王为
- 作品数:119 被引量:353H指数:8
- 供职机构:中国科学院大连化学物理研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 一种非接触式细胞三维共培养方法
- 本发明涉及细胞、组织工程等领域,是一种非接触式细胞三维共培养方法,即在培养板的培养孔中依次制备海藻酸钙凝胶层、壳聚糖膜层、海藻酸钙凝胶层,即形成三明治式复合凝胶,不同的细胞分别三维生长在复合凝胶中截留分子量可控的壳聚糖膜...
- 马小军宋益哲刘洋张英孙广炜王为于炜婷
- 文献传递
- 转NGF基因3T3细胞在大鼠坐骨神经缺损中的修复作用被引量:1
- 2006年
- 目的了解微囊化转神经生长因子(NGF)基因3T3细胞在修复周围神经缺损中的作用。方法异体静脉桥接神经缺损,形成神经再生室,其内填充微囊化转NGF基因3T3细胞,修复大鼠的坐骨神经10 mm缺失。用微囊化3T3细胞作为对照组。术后12 w,进行辣根过氧化物酶(HRP)示踪实验。结果术后12 w,实验动物均未出现明显炎症及排斥反应。实验组脊髓灰质前角被HRP标记的阳性神经元数明显多于对照组,其差异具有显著性意义(P<0.05)。结论聚赖氨酸/海藻酸钠(APA)微胶囊与周围神经组织有良好的生物相容性;辅加转NGF基因3T3细胞对修复缺损的神经具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。
- 赵敬国张巨马庆杰高凤彤孙鸿斌王为
- 关键词:周围神经转基因细胞神经再生
- 微囊微环境体外扩增人脐血造血干/祖细胞
- 2009年
- 背景:由于单份脐血所含的造血细胞数量有限,目前只能用于儿童或低体质量成人血液病和急性辐射损伤等疾病患者,有效扩增脐血造血干/祖细胞已成为研究热点。目的:观察微囊微环境对脐血造血干/祖细胞扩增的影响,以及此过程中可否使造血干/祖细胞在扩增的同时仍维持其未分化状态。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-06/2007-09在中国科学院大连化学物理研究所完成。材料:正常足月产新生儿脐带血由大连市妇产医院提供,提供者知情同意。方法:Ficoll法梯度分离人脐血单个核细胞,采用静电液滴法在生理条件下进行微囊化包封和体外培养。以同条件平面培养的脐血单个核细胞作为对照。主要观察指标:观察微囊化脐血细胞的生长特点及脐血细胞总数的变化;流式细胞仪检测培养过程中CD34+细胞扩增情况;应用甲基纤维素半固体培养法观察扩增细胞的集落形成能力。结果:脐血细胞在微胶囊内持续增殖,并以聚集成团的三维方式生长,两种培养方式对脐血细胞总数均无明显影响(P>0.05)。对比CD34+细胞扩增和细胞集落的生成发现,微囊化培养脐血细胞的CD34+细胞数量和集落密度均在培养第6天达到高峰,明显高于平面培养3d时所达到的峰值;之后逐渐下降,至12d后平面培养细胞的CD34+细胞和集落形成能力几乎检测不到,而此时微囊化培养的CD34+细胞数量和集落密度仍与平面培养的扩增高峰相近。结论:微囊化培养能有效扩增人脐血造血干/祖细胞,并显著减缓造血干/祖细胞的分化进程,维持其多分化潜能,提示微囊为造血干/祖细胞维持未分化状态的扩增提供了特殊的微环境。
- 李双月王华郭昕孙志杰吕国军王为马小军
- 关键词:造血干祖细胞扩增微胶囊微环境脐血
- 载细胞海藻酸钠/壳聚糖微胶囊的化学破囊方法研究被引量:76
- 2004年
- 以海藻酸钠 -壳聚糖 -海藻酸钠微胶囊 (简称 ACA微胶囊 )为研究体系 ,建立了一种生理条件下 ACA微胶囊的化学破囊方法 ,破囊过程充分考虑了对囊内生物物质活性的保持 .以微生物细胞 Pichia pastorisGS1 1 5和动物细胞 L92 9为模型 ,以 Na HCO3和 Na3C6 H5O7· 2 H2 O为破囊液基本组分 ,考察了破囊液对ACA微胶囊的破囊效果及破囊过程对囊内细胞活性的影响 .结果表明 ,破囊操作可在 3 0 s内完成 ,破囊率为 1 0 0 % ,微胶囊膜完全溶解 ,破囊后细胞存活率在 85
- 薛伟明于炜婷刘袖洞贺欣王为马小军
- 关键词:海藻酸钠壳聚糖微胶囊细胞活性
- 一种微囊化细胞活性的检测方法
- 本发明涉及一种微囊化细胞活性的检测方法。检测步骤包括样品提取、腺苷酸分离定量,通过能荷计算表征微囊内细胞活性。本发明针对微胶囊这样的特殊体系设计了一套用于微囊内细胞腺苷酸定量的操作方案,能准确定量微囊化细胞腺苷酸含量,克...
- 马小军肖静王为于炜婷
- 微囊化雪旺细胞/神经组织移植促进周围神经再生的实验研究被引量:6
- 2005年
- 目的:探讨免疫隔离技术应用在神经细胞/组织移植促进周围神经再生的可行性。方法:采用静电液滴法制备海藻酸钠/聚赖氨酸/海藻酸钠(alginate-polysien-alginate,APA)微胶囊,包埋分离自SD大鼠周围神经的雪旺细胞(SChwanncells,SCs)/神经组织;采用台盼蓝拒染法和ELISA法检测其培养后活性和分泌神经生长因子情况。制备坐骨神经横断损伤的SD大鼠模型,将微囊化SCs/神经组织移植到实验组坐骨神经吻合口处。结果:微囊化SCs/神经组织培养一定时间后,仍保持活力和分泌神经生长因子的功能;4周后实验组吻合口远端可见到再生的阳性纤维,明显大于对照组,瘢痕明显少于对照组;实验组再生的神经纤维和新生的微小血管远较对照组密集。结论:微囊化SCs/神经组织移植后在局部持续分泌神经生长因子,有促进周围神经修复的作用。
- 雄鹰王为于炜婷郭昕马小军陈绍宗
- 关键词:微胶囊细胞移植周围神经损伤
- 微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响
- 2009年
- [目的]利用基因芯片技术研究微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响。[方法]将新鲜分离的人脐血细胞在生理条件下进行微囊化包封、培养7 d后,对其进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与基因芯片杂交、扫描杂交信号,最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。[结果]基因芯片筛选结果显示,与平面培养对照组相比,微囊化培养脐血细胞中差异表达2倍及以上的造血相关基因有32个,其中19个表达上调,13个表达下调。[结论]微囊微环境影响脐血细胞造血相关基因的表达。
- 李双月王为王秋艳孙志杰吕国军郭昕朴丰源马小军
- 关键词:脐血细胞基因表达培养环境
- 海藻酸钠-壳聚糖复合膜在牙槽骨引导再生中的应用研究
- 牙槽骨的再生一直是口腔医学研究的热点问题。本研究利用天然海洋多糖材料构建可控生物降解生物膜,应用于牙槽骨引导再生研究,该生物膜利用半透膜阻隔周围纤维结缔组织过早长入骨缺损区,改变骨创愈合环境,从而促进骨组织再生修复。
- 王为谢红国
- 关键词:牙槽骨骨缺损海藻酸钠壳聚糖生物膜
- 文献传递
- 微囊化HepG2细胞脂代谢与线粒体功能和蛋白的合成被引量:4
- 2010年
- 背景:动、植物及微生物细胞在特殊微环境中培养时的生长与生产特性,与正常生理条件下或传统培养环境相比,具有明显变化,而这种变化是在不改变总体宏观环境与条件的前提下,实现了生物体微环境的相对有利。微囊微环境决定了细胞的生长和代谢行为,与微囊化细胞的功能息息相关。目的:观察微囊化肝细胞脂代谢水平改变对细胞线粒体功能及蛋白合成能力的影响。方法:将微囊化HepG2细胞接种于含1μmol/L氟伐他汀的MEM培养液中,在37℃,体积分数为5%CO2培养箱中培养。测定氟伐他汀干预前后微囊化HepG2细胞总胆固醇、三酰甘油、白蛋白水平变化以及线粒体功能变化。相差显微镜观察囊内细胞生长状态。结果与结论:①微囊化HepG2细胞总胆固醇和三酰甘油水平随着培养时间延长显著增高(P<0.05);细胞线粒体功能出现抑制(P<0.05)。②氟伐他汀能够降低囊内细胞总胆固醇水平(P<0.05),但对三酰甘油水平影响无显著差异(P>0.05)。③氟伐他汀干预能在一定程度上缓解囊内出现的细胞线粒体功能抑制和白蛋白水平降低现象(P<0.05)。结果提示微囊化细胞脂代谢水平变化尤其是胆固醇合成增加与细胞线粒体功能抑制及蛋白合成能力降低有关。
- 肖静张英于炜婷郭昕王为马小军
- 关键词:脂代谢线粒体蛋白合成氟伐他汀
- 人肿瘤侵袭转移型类组织的体外三维模型及其构建和评价
- 本发明公开了一种体外模拟人肿瘤转移的体外模型,模型内细胞具有肿瘤高转移特性。由人肿瘤高转移细胞系细胞以微球形水凝胶支架的建立、肿瘤细胞体外转移模型的建立、对所构建的肿瘤体外转移模型鉴定三部分构建而成。本发明的模型在体外三...
- 马小军徐小溪孙广炜于炜婷王为李楠刘畅
- 文献传递