牛学锋
- 作品数:17 被引量:11H指数:2
- 供职机构:华南农业大学更多>>
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- H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建
- 根据国内外已公布的AIV H9N2亚型全基因组序列设计了8对引物,分别对低致病力禽流感病毒H9N2亚型毒株A/Chicken/Guangxi/KMⅢ/99(简称KMⅢ)进行了全基因组RT-PCR、测序及序列分析.将获得的...
- 罗琴芳毛三英牛学锋辛朝安郭霄峰
- 关键词:A型禽流感病毒H9N2亚型反向遗传技术病毒拯救
- 文献传递
- 犬细小病毒分离株VP2基因进化分析
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)已演变出CPV-2、CPV-2a、newCPV-2a、CPV-2b、newCPV-2b、CPV-2c等基因亚型。为了进一步了解犬细小病毒在中国的流行及其分子进化,我...
- 黄永亮王怡飞徐晓娟冯顺意米政实施赫赫吴晓薇牛学锋郭霄峰
- 关键词:犬细小病毒基因变异分离株
- DG01株H5N1亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量:1
- 2008年
- 根据国内外已公布的AIV H5N1亚型全基因组序列设计了8对引物,对H5N1亚型高致病力禽流感病毒毒株A/Duck/Guangdong/DG01/05(简称DG01)毒株进行了全基因组RT-PCR、测序及序列分析。DG01株基因组由PB22 341bp,PB1 2 341bp,PA2 233bp,HA1 779bp,NP 1 565bp,NA1 398 bp,M1 027bp,NS 875 bp 8个节段组成,与往年及同年一些流行株比较分析结果显示,DG01株具有高致病性禽流感病毒基因特征,NA基因及NS1基因均有部分缺失,从基因特点分析属于2005年流行代表株。
- 罗琴芳牛学锋辛朝安郭霄峰
- 关键词:A型禽流感病毒H5N1亚型
- 表达犬细小病毒VP2基因的嵌合狂犬病病毒生物学特性的研究
- 由犬细小病毒(CPV)感染引发犬细小病毒性肠炎和由狂犬病病毒(RV)感染引发狂犬病均为犬当前流行最严重的传染病之一。本研究对我国当前CPV分子流行病学进行调查,在此基础上,探讨构建犬细小病毒和狂犬病病毒的二联基因工程疫苗...
- 牛学锋
- 关键词:狂犬病防治犬细小病毒家畜免疫学
- H9N2亚型禽流感病毒细胞适应株细胞致病性和HA、NA基因序列分析被引量:2
- 2005年
- 对分离自中国南方的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMⅢ/99(H9N2)进行了MDCK细胞的连续传代和NA基因序列的初步分析.研究发现,病毒接种细胞36 h左右出现细胞病变(CPE),细胞肿胀变圆,聚集,脱落.流感病毒经MDCK细胞连续传代19代后,HA效价与亲代病毒相当.将传代获得的第19代病毒进行基因克隆,与亲代病毒进行序列比较,发现经传代后其HA1羧基端的分子特征是:R-S-S-R,仍属于非低致病力毒株.
- 牛学锋罗琴芳郭霄峰
- 关键词:禽流感病毒MDCK细胞HA基因NA基因
- 表达犬细小病毒VP2蛋白的嵌合狂犬病病毒生物学特性的研究被引量:3
- 2009年
- 为获得狂犬病病毒和犬细小病毒的二联疫苗,本研究运用分子生物学技术在狂犬病病毒基因组的G基因与L基因之间插入犬细小病毒VP2基因,通过反向遗传操作系统拯救获得了含犬细小病毒VP2基因的嵌合狂犬病病毒HEP-Flury(VP2),并研究了该病毒的生物学特性。结果表明,嵌合狂犬病病毒HEP-Flury(VP2)可以在BHK-21细胞上稳定繁殖,在传代10次后,外源基因VP2能高效表达;以HEP-Flury(VP2)免疫小鼠,可以诱导免疫小鼠产生抗狂犬病病毒和抗犬细小病毒的抗体。
- 牛学锋刘晓慧孙招金施赫赫陈晶江飙孙京臣郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒犬细小病毒疫苗
- 一种携带两个G基因和VP2基因的重组狂犬病病毒及其应用
- 本发明公开了一种携带两个G基因和VP2基因的重组狂犬病病毒rHEP‑Flury(dG‑VP2)。该重组病毒是以狂犬病病毒HEP‑Flury株为骨架,将将SEQ ID NO.1所示的VP2基因插入HEP‑Flury,再插入...
- 郭霄峰施赫赫罗均牛学锋
- 文献传递
- 表达犬细小病毒VP2基因的重组狂犬病病毒生物学特性研究
- 目的:研究表达犬细小病毒VP2基因的重组狂犬病病毒生物学特性。方法:将本课题组构建成功的重组狂犬病病毒rHEP-Flury(vP2-3.0)、rHEP-F1ury(dG-VP2)进行基因鉴定和G蛋白、VP2蛋白表达的鉴定...
- 施赫赫牛学锋刘祥茵黄永亮阳佑天罗永文林颖仪刘慧思郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒基因重组生物学特性攻毒保护试验
- H5N1和H9N2亚型禽流感病毒HA基因的原核表达被引量:1
- 2008年
- 采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV0025(H5N1)株和KMⅢ(H9N2)株的血凝素(hemagglutinin,HA)基因,然后分别亚克隆到pET-32a(+)、pET-28a(+)表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9.将阳性重组质粒转化进BL21(DE3)宿主菌中,通过改变IPTG浓度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0mmol/L、诱导时间4—5h.经SDS,PAGE和Western,blotting分析表明,重组蛋白相对分子质量约为85000和63000,主要存在于包涵体中,具有良好的免疫学活性.
- 黄文科林宝珍罗琴芳牛学锋郭霄峰
- 关键词:禽流感病毒HA基因原核表达
- 表达犬细小病毒VP2基因的重组狂犬病毒生物学特性的研究
- 为了获得狂犬病毒和犬细小病毒的二联疫苗,本研究运用分子生物学技术在狂犬病毒基因组G与L基因间插入犬细小病毒的VP2基因,再通过反向遗传操作系统拯救获得含VP2基因的重组病毒狂犬病毒HEP-VP2,并对该病毒生物学特性进行...
- 牛学锋刘晓慧孙招金陈晶江飙施赫赫孙京臣郭霄峰
- 关键词:狂犬病毒犬细小病毒疫苗
- 文献传递