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二圆互交理论在分子生物学教学中的实践研究被引量：7: 2007年; 为帮助学生学习和理解复杂的分子生物学知识,有必要对传统的教学方法进行改革。就泸州医学院冯志强教授提出的二圆互交和三圆互交理论模式,试验性地应用于医学分子生物学课教学的每个环节,取得了很好的教学效果。; 梅志强段承刚宋杰李娟王丽; 关键词：医学分子生物学教学方法

古抑菌素A诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及对脆性组氨酸三联体蛋白和凋亡相关蛋白表达的影响被引量：1: 2010年; 目的:研究组蛋白去乙酰化转移酶抑制剂古抑菌素A(TSA)对人肝癌HepG2细胞的抑制作用以及对脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白和凋亡相关蛋白caspase-3、bax、bcl-2表达的影响,初步探讨其诱导凋亡的机制。方法:以不同浓度TSA(125、250、500、1000、2000nmol·L-1)处理体外培养的人肝癌HepG2细胞,孵育24、48h后采用MTT法、以吸光度值和抑制率为指标检测细胞的生长抑制情况;分别用原位末端脱氧核苷转换酶标记(TUNEL)法和免疫细胞化学法检测TSA(250、1000nmol·L-1)作用后细胞凋亡率和细胞中FHIT、caspase-3、bax、bcl-2的蛋白表达;同时设立溶剂为对照组。结果:与对照组比较,不同浓度TSA作用后吸光度值降低,抑制率升高,并呈明显的剂量依赖和时间依赖关系;TUNEL阳性细胞百分率升高(P<0.01)、细胞中FHIT、cas-pase-3、bax蛋白表达增强(P<0.05),bcl-2的变化不明显(P>0.05)。结论:TSA可能通过上调FHIT、caspase-3、bax蛋白的表达而诱导肝癌HepG2细胞凋亡。; 王丽宋杰刘晓燕何涛段承刚; 关键词：肝癌HEPG2细胞凋亡脆性组氨酸三联体蛋白

神经元蛋白质磷酸化修饰分析方法的初步研究被引量：6: 2004年; 目的　建立一种对神经细胞中的磷酸化蛋白质进行分离分析的方法。方法　培养新生乳小鼠神经细胞 ,加入 32 P- Na H2 PO4 2 .78× 10 6 Bq/ ml,37℃孵育 1.5 h。刺激组分别加入表皮生长因子 (EGF) 2 0 ng/ m l或胰岛素10 0 nm ol/ L,对照组加入等量的培养基 ,作用不同时间后液氮终止反应。裂解细胞 ,用 Bio- Rad DC Protein Assaykit测定细胞蛋白质含量 ,双向电泳分离细胞蛋白。放射自显影。结果　 1双向电泳自显影图谱显示近数十个蛋白质斑点 ,绝大部分集中于 p H偏酸性和中性区域 ,p H4 .6～ 6 .5 ,其相对分子质量主要介于 2 0× 10 3～ 130× 10 3之间。2 EGF、胰岛素刺激不同时间后虽出现有磷酸化蛋白质斑点的增加或消失 ,但更多表现为某些磷酸化蛋白质斑点灰度的增强或减弱。 3对比分析发现 ,放射自显影图谱中只有少数斑点出现在双向电泳 Coom assie Brilliant BlueR- 2 5 0染色图谱中 ,提示神经细胞中的大多数磷酸化蛋白质为低丰度蛋白。结论　采用本研究建立的双向电泳和放射自显影技术可对神经细胞中的蛋白质可逆磷酸化修饰状态进行较为全面、动态的分析 ,方法灵敏、特异性强。; 何涛李洪李蓉晖段承刚甘淋李娟宋杰; 关键词：磷酸化修饰双向电泳放射自显影蛋白质组

槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞产生白介素6的影响被引量：31: 2006年; 目的研究离体培养的人中性粒细胞在被LPS激活的情况下,槲皮素对中性粒细胞产生IL-6的影响。方法运用ELISA法检测槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞分泌IL-6的影响;运用流式细胞术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞内IL-6的蛋白水平的影响;运用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞表达IL-6 mRNA的影响。结果在无刺激的情况下中性粒细胞不产生IL-6,LPS(1μg/mL)以时间依赖性的方式诱导中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6,并在16 h达到高峰。然而,预先用槲皮素(40μmol/L)处理中性粒细胞30 min后,LPS诱导的中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6则受到了抑制。结论IL-6是炎症早期重要的促炎症因子。因此,槲皮素抑制LPS诱导中性粒细胞产生IL-6,提示槲皮素可能通过对炎症因子负性调控而发挥其抗炎作用。; 李昕刘佳佳何浩张姿段承刚谢华福何涛; 关键词：槲皮素中性粒细胞白细胞介素6 脂多糖

医学分子生物学中的养生之道被引量：1: 2015年; 针对医学院校大学生体质下降、心理健康水平低的现象,教师在讲授分子生物学知识的同时,结合中国传统养生文化进行讲解,让学生自己从中体悟健康的重要性。学生反映课堂内容生动而且丰富,在不知不觉中掌握了养生之道,并把它应用于生活和学习中,增进了自我管理健康的能力。; 梅志强邓莉段承刚谢惠波; 关键词：分子生物学养生医学生

液基薄层检测技术在宫颈细胞学诊断中的应用价值: 2014年; 目的:探讨液基薄层细胞学检测技术(ThinPrep cytology test,TCT)在宫颈细胞学诊断中的应用价值。方法:收集2010-2013年间来我院就诊且同时进行TCT细胞学检测和病理学诊断的宫颈疾病患者325例,比较其TCT细胞学检测和病理诊断结果。结果:LSIL与病理学诊断符合率为66.7%,HSIL诊断符合率为83.3%,癌的诊断符合率为100%。结论:液基薄层细胞学检测技术在宫颈细胞学诊断中具有检出率较高,与病理诊断符合率好等优点,且为无创性检测,可用于宫颈疾病的细胞学普查和筛查。; 匡维新段承刚; 关键词：宫颈细胞学

人FHIT基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 2010年; 目的:建立检测人脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因的荧光定量RT-PCR方法。方法:根据GenBank中人FHIT基因序列,在保守区设计合成一对特异引物,将PCR扩增得到的FHIT基因克隆至PMD18-T载体上,构建的重组质粒标准品倍比稀释后运用SYBR Green I染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析。结果:FHIT基因的标准品稀释度在1×107～1×103copies/μl范围内具有良好的线性关系,Ct值线性范围为14.28～28.36,相关系数为0.998,融解曲线分析表明,产物为特异的单峰,Tm为92.3±0.1℃。结论:建立了人FHIT基因实时荧光定量RT-PCR方法,为在mRNA水平对人FHIT的定量分析奠定了基础。; 王丽陈晞崔维佳段承刚刘晓燕何涛; 关键词：SYBR

互交理论在婚姻与家庭中的应用: 2013年; 互交理论哲学模式具有物我平等与差异性、主动开放、‘公共区和联结点、多维互交等内涵。此内涵在处理男女平等、家庭成员之间的关系以及个人与社会的关系中起着很好的指导作用。把它应用于婚姻和家庭中，能更好地理解和处理夫妻双方的关系，并促进家庭更加和谐与幸福，从而达到整个社会的和谐统一。; 梅志强段承刚冯志强; 关键词：爱情家庭婚姻

乳小鼠培养肝细胞蛋白质双向电泳技术的建立: 2004年; 目的 :建立培养乳小鼠肝细胞蛋白质的双向电泳技术。方法 :取乳小鼠肝脏组织 ,进行肝细胞原代培养 ,提取肝细胞蛋白 ,以固相pH梯度 (IPG)等点聚焦为第一向 ,垂直SDS -PAGE为第二向进行双向电泳 ,并对样品处理方式、蛋白上样量、IPG等电聚焦和SDS -PAGE电泳参数设置、凝胶浓度等关键因素和环节进行了比较研究。结果 :通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。结论 :本文建立乳小鼠双向电泳分离技术 ,具有较高的分辨率和重复性。; 宋杰何涛谢华福李娟杨文理甘淋段承刚刘晓燕; 关键词：肝细胞蛋白质组双向电泳技术细胞培养

大肠杆菌O-157产生的VT2对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用: 2001年; 目的研究毒源性大肠杆菌VETCO-157产生的外毒素-VT2对中性粒细胞自发性凋亡的影响,探索VETC感染后并发的溶血性尿毒症HUS及相关疾病的发病机理。方法运用形态学观察、流式细胞仪FACS技术和DNA分离技术进行研究。结果在无VT2存在的情况下,经过24h体外培养,65%左右的中性粒细胞发生了凋亡,而浓度为10-6M的VT2使其凋亡发生率降至20%左右。结论VT2延长了中性粒细胞的功能性生命期限,使其胞浆内细胞毒性物质有更多的机会损伤肾小球血管内皮细胞,促进微血栓的形成,因而中性粒细胞可能参与了HUS的形成过程。; 刘佳佳李小刚张忠杰高江平段承刚何延政赤星透钟森; 关键词：中性粒细胞凋亡溶血性尿毒症

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段承刚

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