段正秀
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 对分离自褐家鼠的汉滩型和汉城型病毒的毒力测定
- 2009年
- 目的比较分离自褐家鼠的汉滩病毒（HTNV）CGRn5310株和汉城病毒（SEOV）HR54株的毒力差异，探索汉坦病毒（HV）“溢出”到非宿主动物后的毒力变化。方法选取从贵州省褐家鼠中分离的CGRn5310株HTNV和从河南省褐家鼠分离的HR54株SEOV，用不同稀释度的病毒悬液经脑内接种于昆明乳鼠，观察小鼠发病症状，测定其半数致死量（LD50），并用免疫荧光法检测脑与肺组织内HV特异抗原。结果接种2株病毒后的小鼠生长缓慢，均出现不同程度的神经症状。CGRn5310株的LD50是10^-6.42，HR54株的LD50是10^-4.51。在死亡小鼠的脑与肺组织中均能检测到HV特异抗原，而对照组脑与肺组织内未检测到病毒抗原。结论从褐家鼠中分离到的CGRn5310株HTNV的毒力大于从褐家鼠中分离到HR54株SEOV，这可能意味着HV“溢出”到非宿主动物后毒力变化较小。
- 段正秀李明慧于娟王文郭文平张永振
- 关键词：汉坦病毒汉滩病毒毒力
- 捻转血矛线虫Hc38基因DNA疫苗对绵羊免疫保护性效果评价被引量：1
- 2009年
- 为了研究基因疫苗对绵羊的免疫保护效果,本研究构建了捻转血矛线虫(H.contortus)Hc38基因DNA疫苗。将H.contortus Hc38基因保守结构域克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,免疫鼠8d后用RT-PCR检测到该疫苗在鼠肌肉组织中进行了转录。将纯化的DNA疫苗免疫绵羊后,用western blot和ELISA方法检测疫苗在绵羊体内的翻译和诱导IgG的产生。二免后2周用10000条H.contortus第3期幼虫攻击实验动物,检测绵羊粪便虫卵排出、成虫数量等免疫保护性指标。该H.contortus Hc38 DNA疫苗与对照组比较,免疫组绵羊排出虫卵减少66.6%、成虫减少33.1%。特别值得注意的是免疫组的静脉注射方式产生抗体最高,相应羊的虫卵数和成虫数低。本实验证明Hc38基因DNA疫苗对绵羊虫卵及成虫发育具有明显的抑制作用。
- 郑金海段正秀赵军明薄新文钟发刚张慧
- 关键词：绵羊捻转血矛线虫PCDNA3.1DNA疫苗
- 武汉市啮齿动物中汉坦病毒分子流行病学研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究湖北省武汉市啮齿动物中汉坦病毒(Hantavirus)流行情况及病毒型别。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺中HV抗原;用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法扩增阳性样品中HV的部分S片段及部分M片段;构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果在武汉市肾综合征出血热(HFRS)疫区共捕获啮齿动物231只,在9份鼠肺样品中检测到HV抗原,其中5只为褐家鼠,2只为黄胸鼠,2只为小家鼠,病毒携带率为3.90%。用汉城型病毒(SEOV)特异性引物从7份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段(620～999nt)及部分M片段(2001～2301nt)并测定序列。对扩增出的部分S片段和M片段核苷酸序列分析表明,7株病毒与Genebank已提交的SEOV有很高的同源性,均为SEOV。但在用部分S片段及部分M片段核苷酸序列所构建的系统发生树上,7株病毒的聚集模式不同。结论武汉市啮齿动物携带S1和S4亚型汉坦病毒,表现出SEOV在同一地区的遗传多样性。
- 熊海萍李明慧朱莹段正秀田俊华陈化新张永振
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型
- 吉林省汉城型汉坦病毒基因分型研究被引量：1
- 2010年
- 为了研究吉林省褐家鼠中汉城型汉坦病毒的基因亚型及其分布情况，采用间接免疫荧光法（IFA）检测鼠肺中HV抗原；用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法扩增阳性样品中HV的部分S片段及部分M片段；构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果显示，在吉林省肾综合征出血热（HFRS）疫区共捕获啮齿动物120只，在9份鼠肺样品中检测到HV抗原，其中7只为褐家鼠，2只为小家鼠，病毒携带率为7．5％。用汉城型病毒（SEOV）特异性引物从7份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段（620—999nt）及部分M片段（2001—2301nt）并测定序列。对扩增出的部分S片段和M片段核苷酸序列分析表明，7株病毒与GenBank已提交的SEOV有很高的同源性，均为SEOV。但在用部分S片段及部分M片段核苷酸序列所构建的系统发生树上，7株病毒的聚集模式不同。结论为吉林省褐家鼠携带S3亚型汉坦病毒。
- 熊海萍李明慧段正秀陈化新张永振
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型地理分布
- 温州市瓯海地区汉坦病毒的分子流行病学调查
- 2009年
- 目的研究温州市瓯海地区宿主携带汉坦病毒的状况和型别。方法经间接免疫荧光（IFA）试验初筛为阳性的鼠肺标本，用巢式RT—PCR扩增阳性标本中汉坦病毒的S基因片段上的目的核苷酸序列（620～999nt），并以ClustalX（1．831和Phylip3．63构建系统进化树进行分型和分子进化分析。结果温州市瓯海地区共捕获啮齿动物148只，5份鼠肺标本中汉坦病毒抗原阳性，其中褐家鼠3只，黄胸鼠2只，病毒携带率为3．38％，与汉坦病毒分型标准比较，均属于SEOV型。结论瓯海地区褐家鼠和黄胸鼠携带S1和S3亚型汉坦病毒，显示出汉坦病毒的多样性。
- 段正秀谭有将熊海萍陈化新张永振郑金海
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型
- 捻转血矛线虫Hc38保守结构域所在基因片段的真核表达载体构建被引量：1
- 2009年
- 根据捻转血矛线虫Hc38基因产物(登录号AY749124)保守结构域所在核酸序列设计1对引物,该引物包含Kozak序列、HindⅢ酶切位点、XbaⅠ酶切位点。以含有捻转血矛线虫Hc38基因保守结构域片段的pMD19-T为模板,经PCR扩增获得Hc38基因保守结构域片段,用HindⅢ、XbaⅠ双酶切该片段,回收后将此基因片段克隆至相同酶切回收后的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,获得重组质粒pcD-NA3.1-Hc38。经酶切分析、序列测定和PCR鉴定,证实了重组质粒的正确性。
- 郑金海段正秀荣光薄新文李娜何立雄
- 关键词：捻转血矛线虫真核表达载体KOZAK序列
