牛传双
- 作品数：19 被引量：75H指数：5
- 供职机构：华中农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 含伪狂犬病毒完整UL49基因及部分UL48基因片段的克隆与序列分析被引量：2
- 2002年
- 以地高辛标记的伪狂犬病毒 (PRV)Ea株UL4 9.5基因片段为探针 ,同SalI、KpnI、BamHI消化的PRVEa株基因组DNA进行Southern杂交 ,确定SalI 2 .8kb、KpnI 17.0kb、BamHI 2 5 .0kb片段中含UL4 9基因。将SalI2 .8kb片段克隆到pUC119中 ,利用其中的BamHI进行亚克隆 ,获得重组质粒pUC2 .0。测定约 2 .0kb片段的全序列并进行序列分析 ,发现该片段包含UL5 0基因部分编码区 ,UL4 9.5基因和UL4 9基因的完整编码区 ,并且在UL4 9基因下游 ,还存在一段约 36 9个碱基的序列 ,经与人单纯疱疹病毒I型 (HSV 1)、牛单纯疱疹病毒I型 (BHV 1)的UL4 8基因进行比对 ,具有较高的同源性 ,推测为PRVUL4 8基因的部分编码区。
- 方六荣牛传双肖少波余晓岚陈桦陈焕春
- 关键词：基因克隆伪狂犬病毒
- 增强型绿荧光蛋白突变体在大肠杆菌中的表达与纯化
- 绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)是上世纪90年代中期发展起来的一种全新的标记蛋白。其最大的优点是可以在近紫外或蓝光照射下直接观察,并能使细胞的生长和运动在原位和正常生理状态下被跟...
- 牛传双肖少波方六荣陈焕春
- 一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗及应用
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗以及该疫苗在防制猪繁殖与呼吸综合征中的应用。特征是，将猪繁殖与呼吸综合征病毒主要免疫原性基因ORF5插入“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA的BamHI位点构建而成...
- 陈焕春方六荣肖少波金梅林吴斌刘正飞江云波牛传双
- 文献传递
- 修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的免疫反应
- 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因DNA疫苗的免疫效力,将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5M。在此基础上,进一步构建修饰型...
- 江云波方六荣肖少波牛传双张辉陈焕春
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因DNA疫苗
- 文献传递
- 修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的体液免疫被引量：11
- 2005年
- 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) ORF5基因 DNA疫苗的免疫效力 ,将通用型辅助性 T淋巴细胞表位 (PADRE)插入 ORF5的中和表位和覆盖表位间 ,获得修饰后的 ORF5基因 ORF5 M。在此基础上 ,进一步构建了ORF5 M的真核表达质粒 p CI- 5 2 M。间接免疫荧光证实体外表达后 ,免疫 BAL B/c小鼠 ,检测免疫后的 EL ISA抗体和中和抗体 ,并与未经修饰的 ORF5基因真核表达质粒 p CI- 5 2进行比较。结果表明 ,修饰后的 DNA疫苗 p CI- 5 2 M诱导的 EL ISA抗体和中和抗体均明显优于未经修饰的 DNA疫苗 p CI- 5 2 ,是一种具有良好开发前景的
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- 关键词：ORF5基因ELISA抗体DNA疫苗体液免疫
- 伪狂犬病毒VP22的蛋白转导特性及其增强DNA疫苗免疫的初步研究
- 本文研究了伪狂犬病毒VP22的蛋白转导特性,结果表明,PRV VP22能在不同种属细胞间传递,并证实了PRV VP22具有促进DNA免疫反应的作用.
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- 关键词：疫苗
- 文献传递
- 增强型绿荧光蛋白突变体在大肠杆菌中的表达与纯化
- 为了充分利用突变体EGFP/mut4,本研究在大肠杆菌中高效表达了几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)-EGFP/mut4融合蛋白,并利用内含肽的自我剪切活性获得了高纯度的EGFP/mut4蛋白.
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- 关键词：绿色荧光蛋白突变体大肠杆菌
- 文献传递
- 伪狂犬病毒VP22的蛋白转导特性及其增强DNA疫苗免疫的初步研究
- 蛋白转导是近年来生命科学领域发现的一种十分独特的现象。具有蛋白转导功能的蛋白能以一种目前尚不清楚的非经典途径自主穿过细胞膜,并能在细胞间自由传递,甚至能突破血脑屏障;将具有蛋白转导功能的蛋白与目的蛋白融合,能使融合蛋白从...
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- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株ORF5基因的克隆与序列分析被引量：15
- 2002年
- 以猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)YA株为材料 ,采用RT -PCR扩增其ORF5基因全长cDNA并进行序列测定和比较分析。结果YA株ORF5基因cDNA编码区长 6 0 3bp ,可编码 2 0 0个氨基酸残基。与欧洲型代表株LV株、美洲型代表株VR - 2 332株在氨基酸水平上的同源性分别为 5 8%和 90 % ,与国内首株分离株 (CH - 1a)的同源性高达 95 % ,推测YA株属于美洲型。根据YA株ORF5基因编码的氨基酸序列 ,与具有代表性的 12株美洲型毒株和 2株欧洲型毒株绘制进化系统树 ,结果也显示YA株与美洲型分离毒株的遗传关系较近 ,而与欧洲型毒株的遗传关系较远。进一步采用序列分析软件对推导的氨基酸进行比较分析 ,发现YA株ORF5编码的E蛋白存在 5个潜在的N -糖基化位点 ,6个抗原位点 ,其糖基化位点的数目及抗原位点的分布与其它美洲型毒株均存在一定程度的差异 ,但
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- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒克隆ORF5基因
- 一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗及应用
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗以及该疫苗在防制猪繁殖与呼吸综合征中的应用。特征是，将猪繁殖与呼吸综合征病毒主要免疫原性基因ORF5插入“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA的BamHI位点构建而成...
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- 文献传递
