李火根 作品数:125 被引量:806 H指数:17 供职机构: 南京林业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
对林木育种学教学实习的几点思考 被引量:3 2012年 通过对林木育种学教学实习的实践,结合林木自身的生物学特性和单位实习基地的建设情况,针对实习内容、实习地点的选择、实习的组织形式、实习的考核方式和实习费用的来源等方面具体探讨林木育种学教学实习的实践与创新,使学生通过教学实习,能灵活掌握并在实践中综合运用林木遗传育种的理论知识、育种技术和育种方法,真正实现教学实习的检验教学成果、促进能力提高、拓宽知识范围的目的。 边黎明 施季森 李火根关键词:林木育种学 教学实习 广西马尾松第2代育种群体的组建 被引量:24 2017年 【目的】基于广西马尾松第1代育种群体的8片20年生及以上的子代测定林测定试验,在综合评价育种目标性状与遗传多样性的基础上,选择建立马尾松第2代育种群体,为马尾松高世代育种研究提供重要材料。【方法】采用SAS分析软件依据线性模型对子代生长量数据进行统计分析,并据此进行第2代优树选择。采用SSR分子标记对第2代优树进行遗传多样性分析、亲本分析及遗传距离估算,根据优树间遗传距离对第2代育种群体进行结构划分。【结果】在参试的子代测定林中,参试家系间在生长性状上均达到极显著差异;多数子代林的材积指标家系遗传力处于中等以上水平(h^2≥0.2),适于开展优良家系选择。基于此,采用配合选择与单株选择相结合的方法选择出第2代育种群体材料163株,平均遗传增益为21.95%。采用16对SSR引物对该第2代育种材料进行遗传多样性研究,16个位点共检测到45个等位变异。每个位点平均观察等位基因数(NA)为2.7,多态率为100%;平均有效等位基因数(Ne)为1.54;Shannon多样性指数(I)平均为0.49;平均观测杂合度(H_o)为0.32。采用Coancestry Version 1.0软件计算出第2代育种群体的平均共祖系数为0.042,育种群体状态数为11.9;根据16对SSR引物的扩增结果,采用CERVUS2.0软件对构建的第2代育种群体材料进行父本分析,发现在包含163个优树的第2代群体中,有57个个体在置信度95%的情况下可以确定父本,另有102个个体在置信度80%的情况下能够确定父本。为了有效避免高世代杂交育种过程中发生近交,以遗传距离为指标对第2代育种群体材料进行聚类,根据距离聚类结果将163个体划分为10个亚系,编号为桂GC2-A—桂GC2-J。在建立马尾松第2代种子园时,拟采用以下策略:从每个亚系中选择一定数量的最佳无性系作为精选群体建园;在进行下一代杂交育种时,进行亚系间的交配,使育种群体� 冯源恒 李火根 杨章旗 黄永利 罗群凤 张远关键词:马尾松 育种群体 SSR 北美鹅掌楸LtAGO1基因的克隆、表达及其启动子分析 被引量:1 2022年 为深入探究叶原基分化成叶器官的形态建成机制,该研究以北美鹅掌楸为材料,采用RT-PCR和RACE克隆技术获得LtAGO1的cDNA全长和启动子序列并预测其功能,通过RT-qPCR分析LtAGO1在鹅掌楸属中的组织表达模式。同时,经抗性筛选和DNA鉴定获得ProAGO1∷GUS的转基因拟南芥株系,并进一步对T2代阳性植株进行表型和GUS组织化学染色分析。结果表明:(1)LtAGO1基因包含3300 bp的开放阅读框,编码1100个氨基酸,分子量为122.14 kD,理论等电点(pI)为9.36。(2)氨基酸序列分析显示LtAGO1含Gly-rich-AGO1和Piwi两个典型的AGO基因结构域,同源性分析显示LtAGO1蛋白与沉水樟AGO1蛋白(RWR84608.1)亲缘关系最近。(3)组织表达特异性分析显示LtAGO1在北美鹅掌楸不同组织间的相对表达量为雄蕊>花芽>花瓣>花萼>叶片>雌蕊>叶芽>茎,LtAGO1在北美鹅掌楸叶片不同发育阶段的相对表达量为叶芽萌动期>幼叶期>衰老期>成熟期,AGO1在鹅掌楸属叶缘的表达量高于叶片的其他部位且北美鹅掌楸叶凹陷部位的表达量高于叶尖部位。(4)获得叶中-侧轴向和基-顶轴向的极性缺失、叶缘锯齿、重瓣花型的转化株系,GUS组织染色显示ProAGO1启动GUS基因在叶芽顶端稳定表达且在新分化的叶柄上表达较强,在成熟期的茎、叶、花和果的维管束中均特异表达。LtAGO1启动子的GUS活性强度为叶顶芽>花>维管束,这与实时定量PCR结果相一致。综上认为,LtAGO1基因在顶端分生组织特异表达且受到多种途径的调控而参与到叶和花器官的发育进程中。该研究结果为进一步了解北美鹅掌楸LtAGO1基因的基本功能及其调控叶形发育机制提供了理论基础。 魏灵敏 温少莹 马际凯 夏辉 李嘉昱 吴栩佳 李火根关键词:北美鹅掌楸 GUS 鹅掌楸种间杂交组合叶芽发育时期基因表达的差异 被引量:1 2011年 以鹅掌楸属植物正反交2个组合为材料,利用DDRT-PCR技术,研究其在不同生长发育阶段基因表达的差异。结果表明:2组合总条带表达数都是在生长旺盛期最大,休眠期次之,萌动期最小。杂种鹅掌楸H×M和BM×J的双亲共沉默型(Ⅰ)、杂种特异表达型(Ⅱ)在不同生长时期均存在极显著差异。而单亲表达一致型(Ⅲ)、单亲表达沉默型(Ⅳ)在不同生长时期均无显著差异。杂种鹅掌楸H×M和BM×J不同基因差异表达模型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)在萌动期、生长旺盛期、休眠期都存在显著差异。 李帅 徐进 李火根 施季森关键词:鹅掌楸属 生长发育期 基因差异表达 北美鹅掌楸LtCHS基因的克隆及生物信息学与组织表达特征分析 被引量:5 2015年 【目的】鹅掌楸属花色种间差异较大,是研究木本植物花色形成与调控机制的较理想材料。查尔酮合成酶基因(CHS)是黄酮类化合物生物合成途径中的关键基因,与植物花色形成密切相关,同时又是研究科以下系统发育的理想基因,种间进化差异较大,因此CHS基因用于研究鹅掌楸属花色差异形成机制有较强的可行性。本研究克隆北美鹅掌楸的查尔酮合成酶基因,并对其进行生物信息学及组织表达分析,以期为鹅掌楸属树种花色的形成和调控机制研究提供参考。【方法】以北美鹅掌楸的花芽为材料,采用同源克隆和RACE技术克隆查尔酮合成酶基因(Lt CHS),并进一步扩增该基因的基因组序列。对该基因进行生物信息学分析。采用半定量RT-PCR方法分析Lt CHS基因在鹅掌楸属种间及不同组织中的表达水平。【结果】获得2个查尔酮合成酶基因:Lt CHS1与Lt CHS2。Lt CHS1基因的c DNA全长875 bp,包含1个702 bp的ORF,其基因组DNA(g DNA)只含有1个外显子,没有内含子,编码233个氨基酸,蛋白质分子量为71.88 k Da,等电点为5.09。Lt CHS2基因的c DNA全长1 457 bp,包括1个1 185 bp的ORF,其g DNA含有2个外显子和1个内含子,编码394个氨基酸,蛋白质分子量为120.0 k Da,等电点为4.97。2个基因的组织表达分析结果显示,Lt CHS基因不仅在同一树种不同组织间存在差异,而且在种间也存在表达差异。Lt CHS1基因仅在北美鹅掌楸中表达,Lt CHS2基因在鹅掌楸中表达,在杂交鹅掌楸中二者均有表达。【结论】获得的2个Lt CHS基因属于同一基因家族,但执行不同功能。二者在种间表达存在差异可能与鹅掌楸属花色形成有关。结合鹅掌楸属种间花色特征,可初步推测,Lt CHS1基因与Lt CHS2基因可能分别调控不同类型花青素的合成。 罗群凤 胥猛 冯源恒 徐嘉娟 李火根关键词:北美鹅掌楸 查尔酮合成酶 基因克隆 半定量RT-PCR 杂交鹅掌楸良种选育与种苗繁育 被引量:18 2009年 从亲本选配、交配设计与杂交技术、杂种子代测定及优良遗传型选择、杂交鹅掌楸的分子鉴定等方面概括了杂交鹅掌楸四十余年来在良种选育领域的研究进展。总结了包括杂交制种、实生苗培育、无性繁育等种苗繁育常用的技术与方法,并对今后杂交鹅掌楸良种选育与繁育的工作以及推广前景进行了展望。 李火根 施季森关键词:杂交鹅掌楸 良种 杂交 选育 繁殖 杨树新无性系冠层特性与生长关系研究 被引量:42 1999年 对 5年生黑杨无性系的冠层特性与材积生长之相关性进行了研究。材积生长与全树总叶面积TLA、树冠表面积TCA和冠型率CSR呈极显著正相关而与叶面积指数LAI、冠层密度CLD呈负相关。冠层内上、中层的叶面积对材积生长起了决定性作用 ,下层叶面积与材积生长关系不大。水平方向 ,冠层内、外部叶面积特性对材积生长贡献较大 ,而中部叶面积特性贡献小。阐明了杨树生长的理想冠层特性。 李火根 黄敏仁关键词:杨树 冠层特性 通径分析 3种冠型分维数求算法在杨树无性系中的应用 被引量:5 2005年 对盒维数法、双表面积法及贝氏法等3种树冠分维数估算方法在杨树无性系上的应用结果进行了比较。结果表明:双表面积法操作复杂且工作量大;贝氏法虽然操作简单但是精度太低;盒维数法具有操作简便、快速、重演性高、能充分反映树冠内叶面积的空间分布模式等优点,但目前仅能估算2维平面的分维数。相对而言,盒维数法应该是求算树冠分维数最理想的方法。树冠的分维数与树冠形状、树冠大小相关性不大,而与树冠内叶面积的多少密切相关,一般地,树冠内叶面积越多,树冠的分维数越大。 李火根 黄敏仁 王明庥关键词:分维数 杨树 伯乐树组织培养快繁技术研究 被引量:10 2009年 [目的]筛选伯乐树的最佳芽诱导、增殖生根培养基及炼苗基质。[方法]以伯乐树种子无菌萌发的胚芽为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的BA、IBA和NAA进行胚芽诱导培养;以不同浓度的琼脂、蔗糖、NAA、BA为因子作正交设计试验,进行继代增殖培养,并附加不同浓度的IBA和NAA进行生根培养。[结果]伯乐树芽诱导最佳培养基为MS+BA 1.0 mg/L+ NAA0.1 mg/L,出芽率最高,达71.34%,芽体高度为5.30 cm;最佳增殖培养基为MS+BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+琼脂1.0%+蔗糖2.5%,胚芽增殖系数达3.6,芽体高度为3.1 cm;最适宜的生根培养基为MS+IBA 3.0mg/L+琼脂0.8%+蔗糖3.0%,生根率达到89%;伯乐树试管苗的最适炼苗基质为蛭石25%+珍珠25%+河沙50%,移栽成活率可达65%。[结论]建立了伯乐树组织培养快速繁殖技术体系。 欧阳献 李火根关键词:伯乐树 快速繁殖 利用SSR分子标记研究鹅掌楸种源及家系间遗传多样性 以鹅掌楸5个种源,每种源5个家系150个子代为材料,利用SSR分子标记研究了鹅掌楸种源及家系间遗传多样性。主要研究结果如下:总体上,14对SSR引物在试验群体中共检测到74个等位基因,平均等位基因数(A)5.2857,有... 李康琴 李火根关键词:鹅掌楸 SSR 种源 家系 文献传递