沈瑾
- 作品数：9 被引量：33H指数：4
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DNA芯片技术检测HLA-DR1,DR51组基因型
- 2003年
- 目的 采用DNA芯片技术对HLA DR1,DR5 1组基因分型。 方法 根据编码HLA DR1,DR5 1组抗原等位基因序列设计特异分型探针 ,制作DNA分型芯片。通过组间特异引物扩增基因组相应区段DNA ,扩增中用Cy5 dCTP荧光标记 ,扩增标记后的产物与芯片探针杂交 ,通过杂交产生的荧光信号及分布格局确定样品基因亚型。分型结果用标准DNA和PCR SSO验证。 结果 130份样本共检出HLA DR1,DR5 1组位点 34个 ,包括 18个DR15 ,8个DR16 ,6个DR10 ,2个DR1,无假阳性或假阴性 ,准确率和重复率均达 10 0 %。检测总耗时约 3.5h。 结论 DNA芯片用于HLA DR1、DR5 1组基因分型具有高分辨度、高特异性和简单快速的优点 ,适于器官移植临床应用。
- 肖家全李成涛谭建明康敏华李瑶丁言德沈瑾
- 关键词：DNA芯片技术人白细胞抗原
- HLA-DRB1基因芯片与PCR-SSP分型的比较被引量：8
- 2003年
- 目的 比较基因芯片和PCR SSP用于汉族南方人群HLA DRB1基因分型的结果 ,评价分型芯片的准确性。方法 77份待分型样本 ,分别用等位基因特异的PCR SSP和基因分型芯片对DRB1分型。芯片分型通过组间特异引物扩增基因组DNA ,扩增中用荧光标记。扩增标记后的产物与分型芯片的探针杂交 ,通过杂交产生的荧光信号确定样品的HLA DRB1基因亚型 ,比较两种方法分型所获得的结果 ,不吻合的样本全部经第三方验证或测序。结果 77份样本 ,两种方法分型全部成功。分型结果的吻合率为 93 %。不吻合样本 6份 ,其中SSP定型纯合子 4份 ,芯片分型全部为杂合子。经第三方验证 ,证实芯片对纯合子和杂合子的分型全部正确。另外 2份不吻合的样本经测序 ,证实SSP分型错误 1份 ,芯片分型错误 1份。芯片的重复率为 96%。结论 基因芯片是一种理想的分型方法 ,具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少。
- 肖家全谭建明李成涛李瑶沈瑾康敏华方燕红
- 关键词：HLA-DRB1基因芯片PCR-SSP器官移植排斥反应基因分型
- 基因芯片在中国南方汉族人白细胞抗原-DRB分型中的应用被引量：8
- 2003年
- 目的 建立一种用于HLA -DRB分型的基因芯片 ,并通过与PCR SSP比较 ,评价芯片的性能。方法 根据中国汉族南方人常见的HLA DRB位点基因及其多态性的独特序列 ,在第二外显子区域设计特异性的寡核苷酸分型探针 ,将其点在玻片上 ,制成芯片。基因组DNA通过组间特异引物扩增 ,扩增中同时用荧光素Cy5标记。扩增标记后的产物与结合在芯片上的探针进行杂交 ,通过荧光扫描仪对杂交产生的荧光信号值进行分析 ,确定样品的HLA DRB基因亚型。将这一方法应用于 110份样本的HLA DRB基因分型并与PCR SSP分型的结果进行比较。结果 110份淋巴细胞样本 ,除1份PCR无产物致芯片不能分型外 ,其余样本芯片分型全部成功。不吻合样本 10份 :其中SSP定型纯合子 6份 ,芯片分型全部为杂合子 ,SSP定型为杂合子 1份 ,芯片结果为纯合。经第三方用PCR SSO验证 ,证实芯片分型正确。另外 3份不吻合的样本经测序 ,证实SSP分型错误 2份 ,芯片分型错误 1份。芯片的重复率为 95 %。结论 基因芯片是一种理想的分型方法 ,具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少、结果判读容易、一次可作多份样本的优点。
- 肖家全谭建明李成涛康敏华方燕红李瑶沈瑾丁言德
- 关键词：基因芯片汉族人基因分型器官移植
- 前列腺阶段性增长的特性及分子生物学基础研究
- 夏术阶唐孝达鲁军朱江王丰谢东华丁言德沈瑾
- 良性前列腺增生症（BPH）为老年男性的常见病、多发病，病因至今不明。病理学研究表明，BPH主要是指前列腺移行带的增生，而外周带和中央带很少发生增生。目前尚不清楚为何只有移行带出现增生。 研究发现，前列腺随年龄增长呈阶段...
- 关键词：
- 关键词：前列腺雄激素基因差异表达
- 肾移植长期存活受者致敏状态的检测及其临床意义被引量：8
- 2000年
- 目的 检测肾移植长期存活受者的致敏状态 ,并分析其与移植肾功能的关系。方法 在定期随访的肾移植受者中 ,选取存活 3年以上的受者 6 6例 ,其中肾功能正常者 46例 ,慢性肾功能减退者 2 0例 ,用LambdaAntigenTray(LAT)酶联免疫试剂盒检测血清中的可溶性抗HLA抗体 ,分析抗体的类型和特异性、致敏与肾功能及移植后时间的关系。结果 肾功能正常组轻度、中度、高度致敏分别为 9例、0例、2例 ,肾功能减退组为 3例、1例、4例 ;移植后 3～ 5年、6～ 8年及 8年以上的致敏率没有差异 ;致敏类型 :肾功能正常组Ⅰ类抗原致敏 0例、Ⅱ类抗原致敏 8例、Ⅰ、Ⅱ类抗原同时致敏 3例 ,肾功能减退组分别为 1例、2例、5例。结论 致敏率与移植后的时间长短无关 ;HLAⅡ类抗原是致敏的主要原因 ;移植肾功能受损与高度致敏和Ⅰ。
- 肖家全唐孝达王祥慧徐达周佩军丁言德沈瑾
- 关键词：肾移植免疫学HLA抗原抗体生成
- 移植肾长期存活受者体内人白细胞抗原抗体对移植肾功能的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:分析移植肾长期存活的受者体内人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)抗体的变化及其对移植肾功能的影响。方法:采用酶联免疫吸附法对92例接受环孢霉素等为基础免疫治疗方案的肾移植受者进行HLA抗体检测,观察HLA抗体对移植肾长期存活的影响。结果:92例患者中,移植前检出HLA-Ⅰ类抗体27例,HLA-Ⅱ类抗体16例;移植10年后检出HLA-Ⅰ类抗体12例,HLA-Ⅱ类抗体18例。移植肾长期存活患者的HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗体均为移植后新出现的HLA抗体。根据移植10年后HLA抗体检测的结果,将移植肾长期存活的肾移植受者分为HLA抗体阳性组(n=23)和阴性组(n=69),两组患者的估计肾小球滤过率(eGFR)分别为(66.52±14.52)mL/(min.1.73 m2)和(69.09±25.54)mL/(min.1.73 m2),组间差异无统计学意义(P>0.05)。92例患者中,有3例(3.26%)检出供者特异性抗体,检出率显著低于普通肾移植人群。结论:肾移植术后移植肾长期存活的患者体内的HLA抗体均为移植后产生,移植前的致敏抗体均已消失。移植肾长期存活的肾移植患者体内HLA抗体存在与否对移植肾功能的影响低微。
- 曾毅刚刘志宏范昱秦燕丁言德沈瑾邱建新
- 关键词：肾移植人白细胞抗原抗体移植肾功能
- 免疫抑制剂用量对肾移植受者细胞因子谱系的影响被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨长期使用不同剂量的免疫抑制剂对肾移植受者细胞因子谱系的影响。方法 采用多种高灵敏度试剂盒 ,分别对存活 3年以上 ,且长期使用低剂量免疫抑制剂者 (低剂量组 )、使用常规剂量者 (常规组 )和慢性移植肾功能丧失者 (失功组 )的外周血多种细胞因子进行检测 ,分析细胞因子谱系的变化与临床用药量和移植效果的关系。结果 长期存活且肾功能正常者的白细胞介素4(IL 4)水平升高 ,在低剂量组升高尤其明显 ,而失功组明显降低 ;各组白细胞介素 2受体 (IL 2R)水平移植后均有升高 ,但低剂量组与正常人接近 ,失功组升高最明显 ;各组白细胞介素 1 0 (IL 1 0 )和转化生长因子 β1移植后均下降 ,前者在低剂量组和常规组中水平相近 ,后者以失功组下降最为明显。 结论 细胞因子谱系与免疫抑制剂的用量和移植肾功能有关 ,监测IL 2R和IL
- 肖家全唐孝达谭建明周佩军凡杰丁言德沈瑾
- 关键词：肾移植免疫学免疫因子
- HLA基因芯片配型技术在器官移植中的临床应用
- 谭建明谢毅李成涛肖家全吴海陈君男郭义峰李瑶康敏华丁言德沈瑾
- 该课题为2002年度上海市科委重大课题资助项目“HLA基因芯片配型技术在器官移植中的临床应用”。批准项目编号：024919005。1、主要研究内容（1）采用快捷、有效的手段，从全血或白细胞中获得模板基因DNA。（2）根据...
- 关键词：
- 关键词：器官移植基因芯片组织配型
- 脂多糖和γ-干扰素对血液透析患者外周血单核细胞凋亡的影响被引量：1
- 1998年
- 目的 探讨慢性肾功能衰竭外周血防御细胞单核细胞凋亡以及刺激因子细菌脂多糖（LPS）和γ-干扰素（IFN-γ）对凋亡的影响。方法使用荧光素标记的Annexin-V和碘化丙啶（PI）双染色，流式细胞仪检测早期细胞凋亡。结果维持性血液透析（HD）患者外周血单核细胞体外培养在24、72小时细胞凋亡明显超过正常对照组。腹膜透析（PD）患者组和尿毒症未透析组外周血单核细胞体外培养24小时、72小时细胞周亡和正常对照组比较无明显差异。增加LPS1μg／ml和IFN-γ100U／ml分别延长HD患者的单核细胞存活，延缓HD患者的细胞凋亡。结论血液透析本身可以增加外周血单核细胞凋亡。LPS和IFN-γ能够延缓HD的细胞凋亡，其对机体防御起重要作用。
- 惠敏徐琴君丁言德沈瑾
- 关键词：单核细胞血液透析脂多糖干扰素
