李维维
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项农业部农村能源综合建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 敲除CIT2基因的改造酿酒酵母C5D‑P及其功能
- 本发明涉及一种木糖利用率高的基因工程菌株。本发明发现酿酒酵母C5D‑P中CIT2基因与木糖运输的负调控相关，通过敲除C5D‑P中CIT2基因，得到的改造菌可提高木糖利用。经实验证实，该改造菌还具有生长速率高，不影响出发菌...
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- 文献传递
- 桔青霉木聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量：2
- 2012年
- 通过同源序列PCR克隆的方法,获得桔青霉(Penicillium citrinum)CR-2菌株的木聚糖酶编码基因xyl,该基因全长984 bp,编码327个氨基酸,无内含子序列,具有完整开放阅读框。其编码的氨基酸序列N端具有一段包含19个氨基酸的信号肽序列,并具有糖基水解酶第10家族(GH10)的保守催化域特征,推测该酶属于第10家族成员。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9相连接构建重组载体pPIC9-XYL,电击转化至毕赤酵母GS115菌株中。挑选阳性重组子经测序、酶活性以及SDS电泳分析表明,xyl基因成功在毕赤酵母中分泌表达,重组酶活性可达214.15 IU/mL。该重组酶最适温度与最适pH分别为50℃和4.5,且具有良好的pH和热稳定性。
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- 关键词：桔青霉木聚糖酶毕赤酵母酶学性质
- 敲除CIT2基因的改造酿酒酵母C5D-P及其功能
- 本发明涉及一种木糖利用率高的基因工程菌株。本发明发现酿酒酵母C5D-P中CIT2基因与木糖运输的负调控相关，通过敲除C5D-P中CIT2基因，得到的改造菌可提高木糖利用。经实验证实，该改造菌还具有生长速率高，不影响出发菌...
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- 文献传递
- 一种改良的热酚法高效快速提取酿酒酵母总RNA被引量：3
- 2012年
- 以酿酒酵母单倍体CE N.PK1与双倍体CEN.PK2为研究对象,利用改良热酚法,快速高效地提取酿酒酵母总RNA。结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1和CEN.PK2的总RNA经分光光度计测定浓度为7.63μg/μL和3.77μg/μL,OD_(260/280)分别为2.10和2.04,OD_(260/230)分别为2.32和2.24,浓度与纯度均能达到后续分子生物学试验的要求。经PCR与荧光定量PCR检测,该方法提取的RNA无DNA污染,可作为PCR反应的模板,与Trizol方法提取RNA相比,该方法不仅浓度高并且可将提取时间由常规的2.5 h缩短为1.5 h,具有操作简单、高质、高效等优点,经多次试验证明,此方法同样适用于酿酒酵母总RNA的大量提取试验,有较高的实用价值。
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- 关键词：RNA分离酿酒酵母热酚法CDNA荧光定量PCR
- CIT2基因对突变酿酒酵母木糖利用影响的研究
- 2016年
- 木糖利用困难是秸秆燃料乙醇产业化的制约因素,改造酿酒酵母使其能够代谢木糖生成乙醇是当前研究的热点之一。为了研究CIT2基因对遗传改良酿酒酵母C5D-P-M菌株中葡萄糖与木糖共发酵过程中木糖利用的影响,设计引物并应用重叠PCR技术获得敲除CIT2基因的敲除组件,通过同源重组的方法将C5D-P-M中的CIT2基因敲除得到突变菌株C5D-P-M-CIT2Δ。通过对出发菌株和突变菌株的生长速率、葡萄糖利用率、木糖利用率及乙醇产量进行研究,结果表明突变菌株C5D-P-M-CIT2Δ的上述指标比出发菌株C5D-P-M均有一定程度的提高。因此推测,酿酒酵母中CIT2基因是影响木糖利用的因素之一,CIT2基因的敲除可提高酿酒酵母的木糖利用率。
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- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 重组酿酒酵母中CIT2基因的敲除及对其木糖代谢的影响
- 能源短缺是目前全世界共同面临的重大问题之一。在我国能源状况日益紧迫的背景下，生物乙醇燃料的推广与使用显得尤为重要，对我国能源结构进行调整已成为能源发展面临的重要任务之一。用于生产生物乙醇燃料的原料主要是淀粉类、糖类或纤维...
- 李维维
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 文献传递
