曹靖
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:大连医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- 灭活的双歧杆菌对肠上皮细胞粘附机制的研究
- 黄敏伦永志纪芳康白袁杰利宁安红曹靖刘为国范晓磊李岩
- 双歧杆菌作为人和动物肠道中最重要的生理性细菌之一,对机体无毒、无害,并且具有广泛的生理作用。双歧杆菌只有粘附于肠上皮细胞,才能对宿主产生各种生态效应和生理作用,因此研究活的和灭活双歧杆菌的粘附机制对认识微生态学的基本规律...
- 关键词:
- 关键词:灭活双歧杆菌粘附
- Hca-F抗原-HSP70BCG疫苗免疫对小鼠肝癌Hca-F的免疫保护效应
- 2017年
- 目的探讨化学交联法构建的Hca-F抗原-卡介苗热休克蛋白70(HSP70BCG)复合物对Hca-F肝癌的主动免疫保护效应及其机制。方法采用ADP亲和层析方法提取HSP70BCG,超速离心法提取粗制肿瘤抗原,采用化学连接法或加入ADP构建Hca-F抗原-HSP70BCG复合物,免疫正常小鼠,3次后检测对Hca-F攻击的主动免疫保化效应,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hca-F刺激下的脾细胞增殖反应,用流式细胞仪检测脾细胞表型的变化。结果化学交联法和加入ADP构建的Hca-F抗原-HSP70BCG复合物免疫可延长小鼠的存活时间,增强脾细胞对抗原刺激的应答能力和细胞介导的细胞毒活性、提高γδT细胞的百分率。结论 Hca-F抗原-HSP70BCG复合物免疫可诱导抗瘤免疫保护效应。
- 郭连英张婷黄琳张雪刘花丽于向洋王慧娟高瑞芳李发胜曹靖
- 关键词:肿瘤疫苗卡介苗热休克蛋白
- 香菇C_(91-3)转录组Unigene 28447基因的蛋白表达及其对细胞凋亡和周期的影响被引量:1
- 2015年
- 目的克隆香菇C91-3转录组中Unigene 28447基因,对其进行生物信息学分析,并研究该基因结构域的生物学活性。方法提取香菇C91-3菌丝体中的总RNA,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得香菇菌丝体Unigene 28447基因全长;构建基因表达载体,进行原核诱导表达,将表达蛋白进行纯化、复性。运用MTT法、流式细胞仪法研究蛋白对肿瘤细胞生长、周期及凋亡的影响。结果成功构建重组质粒p ET32a(+)-Unigene,诱导重组蛋白表达,并进行纯化、复性。MTT法显示不同浓度蛋白对肿瘤细胞的生长抑制作用与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05),流式细胞仪显示此蛋白具有诱导肿瘤细胞改变周期和凋亡的作用(P<0.05)。结论初步鉴定Unigene 28447基因的结构域具有抗肿瘤活性。
- 曹淑云刘奔钟民涛伦永志张伟王晓丽李星云曹靖宁安红黄敏
- 关键词:克隆重组蛋白
- 香菇C_(91-3)转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析被引量:2
- 2014年
- 旨在克隆香菇C91-3转录本Unigene 14872基因中的Pkinase结构域,并对其进行生物信息学分析。提取香菇C91-3菌丝体中总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得Unigene 14872基因全长。用NCBI对其进行生物信息学分析,预测其具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Pkinase)结构域。设计引物PCR扩增Pkinase结构域,然后克隆至pET32a(+)载体,再热转化至JM109中保存并进行质粒测序。重组质粒pET32a(+)-Pkinase构建成功,并成功诱导表达重组蛋白,初步鉴定该蛋白具有抗肿瘤活性,为进一步研究重组蛋白的活性及作用机制奠定基础。
- 杜忠娟钟民涛伦永志刘奔张伟王晓丽李星云曹靖宁安红黄敏
- 关键词:生物信息学蛋白激酶