李文龙
- 作品数：31 被引量：90H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学一般工业技术更多>>
- Smad2基因敲除小鼠冷冻胚胎库的建立
- 2008年
- 目的建立Smad2基因敲除小鼠胚胎库。方法利用OPS法对Smad2基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻保存,并比较不同杂交组合小鼠的超数排卵数、解冻胚胎的复苏率及发育率。结果两组不同杂交组合(Smad2+/-♂×Smad2+/-♀和Smad2+/-♂×Smad2+/+♀)小鼠平均超排卵数分别为14.13枚和24.60枚;复苏率分别为90.16%和91.67%;囊胚发育率分别为73.08%和77.05%。这些结果表明Smad2基因敲除杂合子母鼠的超排数量明显低于野生型母鼠的超排数量,而二者胚胎解冻后的复苏率和囊胚发育率没有显著差异。因此我们主要通过对野生型小鼠超数排卵,然后与Smad2基因敲除杂合子雄鼠交配的方法获取胚胎,进行玻璃化冷冻保存,现已冻存胚胎1256枚。结论成功建立了Smad2基因敲除小鼠胚胎库。
- 杨秀兰李慕江其辉尚士臣时彦胜孙岩松苏玉虹李文龙
- 关键词：SMAD2基因敲除小鼠胚胎玻璃化冷冻
- Smad3基因剔除小鼠的血液生理生化指标检测——70日龄Smad3小鼠被引量：1
- 2002年
- 对成年 70日龄的Smad3基因剔除小鼠血液生理生化指标进行检测 ,结果只有少数指标雌雄之间差异显著 ,纯合型 (- - )小鼠的白细胞 (WBC)和血小板高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、CK、UA、GOT、TP、ALP、LDH L、MG、CA差异显著 ;纯合型 (- - )的CK、UA、TG、ALP、LDH L指标高于野生型的小鼠 ;GLU、P、MG、CA指标低。
- 战大伟王冬平栾蓉晖孙岩松李吉庆李文龙时彦胜李桂军李爱兰
- 关键词：血液学血液生化
- EWS蛋白质抑制核因子κB的转录活性
- 2010年
- 目的:研究EWS蛋白质是否参与核因子κB(NF-κB)信号通路,以及EWS蛋白质对NF-κB转录活性的影响。方法:在真核细胞中表达Flag-EWS,利用Western印迹检测其表达;通过双萤光素酶光报告系统,研究EWS蛋白质对NF-κB转录活性的影响及其发挥作用的分子水平。结果:Western印迹检测到相对分子质量为95×103的Flag-EWS能够在真核细胞中正确表达,过表达EWS蛋白质能够抑制TNFα、IL-1β及poly(I:C)激活的NF-κB转录活性;EWS蛋白质能够抑制由过表达HA-TRAF2或HA-p65激活的NF-κB转录活性,其抑制NF-κB转录活性发生在p65转录因子水平。结论:过表达EWS能够抑制多种刺激激活的NF-κB转录活性,这种抑制作用发生在p65转录因子水平。
- 王晨辉魏传宇李文龙穆蕊方迪峰陈亮李慧艳巩伟丽周涛靳宝锋李爱玲
- 关键词：核因子ΚB转录活性
- 小鼠Uncv基因克隆及真核表达被引量：3
- 2012年
- 目的克隆小鼠的Uncv基因并在真核细胞表达。方法采用RT-PCR方法扩增小鼠皮肤组织中Uncv基因编码区,以真核表达质粒pcDNA 3.1-Flag为载体,构建Uncv真核表达质粒,将重组载体转染Hela细胞并用Western blot法检测基因表达。结果构建Uncv基因真核表达载体pcDNA 3.1-Flag/Uncv,重组质粒在Hela细胞中有效表达约95×103的融合蛋白。结论成功构建真核表达载体pcDNA 3.1-Flag/Uncv,并且在真核细胞中有效表达,为研究Uncv基因生物学功能奠定基础。
- 徐嫄徐嫄刘冰李文龙胡仲明曾林
- 关键词：克隆真核表达毛囊
- 犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因片段的克隆和表达被引量：6
- 2002年
- 目的 构建pMal N重组表达载体 ,转化E .coliDH5α ,诱导表达犬瘟热病毒 (CDV)重组核衣壳 (N)蛋白。方法 采用RT PCR技术 ,从CDVRNA中扩增编码N蛋白的基因片段 ,通过连接反应 ,构建重组克隆载体和重组表达载体 ,转化感受态。E .coliDH5α细胞。通过IPTG诱导表达CDV重组N蛋白。结果 扩增出约 1 7kbCDV全长的主要结构蛋白N蛋白基因 ,通过PCR获得 5 36bpN蛋白基因片段。将N蛋白基因片段克隆入原核表达载体pMal C2 ,表达产物麦芽糖结合蛋白 (MAP)与N蛋白的融合蛋白的相对分子质量约 6 0× 10 3,与预期大小一致。结论 构建的pMal N重组载体所表达的CDVN蛋白为进一步研究CDV的特异。
- 杨敬范薇隋丽华李俊梅刘永梅李文龙陈振文
- 关键词：犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因片段克隆
- 遗传性白内障动物模型的研究进展被引量：8
- 2007年
- 白内障是严重影响公众健康的重大疾病。人群中,大部分遗传性白内障是外显率较高的常染色体显性遗传,但也有X连锁和常染色体隐性遗传存在。随着分子生物学技术的发展,出现了许多白内障遗传动物模型,这些模型有助于揭示白内障的发病机制,为晶状体的发育和生理学研究提供新的见解,还有助于进一步了解遗传、环境和营养等因素对晶状体的作用方式,并为白内障遗传病的诊断和治疗提供依据。文章综述了遗传性白内障动物模型的相关基因、突变形式及其研究进展。
- 杨秀兰苏玉虹李文龙
- 关键词：白内障动物模型
- 过表达小鼠UNCV蛋白质对HeLa细胞凋亡的影响
- 2013年
- 目的研究小鼠UNCV蛋白质对HeLa细胞凋亡的影响。方法将BALB/c小鼠Uncv基因重组质粒转染HeLa细胞,筛选出稳定过表达UNCV蛋白质的HeLa细胞株。通过细胞计数法和流式细胞术,检测过表达UNCV蛋白质对血清饥饿和阿霉素诱导的HeLa细胞凋亡的影响。结果获得稳定正确过表达UNCV蛋白质的HeLa细胞株。细胞计数和流式细胞术结果显示过表达UNCV蛋白质对血清饥饿诱导的HeLa细胞凋亡有抑制作用,对于阿霉素诱导的HeLa细胞凋亡没有显著影响。结论过表达UNCV蛋白质对血清饥饿诱导的HeLa细胞凋亡有抑制作用。
- 刘冰徐嫄赵爽王冬平杨蕾蕾李微尚世臣张广州李文龙曾林
- 关键词：细胞凋亡血清饥饿阿霉素HELA细胞
- Smad3基因剔除导致小鼠发生骨质疏松被引量：3
- 2006年
- 目的和方法为了研究Smad3基因的功能,用基因打靶的方法建立了Smad3基因剔除小鼠。通过分析小鼠的表型,发现Smad3基因剔除小鼠主要表现为骨关节炎和粘膜免疫缺陷,我们进一步分析了小鼠骨骼方面的表型。取出生后4 d和4周的Smad3基因剔除和野生型小鼠的膝关节,脱钙,石蜡包埋,切片,进行H&E染色观察它们的微观结构。发现在4 d时,基因剔除小鼠和野生型小鼠相比,胫骨短小。在4周时可以观察到基因剔除小鼠骨小梁稀疏,骨小梁体积变小。另外,还发现在Smad3基因剔除小鼠胫骨的皮质骨宽度明显小于野生型小鼠。通过X射线和测量6周龄小鼠股骨的骨密度和骨矿含量。结果结果显示Smad3基因剔除小鼠的骨密度和骨矿含量均低于野生型小鼠。这些结果表明Smad3基因剔除导致小鼠发生骨质疏松。利用原位杂交检测成骨细胞的标志分子-骨钙素、碱性磷酸酶和骨桥素基因表达降低,提示成骨细胞减少。用RT-PCR检测到核结合因子2、骨涎蛋白、骨钙素I、型胶原在基因剔除小鼠表达降低,而胸腺中的IFN-γ表达降低。用TRAP染色来检测出生后8 d的Smad3基因剔除小鼠骨切片中破骨细胞,并且用Osteometrics公司的骨计量软件分析骨切片,结果表明基因剔除小鼠的NOc/TAr(破骨细胞数目/单位骨小梁面积)、OCs/Bs(破骨细胞表面积/骨表面积)和NOc/BPm(破骨细胞数目/单位骨面积)等指标均高于野生型小鼠。为了进一步验证基因剔除小鼠的破骨细胞的分化受到影响,分离Smad3和野生型小鼠的骨髓细胞,向破骨细胞的方向进行诱导分化,TRAP染色结果表明基因剔除小鼠的骨髓细胞分化成破骨细胞数目显著多于野生型小鼠。结论Smad3基因剔除引起成骨细胞数量减少,破骨细胞数目增多,从而导致小鼠骨小梁稀疏、骨密度降低,引起骨质疏松。
- 李文龙谭晓红张继帅杨蕾蕾孙岩松杨晓
- 关键词：SMAD3成骨细胞破骨细胞骨质疏松
- 比格犬群哺乳期生长发育指标的动态测定被引量：1
- 2004年
- 目的 测试本中心比格犬群哺乳期的生物学特性 ,为比格犬封闭群的建立奠定基础 ,为科学实验提供参考数据。方法 随机对雌、雄各 30只仔犬进行从出生到 6 2d的体重、体长、体高、尾长、胸围、腹围发育指标测定。结果 测定后经统计学分析和制图 ,发现该群仔犬 30d前生长均匀一致 ,30d后雄性仔犬生长速度略高于雌犬 ;雌、雄仔犬的各项生长指标呈并行状态 ,同步生长发育。
- 吴娜王冬平吴晓燕战大伟李文龙尚世臣李桂军陈振文
- 关键词：比格犬哺乳期生长发育生物学特性
- 比格犬生长期血液生理生化指标的测定被引量：5
- 2006年
- 目的本中心为最早引入比格犬(Beagle)并生产繁殖获得成功的国内大型比格犬生产基地,十余年来未引入外源血。为了获得该群体的基础生物学数据,本实验对4、5、6月龄比格犬雌雄各30只进行生理生化指标测试,以期建立国内首家封闭群比格犬生产群,为比格犬的实际应用提供基本的生物学参考数据。方法用日本光电MEK-5126K血球计数仪及配套试剂盒、显微镜镜检计数以及荷兰半自动生化分析仪-VITALAB检测180只比格犬的血液生理生化值。结果血液生理生化指标同月龄雌雄间比较部分指标差异显著,但并不持续;不同月龄间比较,生理指标56、月龄之间多数差异无显著性,而4月龄的指标于5、6月之间比较,数据的高低不统一;生化指标主要是4月龄与56、月龄之间有一些差异,波动范围并不大,数据略高于文献报道。5月龄与6月龄之间无明显差异。结论该比格犬群除个别血液指标雌雄之间、不同月龄之间存在一定的差异外,绝大部分指标差异不显著,反映该群体血液生理学的特性已处于相对稳定状态。
- 隋丽华吴娜王冬平李桂军吴晓燕范薇李文龙洪宝庆战大伟尚世臣陈振文
- 关键词：血液生理血液生化
