李维东
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素激活GPER-EGFR-ERK通路促进人乳腺癌SKBR-3细胞系增殖被引量：10
- 2012年
- 目的探讨G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)介导雌激素对人乳癌细胞系SKBR-3增殖的影响。方法激光共聚焦显微镜扫描检测钙离子探针标记的细胞内钙离子浓度随时间的变化,CCK-8法观测细胞的增殖生长,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regu-late kinase,p-ERK)的相对表达量。结果 17-β雌二醇(E2)与GPER激动剂(G1)(E2、G1处理组)刺激SKBR-3细胞后,细胞内钙离子浓度从120 s开始迅速升高,细胞增殖与对照组相比显著增加,CCK-8测定的(E2、G1处理组)相对细胞数分别是对照组的(2.08±0.07)倍和(2.00±0.04)倍;流式细胞术检测E2、G1处理组细胞增殖指数(PI)(E2、G1处理组)为(43.12±0.38)%、(42.43±0.52)%,较对照组(29.19±0.29)%明显增加(P<0.05);Western blot检测结果显示E2处理组p-ERK表达量显著高于对照组(P<0.05)。GPER特异性抑制剂G15、EGFR拮抗剂AG1478、ERK拮抗剂U0126均可抑制E2、G1触发的相应变化,PI3K拮抗剂WM则不能。结论雌激素激活GPER-EGFR-ERK通路促进人乳腺癌SKBR-3细胞系增殖。
- 李维东罗浩军李振华余腾华杨光伦涂刚
- 关键词：雌激素GPER增殖
- MCF-7细胞他莫昔芬耐药过程中F-actin细胞骨架的重构促进细胞迁移被引量：4
- 2013年
- 目的研究人乳腺癌细胞MCF-7获得他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药过程中发生的肌动蛋白细胞骨架重构及其对细胞迁移能力的影响,并探讨相关分子机制。方法采用高浓度短时间4-羟基他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen,OHT)冲击法诱导人乳腺癌MCF-7/TAM耐药细胞株(Tam-R)。运用FITC标记的鬼笔环肽染色观察纤维状肌动蛋白(F-actin)动态变化,免疫荧光分析E-钙粘蛋白在野生型MCF-7细胞(MCF-7W)及Tam-R细胞中的表达及分布,pull-down和Westernblot检测小GTP酶Rac1活性,Transwell细胞迁移实验评估F-actin骨架重构对Tam-R细胞迁移能力的影响。结果 MCF-7W细胞中F-actin富集于毗邻细胞膜周边,呈典型鹅卵石形态,E-钙粘蛋白分布与F-actin相似,可在毗邻细胞膜周边形成完整的黏附连接;而Tam-R细胞中F-actin纤维出现板状伪足和应力纤维两种异常形态,细胞外围不能通过E-cadherin与周围细胞形成完整的黏附连接。在Tam-R细胞中,PI3K抑制剂Wortmannin(WM)可抑制OHT引起的F-actin骨架重构、Rac1的活化和细胞迁移(P<0.05),而ERK1/2抑制剂U0126对OHT引起的F-actin骨架重构无明显影响。结论 OHT可能激活PI3K,促进Rac1活化,通过诱导F-actin骨架重构促进Tam-R细胞迁移。
- 李振华涂刚李维东莫志强杨光伦罗浩军柳满然
- 关键词：乳腺癌他莫昔芬肌动蛋白迁移
- 不同雌激素受体亚型在乳腺浸润性导管癌中的分布及意义被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨三种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型(ERα、ERβ及雌激素G蛋白偶联受体estrogen(G protein coupled)receptor,GPER)在乳腺浸润性导管癌中的分布与意义。方法:应用免疫组织化学法检测135例石蜡包埋浸润性导管癌组织中ERα、ERβ及GPER蛋白的表达,用χ2检验等方法分析其与临床病理变量之间及相互间的关联,方差分析比较不同ER表型肿瘤诺丁汉预后指数(Nottingham prognostic index,NPI)的差异。结果:135例浸润性导管癌组织中ERα、ERβ及GPER阳性的比例分别为53.3%、64.7%及74.8%,三种ER亚型的表达无显著关联。ERα的表达与孕激素受体、人表皮生长因子受体-2显著相关,ERβ、GPER的表达与肿瘤临床病理变量没有关联。ERα-ERβ-GPER-乳腺癌平均NPI较ERα+ERβ+GPER-及ERα+ERβ+GPER+肿瘤高,差异具有统计学意义(P值分别为0.046、0.022)。结论:ERα、ERβ与GPER在浸润性导管癌中均有广泛分布,可能参与介导雌激素效应。ERα与ER及GPER相互独立,ERs表型分析对认识雌激素对乳腺癌的影响具有重要意义。
- 周春罗浩军李维东涂刚
- 关键词：乳腺癌雌激素受体雌激素受体亚型
- 信号传导蛋白和转录激活物3参与调节大鼠异种心脏移植延迟性排斥反应
- 2014年
- 目的探讨信号传导蛋白和转录激活物3（STAT3）在异种移植延迟性排斥反应（DxR）中的作用。方法构建小鼠供大鼠异种心脏移植模型，实验分为5组，空白对照组、移植组、DPP组[移植后给予STAT3磷酸化抑制剂5，15-Diphenylporphyrin（DPP）]、环孢素A（CsA）组（移植后给予CsA）、DPP＋csA组（移植后给予DPP＋CsA），采用免疫组织化学及蛋白质印迹法检测心肌组织中磷酸化STAT3（p-STAT3）的表达，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织中STAT3下游靶基因的表达，观察各组移植心的存活时间。结果随着移植时间的延长，移植心肌组织中p-STAT3的表达明显增加（P〈0．05）。与移植组比较，DPP及CsA处理可明显抑制p-STAT3的表达，延长移植心的存活时间（P〈0．05），二者具有协同效应；DPP及CsA处理可显著抑制STA T3靶基因Bcl—xl、Bcl-2、Cyclin D1、C-myc及血管内皮生长因子（VEGF）的表达（P〈0．05），DPP＋CsA处理可进一步抑制各靶基因表达。结论STAT3在异种移植心脏中持续活化，可能通过上调Bcl—x1、Bcb2、cyclinD1、C-myc及VEGF等相关基因表达，促进血管内皮细胞的增殖，并抑制其凋亡，在内皮细胞激活及DXR的发生中发挥重要作用。
- 罗浩军涂刚李振华李维东杨光伦
- 关键词：异种移植
