李穗
- 作品数：8 被引量：40H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自身免疫性内耳病的药物治疗被引量：7
- 2004年
- 内耳免疫损伤可引起自身免疫性内耳病 (autoimmuneinnereardisease ,AIED) ,本文就治疗AIED的各种药物以及给药方式进行了综述 ,以期为AIED的治疗和研究提供帮助。
- 李穗龚树生
- 关键词：自身免疫性内耳病药物治疗给药方式
- 内耳免疫反应中细胞凋亡的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨内耳免疫反应过程是否引起细胞凋亡以及Fas和FasL、Bcl 2和Bax的表达情况。方法 选用雌性白色豚鼠 16只 ,随机分为实验组和对照组各 8只 ,以钥孔血蓝蛋白全身免疫后 ,实验组以相同抗原进行内耳免疫 ,对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水 ,在内耳免疫 7d后处死动物 ,取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片。通过电镜和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术 (terminal deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling ,TUNEL)检测内耳凋亡细胞 ,免疫组化检测内耳Fas和FasL以及Bcl 2和Bax的表达。结果 透射电镜观察发现实验组术后7d内耳外毛细胞、血管纹细胞及螺旋神经节细胞都出现了凋亡细胞的特征性改变 ,而对照组未发现具有上述特征的细胞。实验组内耳Corti器毛细胞 ,血管纹的缘细胞和螺旋神经节细胞存在TUNEL染色阳性细胞 ,TUNEL染色阳性细胞具有凋亡细胞的典型形态学特征 ,对照组内耳的任何结构中都没发现TUNEL染色阳性细胞。免疫组化染色实验组Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带Fas和FasL蛋白表达阳性 ,而对照组只有螺旋神经节细胞和血管纹有较弱的Fas蛋白表达 ,FasL蛋白表达阴性。实验组Corti器、螺旋神经节细胞、侧壁Bcl 2蛋白表达阴性 ,对照组的Corti器。
- 许丽娟龚树生汪吉宝黄翔宋鹏尹时华陈沛李穗
- 关键词：内耳螺旋神经节细胞CORTI器TUNEL血管纹血蓝蛋白
- 重组小鼠质粒pEGFP-NGB的构建和在培养神经胶质细胞中表达的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的:构建重组小鼠质粒pEGFP-NGB并研究其在培养神经胶质细胞中的表达。方法:采用RT-PCR从小鼠脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-NGB表达载体。采用GeneJamer转染试剂和pEGFP-NGB重组子混合后转染至培养神经胶质细胞中,观察NGB在培养神经胶质细胞中mRNA以及蛋白表达。结果:阳性克隆测序结果显示所测序列与Genbank序列一致。RT-PCR和Western-blot结果表明转染重组质粒pEGFP-NGB培养神经胶质细胞NGBmRNA和蛋白均有较高的表达。荧光显微镜下观察发现,培养神经胶质细胞中有较多绿色荧光蛋白表达。结论:(1)成功构建pEGFP-NGB重组子;(2)构建的pEGFP-NGB重组子可在培养神经胶质细胞中表达。
- 尹时华龚树生鄢开胜李穗陈沛陈广理
- 关键词：脑红蛋白转染神经胶质细胞
- 水杨酸钠对小鼠下丘核神经元GABAα、NR1表达及听反应的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨水杨酸钠给药对小鼠下丘核神经元GABAα、NR1表达及听反应的影响。方法:实验将36只成年健康昆明小鼠分三组(n=12):A组:对照组;B组:水杨酸钠给药组(450mg.kg-1.d-1);C组:水杨酸钠(450mg.kg-1.d-1)+利多卡因(10mg.kg-1.d-1)组。各组均经腹腔注射给药,A组给以同等剂量的生理盐水,所有动物自由饮食。给药15 d后进行检测。采用RT-PCR技术检测小鼠下丘核区GABAα、NR1mRNA的表达;采用细胞外电生理记录技术研究下丘核区神经元在水杨酸钠给药后强度-发放率函数、强度-潜伏期函数和频率调谐曲线的变化。结果:①水杨酸钠组的下丘核区GABAαmRNA表达较对照组明显降低(P<0.05);水杨酸钠+利多卡因组与对照组比较无显著性差异(P>0.05);水杨酸钠组NR1mRNA表达较对照组明显升高(P<0.01),水杨酸钠+利多卡因组与对照组比较有显著性差异(P<0.05);②水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变;③水杨酸钠+利多卡因组发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变例数显著减少(P<0.05,P<0.01)。结论:①水杨酸钠引起实验小鼠下丘核GABAαmRNA表达下调,同时又使小鼠下丘核NR1mRNA表达增高;②水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变③利多卡因有逆转水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变和神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变的作用。
- 尹时华龚树生鄢开胜李穗陈沛陈广理
- 关键词：水杨酸钠小鼠听反应
- Neuroglobin 基因体内转染对水杨酸钠给药后小鼠下丘核神经元听反应的影响(英文)被引量：6
- 2005年
- 实验以48只成年健康昆明小鼠为实验对象,研究GeneJamer转染试剂介导的neuroglobin(NGB)基因体内转染对水杨酸钠给药后小鼠下丘核区听反应的影响。实验分4组,每组12只。A1组:对照组1(阴性对照,将GeneJamer转染试剂6μl和pEGFP-C12μg混合后注入下丘核脑区);A2组:对照组2[阳性对照,将GeneJamer转染试剂(6μl)和pEGFP-NGB(质粒载体pEGFP-C1与NGB基因全编码序列构建的重组子2μg)混合后注入下丘核脑区];B组:水杨酸钠给药组(450mg/kg·d-1)+pEGFP-C1;C组:水杨酸钠(450mg/kg.d-1)+pEGFP-NGB组。以直接注射法将GeneJamer转染试剂和重组质粒pEGFP-NGB混合后注入小鼠下丘核区。采用RT-PCR和Westernblot技术检测小鼠下丘核区NGBmRNA和蛋白的表达;采用细胞外记录技术,研究小鼠下丘核区神经元在水杨酸钠给药后转染重组质粒pEGFP-NGB对强度-发放率函数(刺激声强与实验鼠下丘核区神经元在接受声刺激所产生的电发放的关系曲线)、强度-潜伏期函数(刺激声强与实验鼠下丘核区神经元在接受声刺激至产生电发放潜伏期之间的关系曲线)和频率调谐曲线(实验鼠下丘核区神经元在各个频率纯音刺激下起反应的阈值绘制的曲线)的影响。实验观察到:(1)经GeneJamer转染试剂介导NGB基因可有效地转染小鼠下丘核区脑组织并得到表达。(2)水杨酸钠给药后神经元的强度-发放率函数曲线升高。对照组A1、A2各项指标进行比较均无统计学意义。对照组A1、A2和水杨酸钠+pEGFP-NGB组神经元的强度-发放率函数以非单调型(随刺激强度增加时,发放率表现为先降后升呈“V”形或“U”形)为主,分别占74.6%、72.2%和59.3%,水杨酸钠给药组以不规则型强度-发放率函数为主,占47%,与对照组A1、A2和水杨酸钠+pEGFP-NGB组比较,有显著性差异(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。(3)水杨酸钠给药后神经元的强度-潜伏期函数曲线降低。对照组A1、A2各项指标进行比较均无统
- 尹时华龚树生鄢开胜李穗陈沛陈广理
- 关键词：水杨酸钠基因治疗法
- 水杨酸钠对新生小鼠下丘核区神经干细胞分化的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 在体外培养新生小鼠下丘核区NSCs的基础上 ,研究水杨酸钠对NSCs分化的影响。方法 分离、收集新生昆明小鼠下丘核区脑组织 ,体外经EGF和bFGF刺激下培养 ;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向和水杨酸钠给药后分化为神经元的细胞的GABA和Glu蛋白表达。结果 培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、增殖 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤除生长因子后向神经元和胶质细胞分化。干细胞分化的神经元中的GABA和Glu蛋白表达位于细胞质和细胞核。在无水杨酸钠组两类递质阳性着色细胞数没有明显差异 ;水杨酸钠给药后Glu阳性着色细胞数较GABA阳性着色细胞数明显增加 ,吸光度值比较有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 ①小鼠下丘核区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞。②水杨酸钠具有促进NSCs分化为Glu阳性神经元的作用。
- 尹时华龚树生鄢开胜李穗
- 关键词：水杨酸钠新生小鼠NSC神经干细胞分化下丘昆明小鼠
- 儿童气管支气管异物172例临床分析被引量：9
- 2004年
- 目的 总结儿童气管支气管异物发病特点、临床特征和预后影响因素 ,为其诊治提供借鉴。方法 回顾性分析A、B两组 172例儿童气管支气管异物病例的一般情况、临床表现、手术和预后等资料。结果 多发因素为男性、1～ 2岁、农村和春秋季 ;突发吸入征最常见 ( 72 1% ) ;有机异物易发肺气肿 ,无机异物多见肺不张 ;早就诊预后好 ;B组转诊、重复手术和大并发症率减低。结论 儿童气管支气管异物有明显的发病规律和临床特点 ,及时确诊、优良的技术和器械下及时镜检可获较好预后。
- 陈沛龚树生李穗鄢开胜陈广理
- 关键词：儿童气管支气管异物支气管镜检术手术治疗急诊手术
- 水杨酸钠给药对小鼠下丘核NGB mRNA和蛋白表达的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 :观察水杨酸钠给药对小鼠下丘核NGBmRNA和蛋白表达的影响 .方法 :成年健康昆明小鼠 4 8只分为A ,B ,C ,D四组 ,每组 12只 .A为对照组 ,B ,C ,D分别为水杨酸钠 2 0 0 ,30 0和 4 5 0mg/ (kg·d)给药组 .给药 15d后处死检测 ;采用RT PCR检测实验小鼠下丘核区NGBmRNA的表达 ;Western Blot分析NGB蛋白表达 .结果 :①对照组小鼠下丘核区NGBmRNA表达明显高于三个水杨酸钠给药组 (P <0 .0 1) ;三个水杨酸钠给药组NGBmRNA表达比较以D组表达最低 ,B组表达最高 ,C组与D组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) .②Western Blot检测结果显示实验各组均表达相对分子质量约为 170 0 0的NGB蛋白 .A组NGB蛋白表达明显高于其他各组 ;三个水杨酸钠给药组以B组表达最高D组表达最低 .结论 :水杨酸钠可显著降低下丘核神经元NGBmRNA和蛋白表达 ;水杨酸钠给药对下丘核神经元NGBmRNA和蛋白表达与给药剂量有关 .
- 尹时华龚树生鄢开胜李穗陈沛陈广理
- 关键词：水杨酸钠小鼠
