10 3例健康者间的分布 .结果 哮喘病人HLA -DRB频率 :DR10 .0 0 96、DR2 0 .192、DR30 .0 5 76、DR4 0 .0 86 5、DR110 .0 2 88、DR130 .0 0 96、DR70 .0 4 81、DR80 .0 76 9、DR90 .115、DR10 0 .0 0 96、DR空 0 .0 5 76 .哮喘病人TNFβ基因频率为TNFβ1 0 .4 32 6 ,TNFβ2 0 .5 6 73,支气管哮喘病人LMP基因频率为 :LMP2 A 0 .345 5、LMP2 B 0 .6 5 4 5、LMP7 A0 .5 185、LMP7 B 0 .4 815 .结论 广州地区哮喘病人与HLA -DRB、LMP。
- 徐霞陈盛强刘利东孙宝清陈顺存
- 关键词:哮喘HLA-DRBLMPTNFΒ遗传多态性
- 性早熟女童血清ghrelin水平研究被引量:2
- 2012年
- 目的探讨性早熟女童血清ghrelin水平变化。方法将87例5~9岁性早熟女童根据第二性征发育情况、骨龄、子宫、卵巢容积及促性腺激素释放激素(GnRH)激发试验的结果分为特发性中枢性早熟(ICPP)组和单纯乳房早发育(PT)组,选择34例年龄相当的健康女童作为对照组,采用夹心法酶联免疫吸附试验测定空腹血清ghrelin水平。结果 ICPP组血清ghrelin水平为Log(2.728±0.304)ng/L,明显高于对照组[Log(2.567±0.304)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05);PT组血清ghrelin水平为Log(2.613±0.300)ng/L,与ICPP组和对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ICPP组血清ghrelin水平明显高于对照组,推测ICPP女童血清ghrelin变化可能与性激素升高有关。
- 罗小娟陈蔚曹科徐霞
- 关键词:雌激素类促性腺素释放激素胃促生长素
- RACE技术扩增及克隆中华菊头蝙蝠ACE2基因被引量:1
- 2009年
- 目的建立中华菊头蝠体内扩增血管紧张素转换酶2(ACE2)基因真核表达载体,研究SARS冠状病毒感染的跨种属传播机制。方法利用基因的种属保守性分别设计用于扩增5’未端和3’端cDNA的引物,从中华菊头蝠小肠组织中提取总RNA,在通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得cDNA 5’端和3’端序列基础上,进一步PCR扩增ACE2开放阅读框并克隆到pcDNA3.1。结果成功获得了中华菊头蝠的ACE2基因全长序列,并构建了其真核表达载体pcDNA3.1/R-ACE2。结论利用RACE技术扩增并构建了中华菊头蝙蝠的ACE2的真核表达载体,为研究SARS冠状病毒感染与免疫及跨种属传播机制奠定了基础。
- 高俊徐霞肖洪广谢天赐林勇平
- 关键词:CDNA末端快速扩增血管紧张素转换酶2蝙蝠
- 高同型半胱氨酸诱导神经细胞凋亡的机制研究进展被引量:1
- 2009年
- 目的探讨和研究高同型半胱氨酸诱导神经细胞凋亡的机制,及其对高同型半胱氨酸诱导神经细胞凋亡起协同作用的因素,和加剧或缓解高同型半胱氨酸诱导的神经细胞凋亡的因素。方法对近年来的有关文献进行分析,归纳。结论高同型半胱氨酸诱导神经细胞凋亡的机制,及其对高同型半胱氨酸诱导神经细胞凋亡起协同作用的因素,和加剧或缓解高同型半胱氨酸诱导的神经细胞凋亡的因素值得进一步探讨和研究。
- 陈珑徐霞
- 关键词:高同型半胱氨酸神经细胞细胞凋亡
- 滴金免疫法检测丙型肝炎病毒抗体被引量:13
- 1996年
- 用自行制备的直径15nm的胶体金标记SPA,建立了检测血清丙型肝炎病毒抗体的滴金免疫测定法,与Abbott抗-HCVEIA试剂盒对比检测临床标本,符合率为95%。该法简便、快速、整个检测过程只需5分钟,阳性结果在膜上出现红色斑点,易于用肉眼判断。
- 徐霞周文达
- 关键词:丙型肝炎病毒抗体酶免疫法胶体金
- 哮喘病人肿瘤坏死因子基因的遗传多态性被引量:1
- 2002年
- 陈盛强徐霞刘利东孙宝清陈顺存
- 关键词:哮喘肿瘤坏死因子遗传多态性
- 人心肌肌钙蛋白I的生物学特性及其检测的研究进展被引量:4
- 2004年
- 杨能徐霞
- 关键词:生物学特性心肌细胞损伤
- 人脂联素球状结构域基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的:构建人脂联素球状结构域(gAd)基因的原核表达载体PET-28a(+)-gAd,诱导表达并纯化重组gAd蛋白,制备多克隆抗体。方法:以人基因组为模板,用PCR方法扩增人脂联素球状结构域(gAd)基因,构建原核表达载体PET-28a(+)-gAd,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,经SDS-PAGE,免疫印迹法检测并鉴定表达产物,表达的目的蛋白用镍亲和层析柱纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果:原核表达载体PET-28a(+)-gAd转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,获得gAd重组蛋白,免疫印迹证实能与抗his标签检测抗体结合,制备的多克隆抗体经间接ELISA法测得效价为1∶32 000。免疫印迹证实,抗血清不仅能特异性地识别gAd蛋白,还能识别脂联素蛋白,而不与非特异性蛋白结合。结论:成功构建原核表达载体PET-28a(+)-gAd,并表达、纯化重组蛋白gAd,制备的多克隆抗体特异性好,效价较高,为进一步的研究奠定了基础。
- 安薇徐霞
- 关键词:原核表达多克隆抗体