朱帆
- 作品数：5 被引量：83H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脾脏在大鼠肝硬化形成过程中免疫调控机制的探讨被引量：46
- 1995年
- 为了解脾脏促进肝硬化形成的机理，作者用ＣＣｌ４诱导大鼠肝硬化模型，实验动物切脾或注促吞噬肽（Ｔｕｆｔｓｉｎ），同时分离肝实质、枯否（Ｋｕｐｆｆｅｒ）和贮脂（Ｉｔｏ）细胞，加ＣＣｌ４和脾条件液或Ｔｕｆｔｓｉｎ混合培养；并由动物模型肝组织块提取ＲＮＡ，同５种ｃＤＮＡ探针作分子杂交，从整体、细胞和分子三个不同水平探讨其作用机制。结果表明，在肝硬化模型，与切脾组相比，有脾组动物血中白细胞介素１（ＩＬ１）、ＩＬ６和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）升高（Ｐ＜０．０５）。体外Ｉｔｏ细胞培养发现，加入脾条件液或Ｔｕｆｔｓｉｎ比单独加ＣＣｌ４的细胞分泌较多的纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ｉ型胶原（Ｐ＜０．０５）。狭缝杂交结果表明，从有脾组动物提取的ＲＮＡ与ＴＮＦα、ＩＬ１β、转化生长因子（ＴＧＦ）β和ＣｏｌｌａｇｅｎＩ探针杂交比切脾组呈现更高密度的放射自显影图像。作者认为，脾脏促进肝硬化形成的免疫调控是一复杂的过程，促进ＴＧＦβ基因的表达可能是引起肝脏纤维过度增生的关键所在。
- 汪谦夏穗生姜汉英马绪贤朱帆左立群
- 关键词：肝硬变脾脏免疫组织化学
- HBc-HLA-A＊ 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^＋供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。
- 郝友华杨新星丁红晖宋娜朱帆喻植群杨东亮
- 关键词：四聚体
- 乙肝病毒蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件优化
- 2009年
- 目的优化乙肝蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件。方法选择急性自限性HBV感染者外周血,分离PBMC,体外用乙肝蛋白抗原表位多肽特异性刺激,特定天数后收集细胞,用CD8抗体与MHC-I类分子HBV抗原肽四聚体进行染色流式检测,检测扩增后乙肝蛋白抗原表位特异性CTL在CD8阳性细胞群中所占的频率。结果1)在不同多肽浓度刺激下,当浓度在20 ug/mL时,所测得特异性CTL占PBMC中CD8+T细胞的频率达到最高峰;2)固定刺激多肽浓度,在不同的刺激天数获得的特异性CTL频率第10天时最高;3)在不同的细胞因子培养条件中,当加入的细胞因子IL-2,IL-7,IL-15组合时所获得的特异性CTL频率最高。结论在刺激肽浓度为20μg/mL,并加入适量的细胞因子(IL-2,IL-7,IL-15),刺激10天的条件下,所获得的乙肝蛋白抗原特异性CTL频率最高。
- 郝友华陈玲杨新星丁红晖冯雪梅朱帆刘贽杨东亮
- 关键词：体外扩增
- 重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的检测及其与临床转归关系的探讨被引量：33
- 2004年
- 目的 研究人纤维介素基因或纤维介素/hfgl 2凝血酶原酶(简称hfgl 2)在重型肝炎、慢性肝炎、肝硬化患者肝组织及非配对患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,分析其表达与患者临床表现和肝功能的关系,探讨hfgl 2检测对预测患者临床转归和预后的价值。方法 采用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测23例重型肝炎、13例慢性肝炎、14例肝硬化患者的肝组织和30例重型肝炎、10例慢性肝炎患者、10例健康对照者PBMC中的hfgl 2表达。应用多媒体彩色图文分析系统对hfgl 2的表达进行半定量分析。结果 23例重型肝炎患者肝组织中,21例可见hfgl 2表达,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者肝组织中均无hfgl 2表达。肝组织中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。30例重型肝炎患者中,28例外周血白细胞hfgl 2高表达,10例慢性乙型肝炎患者中有1例PBMC可检测到hfgl 2,健康对照组未检测到hfgl 2。PBMC中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。结论 Hfgl 2的表达为重型肝炎所特有的现象,hfgl 2的表达与乙型肝炎患者病情的严重程度密切相关,减少和阻断其表达有可能为防治重型肝炎提供新的途径和方法。PBMC中hfgl 2的检测可能有助于重型肝炎的早期诊断和临床转归的判断。
- 朱帆宁琴陈悦陶新学严伟明习东严福明郝连杰罗小平
- 关键词：重型乙型肝炎肝组织纤维介素临床转归凝血酶原酶
- 不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型及抗病毒效果的实验被引量：3
- 2012年
- 目的探讨不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型的影响因素,观察应用该模型抗病毒的效果。方法采集鸭血清,应用PCR方法定性检测鸭血清中病毒DNA;定量PCR方法检测鸭血清中病毒DNA载量变化;用抗病毒药物处理,观察其在鸭DHBV感染模型中的抗病毒效果。结果不同种鸭DHBV自然感染率不同,樱桃谷鸭为8.75%,湖北麻鸭两个批次分别为17.80%和10.68%;静脉注射和腹腔注射两途径均能致雏鸭感染DHBV,静脉注射感染率80%,腹腔注射感染率65%;鸭感染DHBV后,体内病毒载量维持在106～108copies/mL,可持续20 d以上;抗病毒药物处理后,在不同DHBV模型中其抗病毒效果变化趋势一致。结论鸭的种类和人工感染途径可影响DHBV感染率;雏鸭感染DHBV后其体内有持续性的病毒血症;DHBV感染模型是药物抗病毒研究较好模型。
- 郝友华李安意丁红晖朱帆赵西平杨东亮
- 关键词：鸭乙型肝炎病毒
