方伟
- 作品数：48 被引量：70H指数：5
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 结核分枝杆菌Rv0733-6His抗原羊驼单域重链抗体的筛选与鉴定
- 2013年
- 单域重链抗体是目前中和胞内病原体抗原的重要分子之一,研究以结核分枝杆菌Rv0733-6His融合抗原为靶标,对羊驼非免疫单域重链抗体库进行了3轮淘洗,通过ELISA和测序方法,从1 024个克隆中筛选出10个独立单域重链抗体序列,继而用原核表达并鉴定了1株Rv0733-VHH-Fc-6His抗体。免疫印迹和免疫荧光结果均显示Rv0733-VHH-Fc-6His抗体可以特异性地结合Rv0733抗原。提示Rv0733-VHH抗体可能具备结合胞内菌相关抗原的潜力。
- 潘欣蔡家麟王颖陈建霞曾思良方伟陈敏廖万清余秀珍张俊宋维
- 关键词：结核分枝杆菌表达纯化噬菌体抗体库
- 银包钯纳米制剂在制备抗隐球菌感染药物中的应用
- 本发明涉及医药技术领域，具体涉及银包钯纳米制剂(Pd@Ag)在制备抗隐球菌感染药物中的应用。本发明经细胞实验表明，在多种常见的侵袭性真菌病原体之中，不同直径银包钯纳米制剂仅对隐球菌具有良好的抑制活性，其抗真菌活性显著高于...
- 方伟张超法振宗廖万清
- 去泛素化酶对新生隐球菌生长与毒力的多效性调控及机制研究
- 方伟
- 条件启动子pCTR4在隐球菌基因表达调控中的应用被引量：1
- 2014年
- 目的通过条件启动子pCTR4的质粒构建以及其在新生隐球菌中的同源置换,研究其在隐球菌基因表达调控中的应用。方法应用套叠PCR,构建含报告基因NEO的铜离子抑制性启动子质粒pNEO/CTR4和启动子同源重组框,并利用基因枪将其转化入新生隐球菌感受态细胞,常规及实时定量PCR检测条件启动子对目的基因的转录调控效应。结果成功构建了质粒pNEO/CTR和隐球菌条件启动子重建菌株,条件启动子pCTR4对目的基因具有预期的转录诱导和抑制效果。结论新建铜离子抑制性启动子质粒pNEO/CTR4可以应用于对隐球菌目的基因表达水平的调控;隐球菌泛素编码基因UBI 1并非致死性关键基因。我们的研究为今后新生隐球菌泛素系统的分子致病机制研究奠定了基础。
- 赵静宇法振宗方伟孟云芳张超周兆婧潘炜华廖万清
- 关键词：新生隐球菌泛素致病机制
- 东部沿海某部海训官兵皮肤病患病率调查及其影响因素分析被引量：6
- 2018年
- 目的分析东部某海训部队官兵在新时期军事训练环境下皮肤病的流行病学特点和患病原因,并提出防治措施。方法采用整群抽样、分层抽样和单纯随机抽样相结合的多阶段抽样方法,从东部沿海某部海训官兵中选择768名官兵,进行皮肤病问卷调查,随行医师对全体被调查者进行体格检查并给出诊断和治疗指导。应用logistic回归分析研究皮肤病患病的影响因素。结果回收有效问卷696份,有效率为90.62%。被调查者年龄17~32岁,共349例(50.14%)患有皮肤病。共检出皮肤病类型34种,患病频次为755,其中感染性皮肤病占多数(患病频次565,构成比74.83%)。海训官兵皮肤病患病情况与气候、环境、训练条件、饮食习惯等有关,各类皮肤病病因不尽相同。结论海训官兵皮肤病患病率高、影响因素多,应通过普及皮肤病防治知识、科学施训、改善防护条件、倡导合理生活习惯、提高医务人员诊治水平、更新药品配备等防治措施降低皮肤病患病率。
- 闫泽灏张正委伊九任浩潘炜华杨雅骊廖万清方伟
- 关键词：军队卫生皮肤疾病海训患病率
- 海洋抗真菌药物及抗真菌活性物质研究进展被引量：3
- 2020年
- 真菌是自然界重要的潜在致病微生物,新的致病真菌层出不穷,当前使用的抗真菌药物存在明显不良反应,临床耐药现象日益严重。海洋是最具新型药物开发潜力的宝库,为探索适合我国国情的海洋潜在抗真菌活性药物的挖掘及开发策略,学者对海洋天然抗真菌药物的研发现状进行综述。
- 扈东营邓宇晨方伟熊林潘炜华廖万清
- 关键词：抗真菌药物抗真菌活性物质
- 去泛素化酶Ubp5与多聚泛素协同调控隐球菌的生长和毒力
- 方伟
- 多元化教学评价体系在皮肤性病学的重构和完善被引量：4
- 2017年
- 教学评价就是依据一定的教学目标和标准,对教学活动是否达到既定标准,是否满足学生、教师的发展需求的价值判断。本文主要通过对教学质量评价工作在皮肤性病学专业的实践探索,为本专业建立和完善有效的教学质量评价机制提供参考。
- 杨雅骊冷峰方伟陈敏朱元杰潘玮华陈江汉廖万清
- 关键词：皮肤性病学多元化教学
- 建立携带左旋天门冬酰胺酶的红细胞特异性表达系统被引量：1
- 2014年
- 目的:建立基因修饰红细胞输送左旋天门冬酰胺酶(L-ASNase)的体系。方法:采用2A联体技术将L-ASNase和红色单体荧光蛋白基因分别置于红细胞特异性基因调控元件或非组织特异性短延长因子1α启动子控制下,构建慢病毒载体,分别包装成组织特异性重组慢病毒或非组织特异性重组慢病毒,测定病毒滴度,并分别感染靶细胞,用六氧苄基鸟嘌呤/卡莫司汀联合筛选以富集感染的小鼠红白血病阳性细胞;用六亚甲基二乙酰胺诱导富集的阳性细胞向红细胞分化,流式细胞术检测红色单体荧光蛋白报告基因的表达,荧光显微术观察基因表达产物在细胞中的定位,免疫印迹分析L-ASNase的表达水平,评估在红细胞分化过程中组织特异性重组慢病毒的表达优势。结果:经限制性内切酶谱分析和序列测定,构建的重组慢病毒载体结构正确;免疫荧光结果显示在非组织特异性慢病毒感染的HeLa细胞中,L-ASNase主要表达在细胞质,单体红色荧光蛋白主要表达在细胞核内,提示2A序列通过自裂解使同一读框中的2个基因获得了表达;用50μmol/L六氧苄基鸟嘌呤-50μmol/L卡莫司汀联合筛选,可有效富集感染的小鼠红白血病阳性细胞;经六亚甲基二乙酰胺诱导,第7 d的MEL细胞中表达的重组L-ASNase浓度达0.3 U/mg总蛋白。结论:红细胞特异性慢病毒载体可以在小鼠红白血病细胞向红细胞分化过程中使携带基因的表达逐步增高,优于非组织特异性慢病毒载体。本研究为基因修饰造血干细胞、并通过体外细胞分化的方法大量产生携带L-ASNase的红细胞治疗恶性血液病奠定了临床前的实验基础。
- 潘欣曾思良宋维余秀珍张俊张鸿声方伟陈敏廖万清
- 关键词：慢病毒载体基因调控
- 银包钯纳米制剂在制备抗隐球菌感染药物中的应用
- 本发明涉及医药技术领域，具体涉及银包钯纳米制剂(Pd@Ag)在制备抗隐球菌感染药物中的应用。本发明经细胞实验表明，在多种常见的侵袭性真菌病原体之中，不同直径银包钯纳米制剂仅对隐球菌具有良好的抑制活性，其抗真菌活性显著高于...
- 方伟张超法振宗廖万清
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