杨翔
- 作品数：16 被引量：53H指数：5
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 重组人抗血栓蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达及纯化被引量：4
- 2011年
- 旨在优化重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌的自诱导培养基,以提高菌体产量及可溶性的重组rHAP蛋白含量。选取蛋白胨、酵母提取物、甘油、葡萄糖为因素,各取4个水平,采用正交表L16(45)进行试验设计,对影响菌体生长和可溶性rHAP表达水平的乳糖浓度进行了优化。结果表明自诱导培养基碳氮源的最优配比:2%蛋白胨,1.5%酵母,0.5%甘油,0.03%葡萄糖,0.2%乳糖。此时表达菌密度OD600和可溶性rHAP目标蛋白表达量分别是未优化前的2.04倍和2.85倍。在20 L发酵表达时,rHAP工程菌OD600值高达93,菌体湿量为1 620 g/20 L。利用Q-Sepharose和SP-Sepharose纯化,Western blotting结果表明表达蛋白为目的融合蛋白。
- 龚志飞杨翔颜法宝陈强孙小强华子春
- 关键词：发酵纯化
- 人胎盘抗凝蛋白变体抗凝与抗血栓形成的效应 与作用时间及剂量的关系(英文)被引量：1
- 2005年
- 背景:肝素作为最常用的抗凝药物已广泛用于临床,但其存在明显的出血副作用,与纤维蛋白结合的凝血酶活性作用有限,并发血小板减少症等不良反应。将水蛭素C端结构域与人胎盘抗凝蛋白连接在一起构建抗凝蛋白人胎盘抗凝蛋白变体,比较其抗凝抗栓作用与肝素的差异。目的:观察抗凝蛋白质人胎盘抗凝蛋白变体抗凝和抑制动脉血栓形成的作用的量效与时效关系,并了解该药的安全性。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:一所市级医院心脏科。材料:实验于2000-07/2001-04在江苏省人民医院动物实验室完成。选用纯种雄性新西兰白兔32只,随机将白兔分成4组:人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组、人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组、普通肝素组和生理盐水组,每组8只。方法:肝素和人胎盘抗凝蛋白变体都用生理盐水稀释。①人胎盘抗凝蛋白变体大剂量组:人胎盘抗凝蛋白变体0.7mg/kg静脉推注,继以0.35mg/(kg·h)维持静脉滴注2h;人胎盘抗凝蛋白变体小剂量组:人胎盘抗凝蛋白变体0.3mg/kg静脉推注,继以0.15mg/(kg·h)维持静脉滴注2h;普通肝素组:肝素75IU/kg静脉推注后,以37.5IU/(kg·h)维持静脉滴注2h;生理盐水组:采用与药物组相同体积的生理盐水和给药方法。②分别在用药前,用药后15和30及60min及停药后2h从股静脉采血测血常规、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间。③用药后15min用球囊剥脱股动脉内皮并监测股动脉远端的血压,记录脉压为0即血栓完全闭塞血管的时间。最后剪取球囊损伤的股动脉,剥离血管测量所形成血栓的长度、血栓的湿质量和干质量。④人胎盘抗凝蛋白变体毒副作用观察:实验过程中监测动物的血压、心率、呼吸等生命体征,并将部分动物实验后,行腹部解剖,观察内脏出血的情况,检测血白细胞数目。主要观察指标:①人胎盘抗凝蛋白变体对凝血系统和血栓形�
- 崔俊友王连生鞠成伟杨翔华子春
- 关键词：抗凝药血栓形成
- 螺旋藻(Spirulina maxima)对降低高血脂大鼠血清甘油三酯浓度的量效分析被引量：14
- 2002年
- 以高脂饲料造型高血脂大鼠 ,饲喂不同剂量的螺旋藻饲料 ,建立血清甘油三酯值(TG)随时间 (t)变化的函数 ,通过求解其降脂极限临界值 ,推算出使高血脂大鼠达到健康标准的剂量组区间为 4 5 0mg/kg≤TG≤ 810mg/kg ,相应的理论服用期为 13.6周≤t≤ 195 5周 ;利用求得的理论值与对应的剂量建立量效函数关系 ,精确求解出最低有效剂量临界值为 377.4mg/kg .
- 杨翔何舒宁曾令柯黄诚
- 关键词：量效分析螺旋藻高血脂血清甘油三酯降血脂功能
- 一种水蛭素类融合蛋白与凝血酶作用的动力学模拟被引量：12
- 2001年
- 通过将凝血酶抑制剂水蛭素的C端 2 0肽片段嫁接到血小板结合蛋白AnnexinⅤ上 ,可以期望获得既具有抗凝血活性 ,同时又具有导向性的新型工程蛋白质分子 .利用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构 ,并对该融合蛋白对凝血酶的抑制作用进行了分子动力学模拟 ,得到了支持上述想法的结果 .
- 范垚王进杨杉杨翔张丽娜华子春朱德煦
- 关键词：融合蛋白分子动力学模拟凝血酶水蛭素
- R-hap在大鼠体内的组织分布，排泄及药动学研究(英文)被引量：1
- 2008年
- 测定R-hap在健康Wistar大鼠体内的组织分布,排泄及药动学参数。R-hap采用IODO-GEN标记,测定单次推注给药后^(125)I-R-hap的组织分布,尿、粪及胆汁的排泄情况。^(125)I-R-hap药动学参数也是在单次推注给药后测定。R-hap在体内广泛分布,在大部分器官中快速消除。其中肾的含量最高,脂肪的含量最低。累计排泄率为71.81%±2.15%(48小时)及94.71%±1.50%(120小时)。经尿排泄为主要的排泄途径,给药后120小时,尿及粪的累计排泄率分别为80.64%±1.47%,14.07%±0.95%。平均给药时曲线下面积为(8818.4±576.1)Bq/h/mL。R-hap的组织分布,排泄及药动学参数的结果为未来的临床试验设计提供了参考依据。
- 周佳雨孟志云窦桂芳付守廷华子春杨翔刘军韦利军张笋华
- 关键词：排泄药动学
- 重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌表达条件的优化被引量：1
- 2011年
- 优化重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌的培养基及培养和表达条件,提高菌体产量及可溶性的重组rHAP蛋白含量。通过单因素及正交实验,对影响重组大肠杆菌生长及rHAP蛋白表达的培养基的组分、诱导剂的浓度、培养温度等工艺条件进行优化。结果表明半合成培养基成分的最优配比:0.5%蔗糖、1%蛋白胨、3%酵母提取物,IPTG诱导剂浓度为0.2 mmol/L,37℃培养4 h,开始诱导5 h,诱导温度为32℃。优化培养基及培养条件提高了菌体的生长密度及可溶性rHAP目标蛋白的表达量,表达菌密度OD600和可溶性rHAP目标蛋白表达量分别是没有优化前的1.85倍和2.59倍。在20 L发酵表达时,rHAP工程菌OD600值高达73,菌体湿量为1 957 g/20 L。
- 龚志飞杨翔颜法宝陈强孙小强华子春
- 关键词：基因工程
- 人胎盘抗凝蛋白变体的抗凝与抗栓作用被引量：10
- 2004年
- 探索新型抗凝蛋白质———人胎盘抗凝蛋白变体 (annexinⅤderivative,AND)抗凝和抑制动脉血栓形成的作用。方法 比较实验组动物和对照组动物在用药前 ,用药后 15 ,30 ,6 0min及停药 2h活化部分凝血活酶时间 (APTT)、凝血酶原时间 (PT)、凝血酶时间 (TT)、血浆纤维蛋白原 (Fg)含量。用药 15min后用球囊剥脱股动脉内皮并监测股动脉远端的血压 ,记录脉压为 0的时间即血栓完全闭塞血管的时间。最后剪取球囊损伤的股动脉 ,测量所形成血栓的长度、血栓的湿重和干重。结果 抗凝指标 :用药组在用药后 15min时 ,其APTT值最长 ,且APTT值明显长于生理盐水组 (P <0 .0 5 ) ,短于肝素组 (P <0 .0 1) ,肝素组的APTT、TT值明显长于其他 3组 ,PT值各组间差异无统计学意义 ;对Fg的影响 :大剂量用药组似乎可以降低Fg的血浆含量 ;血栓质量 :无论是湿重还是干重AND组都明显轻于对照组 (P <0 .0 0 1) ,大剂量AND组血栓干重显著轻于小剂量组 (P <0 .0 5 ) ;小剂量AND组血栓的长度明显短于生理盐水组 (P <0 .0 5 ) ,但和肝素组相比 ,差异无统计学意义 (P =0 .4 85 ) ,大剂量AND组明显短于生理盐水组 (P <0 .0 1)和肝素组 (P <0 .0 5 ) ;脉压为 0的时间 :AND组显著长于对照组 (P <0 .0 5 )和肝素组相比 ,差异无统计学意义。结?
- 鞠成伟王连生杨翔马根山华子春高兴亚
- 关键词：APTT抗凝蛋白用药后人胎盘血浆含量
- 人TPO基因转染肝癌细胞后的表达及其受体水平的变化鼠源TPO对体外培养淋巴细胞增殖分化的影响的研究
- 从TPO工程菌株中提取PCDNA3/TPO颗粒,用脂质体包裹后转染HepG2细胞,以未转染的HepG2和转染PCDNA3/IL-18的HepG2作为对照,通过反转PCR法检测TPO及c-mpl在三组细胞中的表达情况来研究...
- 杨翔
- 关键词：肝癌细胞RT-PCR法淋巴细胞
- 文献传递
- ^(18)F-膜联蛋白检测肿瘤细胞凋亡的研究进展
- 2008年
- 贾支俊冯雪凤郭万华申景涛杨翔华子春
- 关键词：肿瘤细胞凋亡蛋白检测肿瘤分子生物学影像学诊断5年存活率
- ^99Tc^m—His10—Annexin Ⅴ探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨^99Tc^m标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ（His10-Annexin Ⅴ）探测荷非小细胞肺癌（NSCLC）裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性。方法用^99Tc^m直接标记His10-Annexin Ⅴ。荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只，按体表面积以100mg／m^2剂量紫杉醇化疗诱导，分成未治疗（对照）、化疗诱导后24，48，72h共4组.^99Tc^m-His10-AnnexinⅤ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡，计算肿瘤／对侧正常肌肉组织放射性比值（T／NT），测定每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。以^99Tc^m-IgG显像为对照，确定肿瘤的非特异性摄取。用流式细胞术（FCM）测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3），光学显微镜HE及原位末端标记法（TUNEL）染色测定凋亡指数。采用SPSS12．0软件进行统计学处理，运用单因素方差分析和直线相关分析（Pearson）。结果”^99Tc^m -His10-Annexin Ⅴ放化纯为（98．01±1．67）％。注射^99Tc^m- His10-Annexin Ⅴ后2h即可得到清晰图像，化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚，化疗后24，48，72h组的T／NT值分别为2．63±0．76，3．41±0．90，3．85±0．62；对照组T／NT值为1．42±0．19，F值分别为12．064，23．322，70．177，P均〈0．01。未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取，为（1．09±0．18）％ID／g，化疗后肿瘤摄取明显增加，24，48，72h肿瘤摄取分别为（2．55±0．73）、（3．60±1．09）、（3．73±0．97）％ID／g，明显高于未治疗组（F值分别为18．733，20．624，35．626，P均〈0．01）。^99Tc^m-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚。未治疗组活化Caspase-3为（3．70±0．74）％，化疗后24，48，72h分别为（23．46±2．23）％、（62．85±6．13）％、（70．44±6．09）％，3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义（F值分别为354．610，459．438，591．052�
- 郑玉民王自正颜珏杨翔华子春方纬孟庆乐王峰
- 关键词：细胞凋亡
