沈佳 作品数:65 被引量:132 H指数:7 供职机构: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
鸡传染性支气管炎病毒M41株鸡胚增殖工艺研究 2021年 为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41标准毒株在鸡胚上的最佳生产工艺,试验用IBV M41株分别以不同剂量接种同一胚龄不同鸡胚、不同胚龄普通鸡胚,以及IBV M41株接种普通鸡胚后不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备病毒液的产量及病毒效价。结果显示:IBV M41株接种无传染性支气管炎病毒母源抗体的SPF鸡胚最佳病毒接种剂量为104.5EID50,接种含有IBV母源抗体的普通鸡胚最佳病毒接种剂量为105.1EID50,最佳接种胚龄为11日胚龄,最佳收毒时间为48 h。按照此工艺制备疫苗,免疫SPF鸡,IBV抗体效价均符合规程标准。研究结果为用鸡胚高效、大量生产IBV M41株病毒抗原进而生产合格的IB疫苗提供了数据支持。 史爱华 赵蕾 李林 张建伟 沈佳 习硕 姜北宇 彭湃 阮继湘 章振华关键词:鸡传染性支气管炎病毒 鸡胚 鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究 2024年 【目的】研究鸡γ-干扰素(chicken interferonγ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用,并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式。【结果】成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒。将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞,结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用;将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞,结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位。表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362μmol/L,二者之间有较高的亲和力。分子对接试验结果显示,chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用,Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用。【结论】本研究结果证明了chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用,且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用。 靳换 孟昭英 涂敏 沈佳 史爱华 赵蕾 习硕 张建伟 章振华关键词:相互作用 H9亚型禽流感病毒WD株灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果观察 将H9亚型禽流感灭活疫苗(WD株)免疫21日龄SPF鸡,免疫后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用WD株及2004~2012年分离的8株H9亚型禽流感病毒对免疫鸡进行攻毒试验。结果显示试验鸡免疫三联灭活苗后21d,WD... 章振华 姜北宇 李林 景小冬 沈佳 郑小兰 张建伟 史爱华 黄凤军关键词:H9亚型禽流感 灭活疫苗 流行毒株 免疫效果 文献传递 鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果 被引量:3 2013年 为了检验鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗免疫接种21日龄SPF鸡,免疫接种后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用2004年—2012年分离的8株H9亚型禽流感病毒对免疫接种鸡进行攻毒试验。结果显示,试验鸡免疫接种三联灭活苗后21d,其H9 HI抗体效价可达11.88log2,可抵抗8个不同H9亚型禽流感流行毒株的攻击,总攻毒保护率达92.50%(37/40)。鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗中H9亚型禽流感毒株具有良好的免疫原性,能抵抗不同年代不同地区分离的H9亚型禽流感流行毒株的攻击。 章振华 李林 沈佳 景小冬 张建伟 郑小兰 史爱华 姜北宇关键词:鸡新城疫 传染性支气管炎 H9亚型禽流感 三联灭活苗 流行毒株 不同培养基对H9亚型禽流感病毒在MDCK细胞上的增殖效果研究 被引量:2 2012年 [目的]比较3种培养基对H9亚型禽流感病毒在MDCK细胞上的增殖效果。[方法]采用DMEM+10%血清、低血清培养基(MEM-MD-611)、无血清培养基(SFE4Mega)3种培养基制备MDCK细胞单层,分别接种不同稀释度的H9亚型禽流感病毒。然后,分别加入含10μg/ml胰蛋白酶的3种培养基作为维持液,培养病毒,每隔24 h观察其细胞病变,并测定上清HA滴度。[结果]在培养72~96 h时,无血清培养基病毒液的HA滴度高于低血清培养基,而低血清培养基则高于含血清培养基。[结论]3种培养基均可用于制备禽流感病毒抗原,其中无血清培养基、低血清培养基更适用于流感病毒抗原的制备。 张建伟 史爱华 沈佳 景小冬 章振华 李林 姜北宇关键词:培养基 MDCK细胞 增殖效果 H9亚型禽流感病毒流行毒株交叉免疫攻毒保护试验研究 自上世纪90年代以来,低致病性的H9亚型禽流感在我国各省市自治区迅速蔓延,给我国养禽业造成了巨大的经济损失。随着禽流感(H9亚型)灭活疫苗的广泛应用,该病已得到了有效的控制。然 张建伟 景小冬 章振华 李林 沈佳 郑小兰 姜北宇关键词:流行毒株 攻毒保护 禽流感病毒 交叉免疫 文献传递 Complete Genome Sequencing and Genetic Variation Analysis of Two H9N2 Subtype Avian Influenza Virus Strains 被引量:2 2011年 [Objective] The study aimed to investigate the genetic variation characters of entire sequences between two H9N2 subtype avian influenza virus strains and other reference strains.[Method] The entire sequences of 8 genes were obtained by using RT-PCR,and these sequences were analyzed with that of six H9N2 subtype avian influenza isolates in homology comparison and genetic evolution relation.[Result] The results showed that the nucleotide sequence of entire gene of the strain shared 91.1%-95.4% homology with other seven reference strains,and PG08 shared the highest homology 91.3% with C/BJ/1/94;ZD06 shared the highest homology 92.3% with D/HK/Y280/97.HA cleavage sites of two H9N2 subtype avian influenza virus isolated strains were PARSSR/GLF,typical of mildly pathogenic avian influenza virus.[Conclusion] Phylogenetic tree for entire gene of eight strains showed that the genetic relationship was the closest between ZD06 and C/Pak/2/99 strains,which belonged to the Eurasian lineage;PG08 shared the highest homology 91.3% with ZD06,it may be the product of gene rearrangements of other sub-lines. 沈佳 章振华 姜北宇 李林 景小冬 张建伟A型魏氏梭菌滤液质控标准研究 前言A型魏氏梭菌滤液中含有磷酸酯酶C,可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C,处理鸡传染性支气管炎病毒,使该病毒表现出血球凝集(HA)活性,制备IB HI试验抗原。因此,建立A型魏氏梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IB H... 章振华 李林 沈佳 景小冬 陈小玲 史爱华 张建伟 黄凤军 姜北宇关键词:魏氏梭菌 小白鼠 文献传递 鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对1日龄中等母源抗体水平雏鸡免疫效果的研究 被引量:4 2015年 将鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和BX株活疫苗分别免疫1日龄中等母源抗体水平京红雏鸡,同时免疫1日龄SPF雏鸡作对照,免疫后第9天观察法氏囊病变,免疫后第28天采血测定IBDV中和抗体,并用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果显示,免疫后第9天,免疫复合物疫苗组SPF雏鸡和京红雏鸡法氏囊均正常,BX株活疫苗组SPF雏鸡法氏囊出现了萎缩病变;免疫后第28天,对照SPF雏鸡和京红雏鸡的免疫复合物疫苗组、BX活疫苗组IBDV中和抗体效价分别为9.2log2、8.5log2和7.2log2、4.4log2,攻毒保护率均为100%。试验结果表明免疫复合物疫苗免疫1日龄中等水平母源抗体雏鸡效果很好,能产生较高的中和抗体,攻毒保护率能达到100%。 章振华 李林 景小冬 张建伟 沈佳 史爱华 郑小兰 黄凤军 姜北宇关键词:鸡传染性法氏囊病 法氏囊 保护率 鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗安全性及效力试验 被引量:3 2016年 为评价以悬浮培养制备的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)抗原液为组份之一的鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-传染性法氏囊病(IBD)三联灭活疫苗的安全性及效力,实验室制备3批疫苗,按照《中国兽药典》附录对疫苗进行物理性状、无菌检验、安全及效力试验。结果显示3批次疫苗物理性状、无菌检验均合格;2倍剂量注射21日龄的SPF鸡,14 d后剖检注射部位未见炎症反应,疫苗吸收良好,说明疫苗安全;疫苗免疫SPF鸡后21 d,ND和IB血凝抑制(HI)抗体,IBD中和抗体均合格,攻毒实验证明,免疫鸡10/10保护,对照鸡5/5发病或死亡。表明以悬浮培养制备的IBDV抗原液生产的三联灭活疫苗安全有效。 沈佳 姜北宇 章振华 李林 史爱华 叶丽娜 张建伟关键词:鸡新城疫 传染性支气管炎 传染性法氏囊病 三联灭活苗