朱海峰
- 作品数：60 被引量：236H指数：10
- 供职机构：山东省血液中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 碱性成纤维细胞生长因子对人肝癌细胞蛋白激酶B活性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)对人肝癌细胞(BEL-7402)蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)活性的影响。方法以碱性FGF(b FGF)和wortmannin处理人肝癌细胞(BEL-7402),Western blot检测细胞外信号调节蛋白激酶B的活性。结果 25 ng/ml bFGF刺激人肝癌细胞(BEL-7402)10 min,细胞膜和胞质PKB酶活性达高峰。Wortmannin预处理后,人肝癌细胞(Bel-7402)细胞膜和胞质PKB活性在各时间点均明显降低。结论 bFGF能通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)途径迅速激活人肝癌细胞(BEL-7402)的PKB活性。
- 孙波颜鑫李文超陈剑峰朱海峰
- 关键词：肝癌碱性成纤维细胞生长因子蛋白激酶BBEL-7402细胞
- 梯度微孔板技术在ABO血型检测中的应用研究
- 目的探讨OLMPUS PK7300全自动血型仪梯度微孔板方法检测献血者ABO血型,通过对比试验分析使用不同稀释比例试剂对梯度微孔板技术ABO血型正定型、反定型结果的影响,为献血者ABO血型检测中应用梯度微孔板技术提供理论...
- 朱海峰颜鑫陈剑峰李文超
- 11家血站实验室抗-TP酶联免疫吸附试验临界值的评价被引量：12
- 2017年
- 目的评价11家血站实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测无偿献血者梅毒螺旋体抗体(抗-TP)过程中,血站实验室采用的工作临界值(CO)的适宜性及合理性。方法 11家血站实验室采用8种ELISA试剂中的1/2种均对1 372例标本进行抗-TP检测。对结果有差异的标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)确证试验,利用确证试验结果明确标本真实血清学状态。对数据进行如下分析:1)分析11家血站实验室采用8种ELISA试剂中的1/2种试剂真阳性检出率、灰区标本确证阳性率;2)分析11家血站实验室抗-TP试验"灰区"设置的合理性,通过绘制ROC曲线确定11家血站实验室采用8种ELISA试剂中的1/2种试剂最佳CO值,比较不同CO值下(最佳CO值、厂商推荐CO值、血站实验室因采用灰区而设置的工作CO值)灵敏度与特异性的变化。结果 1)11家血站实验室采用8种ELISA试剂中的1/2种试剂对1 372例标本进行检测,真阳性检出率均为100%(489/489)、真阳性标本无1例漏检;9家设有灰区的血站实验室共检出136例灰区标本,经确证均为阴性,即灰区标本确证阳性率均为0。2)11家血站实验室采用8种ELISA试剂中的1/2种试剂ROC曲线确定的最佳CO值均大于厂商推荐CO值,设置灰区的9家血站实验室采用工作CO值灵敏度提高有限、特异性有所下降。结论 11家血站实验室使用厂商推荐CO值就可获得较高灵敏度、满足血液筛查的要求,实验结果支持血站实验室取消灰区设置。
- 高楠王瑞常乐黄力勤胡京辉甄伟葛红卫王露楠王鹏潘彤韩卫李维王芳臧亮朱海峰朱卫清朱绍汶曾劲峰释艳华
- 关键词：酶联免疫吸附试验梅毒螺旋体抗体灰区
- 230例健康献血者卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染的血清学检测被引量：2
- 2004年
- 张心声齐眉朱海峰司桂玲赵蔚明
- 关键词：ELISA
- HLA新等位基因A*24:191序列及其MHC编码蛋白分子三维结构模拟预测分析
- 2022年
- 目的鉴定分析人类白细胞抗原(human leukocyte antigens,HLA)新等位基因A*24:191序列,并对其MHC蛋白分子三维结构及其氨基酸残基改变在空间结构中的可能影响进行模拟预测分析。方法应用Luminex及PCR-SBT进行序列鉴定。应用Phyre2及RCSB PDB分析软件,对其MHC蛋白分子三维结构进行模拟预测分析。Histocheck对比分析与A*24常见等位基因间差异。结果相较A*24:02序列,新等位基因A*24:191在256、265、270位发生G>C、G>C、A>T改变。MHC分子三维结构预测分析显示,相较HLA-A*24:02,A*24:191第62位氨基酸残基由A*24:02的酸性谷氨酸(Glu)改变为中性谷氨酰胺(Gln),(Risler’s score,R=2),其残基侧链伸展方向都为自α螺旋向外指向groove凹槽;65位由向α螺旋内伸展小分子中性甘氨酸(Gly)改变为向螺旋上外伸展的长链碱性精氨酸(Arg)(R=52);66位由长链碱性赖氨酸(Lys)改变为中性天冬酰胺(Asn)(R=31),伸展方向都为自α螺旋指向groove凹槽。以上残基均位于构成抗原肽结合凹槽侧壁α螺旋上。其总相异性值DSS Score=3.85。从蛋白分子表面结构模拟图像上,可以清楚看到氨基酸残基改变致α螺旋表面结构形状发生明显改变。结论分析预测以上氨基酸残基性质、大小及构型的改变,将可能改变其多肽结合功能,并影响其与TCR及抗体的结合特性。
- 聂向民朱传福朱海峰刘艳邵静茹乔文本
- 关键词：人类白细胞抗原PCR-SBT
- 人疱疹病毒8型感染的间接ELISA检测方法的建立
- 2008年
- 目的建立人疱疹病毒8型(HHV-8)感染的间接ELISA检测方法,并初步探讨其应用价值。方法利用PCR技术获得HHV-8 ORF73C基因,插入到原核表达载体pGEX-6P-1中,在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达;以纯化的GST-ORF73C融合蛋白为包被抗原,利用方阵滴定法确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,并通过阻断试验、交叉试验、特异性试验、重复性试验及与Chou等建立的K8.1合成多肽-ELISA检测方法进行试验比较等评价其效果。结果SDS-PAGE及Western-blot检测结果显示,目的基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,且表达产物能被KS阳性血清[HIV(+)/KS(+)血清]特异性识别;方阵滴定试验显示:包被抗原的最佳浓度为1.5μg/mL,血清抗体的最佳稀释度为1∶80;阻断试验、交叉试验、特异性试验、重复性试验等表明该方法特异性强、重复性好;对86份HIV(+)/KS(-)血清样品进行检测的结果显示,该方法与Chou等建立的K8.1合成多肽-ELISA检测方法的符合率为98.8%。结论GST-ORF73C-ELISA检测方法具有良好的特异性和重复性,可用于HHV-8感染的血清学检测及流行病学调查。
- 仇岩朱海峰张心声
- 关键词：人疱疹病毒8型酶联免疫吸附测定
- 血站实验室采用不同模式检测HBsAg的性能评价被引量：4
- 2018年
- 目的对6家血站实验室单独使用1种和联合使用2种酶联免疫（ELISA）试剂检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）进行性能评价,为各实验室制定合理的HBsAg筛查策略提供参考依据。方法将来自16家实验室的898份HBsAg初筛反应性标本分别寄送至6家血站实验室,使用2种ELISA试剂检测HBsAg。采用化学发光法和中和试验作为确认方法。分别在各实验室选择1种性能相对优异的试剂作为比较试剂,利用统计学方法分析各实验室单独使用1种试剂和联合使用2种试剂的灵敏度、特异性和符合率。结果 898份HBsAg初筛反应性标本中,剔除16份数据不完整的标本,在余下的882份标本中,确认阳性571份,确认阴性311份。各实验室使用的2种试剂其灵敏度差异较大（P〈0.05）,其中在实验室B、D、E和F中,灵敏度相对优异的试剂其符合率亦更高（P〈0.05）。性能相对优异的试剂单独检测和2种试剂联合检测进行性能比较,各实验室2种检测模式的灵敏度差异无统计学意义（P〉0.05）;实验室C、D和F单一试剂检测的特异性优于2种试剂联合检测（P〈0.05）,其余实验室2种检测模式的特异性差异无统计学意义（P〉0.05）;实验室D和F单一试剂检测的符合率优于2种试剂联合检测（P〈0.05）,其余实验室2种检测模式的符合率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在血站实验室使用ELISA试剂盒进行HBsAg检测,存在单独使用1种试剂的检测性能等同于或优于联合使用2种试剂的情况,是否采用单一试剂代替2种试剂联合检测作为HBsAg的筛查策略,需进行科学的评估和确认。
- 尹丹魏兰张巧琳谢晓艳李维王露楠葛红卫潘彤王芳朱海峰释艳华魏超
- 关键词：性能评价
- HLA新等位基因B*46:30序列分析及其编码MHC蛋白分子结构预测与表型鉴定
- 2023年
- 目的:鉴定分析HLA新等位基因B*46:30序列,对其MHC蛋白分子三级结构及氨基酸残基改变对蛋白结构的可能影响进行模拟分析,并对其血清学表型进行鉴定。方法:应用Luminex SSOP流式、PCR-SBT及单等位基因特异性测序对HLA序列进行序列鉴定。应用SWISS-MODEL及RCSB PDB分析软件,对HLA序列蛋白分子三维结构进行模拟分析。HistoCheck、FATCAT对比分析蛋白分子间差异。使用Terasaki分型板进行血清型表型鉴定。结果:相较于B*46:01,新等位基因B*46:30第559、560位发生C->G、T->A替代。MHC分子结构预测分析表明,B*46:30第163位氨基酸残基由疏水性脂肪族亮氨酸Leu→B*46:30带负电荷的酸性谷氨酸Glu,R值为32。该氨基酸变异位置位于α2结构域构成抗原多肽结合凹槽侧壁的α螺旋顶端,总差异值DSS Score=1.32,均方根偏差RMSD=0.59?,血清型表型检测为B46强阳性。结论:HLA新等位基因序列被WHO HLA命名委员会正式命名为B*46:30,分析预测此编码氨基酸残基改变将可能影响其抗原多肽结合功能,并影响其与TCR及抗体的结合特性,血清型表型鉴定为B46。
- 聂向民朱传福朱海峰张毅乔文本刘艳邵静茹
- 关键词：人类白细胞抗原测序分型
- 无偿献血者乙型肝炎标志物检测分析
- 2010年
- 张妍朱永宝朱海峰曹磊陈富强
- 关键词：乙型肝炎标志物血液筛查乙肝五项指标ROCHE核酸检测技术化学发光技术
- 两种采血模式核酸检测结果分析被引量：2
- 2013年
- 目的对全血和单采血小板捐献人群进行病毒核酸检测,探讨不同献血人群的相对安全性。方法采用Roche cobas s201血液筛查系统对2010年6月—2012年6月ELISA检测双试剂均无反应性及仅1种试剂有反应的全血标本和单采血小板标本进行HBV、HCV和HIV三项联合筛查,对两种人群的核酸检测阳性率进行比较分析,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果共进行核酸检测标本163 621例,检出阳性标本110例,阳性检出率为0.067%。全血标本和单采血小板标本中阳性率分别为0.067%和0.065%,差异无统计学意义(χ2=0.015,P>0.05)。结论对全血和单采血小板捐献人群均应进行病毒核酸检测。
- 朱海峰朱永宝张妍唐建华曹丹李文超颜鑫刘虹
- 关键词：核酸检测全血单采血小板血液筛查
