王志刚
- 作品数：47 被引量：274H指数：7
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金台州市科技计划项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 最近自然发生SARS病例的SARS-CoV的遗传距离
- ＜正＞SARS病毒基因分型研究特别有助于病毒的溯源和控制,我们最早在2003年5月底提出5个碱基位点将 17株SARS-CoV进行基因分型,首次出现C基因型和T基因型之分;2004年1月我们进一步完善并提出7 个碱基位点...
- 王志刚包其郁
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌食品和病人分离株肠毒素基因和耐药性比较被引量：31
- 2008年
- 目的:对金黄色葡萄球菌食品(不含生牛奶)分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法:用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因(肠毒素SEA-SEJ基因),VITEK32测定分离菌株抗生素的耐药性。结果:从病人分离的80株金黄色葡萄球菌检测到9种基因。肠毒素基因携带率为85.0%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占76.3%,含传统肠毒素基因(SEA-SEE)的菌株占43.8%,有新发现肠毒素基因(SEG-SEJ)的菌株占71.3%。从食品中分离的51株金黄色葡萄球菌检测到7种肠毒素基因。肠毒素基因携带率为68.7%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占21.6%。有SEA基因的占27.5%,含其它传统的毒素基因类型(SEB-SEE)基因的菌株占23.5%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI的菌株只占9.8%。金黄色葡萄球菌病人分离株与食品分离株的耐药谱和耐药率有较大差异。结论:金黄色葡萄球菌食品分离株和病人分离株的肠毒素基因分布不同,其耐药性有明显区别。
- 张严峻王志刚程苏云朱敏张俊彦
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素耐药性
- 金东区鼠类检出埃立克体及无形体DNA片段被引量：7
- 2008年
- 目的了解金华市金东区某地鼠类自然感染埃立克体及无形体的状况。方法对当地监测捕获的多种鼠类取肝、脾脏器标本,用巢式PCR扩增无形体科16SrDNA的5’端片段。结果在184只鼠中,检出阳性6只,总阳性率为3.26%;其中黄毛鼠阳性率为4.12%(4/97),社鼠阳性率为4.17%(1/24),黑线姬鼠阳性率为4.35%(1/23)。经序列比对分析,4份与牛埃立克体相应片段最为接近,属无形体科,无形体属;1份与反刍动物埃立克体相应片段区最为接近,属无形体科,埃立克体属;1份与无形科新成员Ehrlichiasp.‘Ratusstrain’最为接近。结论在当地鼠类检出埃立克体及无形体DNA片段,提示可能存在埃立克体病自然瘦源地。
- 姜理平郑寿贵王志刚叶晓东孟真程苏云郑海鸥谢淑云陆群英王臻凌锋莫世华
- 关键词：鼠类埃立克体无形体聚合酶反应
- SARS病毒分离与病原学研究被引量：4
- 2003年
- 目的 从浙江省首发的 3例临床诊断SARS患者样本中分离SARS病毒 ,并进行病毒核酸、免疫学检测和形态学观察。方法 采集 3例SARS患者发病期的含漱液 ,接种Vero、Vero -E6、RD、Hep -2、MK单层细胞 ,观察细胞病变、免疫荧光法检测病毒抗原和RT -PCR法检测病毒核酸。抗原阳性的培养物作电镜形态学观察。结果 从 3例患者的 2份含漱液中分离到 2株SARS病毒 ,并发现Vero和RD两种细胞对SARS病毒敏感 ,在接种病毒后的 3天左右可出现典型的细胞病变 ,两株病毒已在Vero和RD细胞上传代 5代 ;在电镜下观察到SARS病毒颗粒。结论 分离的 2株病毒确定为SARS冠状病毒 ,并能在Vero细胞上稳定传代 ;建立的间接免疫荧光技术可用于SARS实验室诊断及流行病学调查等。
- 李兰娟翁景清严菊英卢亦愚李敏红程苏云陆群英朱函坪葛琼史雯龚黎明汤鋆姚苹苹张严峻梅玲玲丁钢强徐芳吴南屏沃健儿姚军王志刚周敏朱智勇
- 关键词：SARS病毒病毒分离病原学严重急性呼吸综合症传染性非典型肺炎
- 运用“染片指引法”进行食物中毒病原菌检测研究与评估被引量：2
- 2009年
- 目的:运用"染片指引法"提高食物中毒病原菌检出率,缩短检测时间,及时、准确为食物中毒作出病原学诊断提供可靠的科学依据。方法:对102起微生物性食物中毒1406份检样,直接涂片染色,筛选出优势菌直接选种于对口培养基培养,然后直接挑取优势菌落作一次性科、属、群、种(型)鉴定与毒素基因片段测定等验证试验。非优势菌作补漏检测。结果:102起食物中毒检出病原菌96起,检出率为94.12%;检出病原菌20个种,其中细菌性13个种,真菌性7个种,新发现食物中毒病原菌8个。分离到菌株1354株。结论:研究结果,该方法明显缩短检测时间,阳性检出率高,同时操作程序简化,检测工作强度减轻,节省材料。
- 葛素君许际华冯济富王志刚卜建国沈伟伟裘丹红陈兴利徐佳顾梦星
- 关键词：食物中毒病原菌检出率
- SARS冠状病毒CT基因型发现及相关特征被引量：2
- 2003年
- 目的 研究SARS冠状病毒基因型及相关特征。方法 对杭州市首例SARS病人分离的SARS冠状病毒ZJ0 1株进行全基因组测序 ,并在GenBank数据库登录。记录号 :AY2 970 2 8,版本号 :gi:3 0 910 85 9。整个全基因组由 2 9715bp组成。使用GenBank数据库中最新登陆的SARS病毒的基因组进行序列比对、突变点分析和多态性分析、特殊片段的系统进化分析。结果 发现在ZJ0 1株的 93 91、 175 5 5、2 1712、 2 2 2 13和 2 7819位点 ,分别是T、T、G、T和T核苷酸碱基 ,和GenBank数据库中的其他SARS冠状病毒株比较 ,除第 1、 2、 4和 5突变位点 (C :G :C :C/T :T :T :T)之外 ,发现在 2 1712位点 (第 3个 )A/G突变也参于这一遗传标识。因此我们提出 5个突位点将 17株病毒分为两种基因型的新概念 ,即C :G :A :C :C与T :T :G :T :T两型 ,简称C型和T型。ZJ0 1病毒株属于T基因型 ,在中国大陆内地是首次发现和发表。突起蛋白基因片断的进化树分析 ,广州的GZ0 1C基因型株进化距离和其他病毒株相差甚远 ;比较而言 ,和C基因型BJ0 1、CUHK W1病毒株较为接近 ,其次是T基因型的F1和F2组。 5个突变位点 (C :G :A :C :C/T :T :G :T :T)的两个发生在编码突起蛋白 (S)的基因中 ,分别是A/G和C/T突变 ,由此引起的突起蛋白 (S)氨基酸变化是Asp/
- 李兰娟王志刚卢亦愚程苏云吴南屏翁景清张严峻严菊英梅玲玲王晓萌朱函坪李敏红姚军陆群英姚苹苹史雯汤鋆葛琼龚黎明沃健尔包其郁余迎朴俞鸿王建斌庄树林张兵张晓峰苏志熙曾燕舞彭春龙蒋琰陈欢李金宏
- 关键词：冠状病毒严重急性呼吸综合症传染性非典型肺炎CT基因型
- 基于霍乱毒素B亚单位结构功能分析的霍乱弧菌基因分型被引量：1
- 2010年
- 目的:描述和分类自然发生的霍乱毒素B亚单位DNA和蛋白序列的多态性,及时提供潜在有用的霍乱诊断、疫苗研制和流行病学信息。方法:采用生物信息频谱分析平台,同时包括Clustal W,MEGA和PyMOL分析法,对245个霍乱毒素B亚单位DNA和蛋白序列进行结构和功能及基因分型特性的研究。结果:所分析的霍乱毒素B亚单位的103个氨基酸区域有共同的信息频谱特征,其主峰特征为F(0.3333,19),显示了霍乱菌株的霍乱毒素B亚单位的共同作用模式。霍乱毒素B亚单位蛋白的T68I氨基酸残基关键变异明显增加了F(0.3333)的特征峰高,可能对"人类"作用的模式有较大影响。经过系统聚类分析,发现了19个霍乱毒素B亚单位DNA序列多态。基于以上结果和流行病学资料,提出了19个霍乱弧菌的霍乱毒素B亚单位基因型。霍乱弧菌古典生物型参考株(569B)的霍乱毒素B亚单位基因型为1a(CTBgenotype 1a)。霍乱弧菌埃尔托生物型参考株(N16961)和霍乱弧菌O139血清群的参考株(4260B)的霍乱毒素B亚单位基因型都为2a(CTB genotype 2a)。结论:以上内容可对霍乱毒素B亚单位DNA和蛋白序列的多态性提供更好的理解;提供了对霍乱毒素B亚单位分子变异监测的一个技术和方案;可为今后预防和处置霍乱弧菌的感染和流行,进一步扩展了鉴别潜在的免疫、治疗和诊断的分子靶标的可能性。
- 王志刚朱水荣张俊彦阮卫程洁贾红宇包其郁张政
- 关键词：霍乱弧菌霍乱毒素基因型
- 霍乱毒素亚单位B的基因分型和蛋白结构功能分析预测
- @@霍乱毒素是引起霍乱腹泻的主要毒性物质，由A、B两个亚单位组成。B亚单位(CTB)的主要功能是通过与哺乳动物小肠上皮细胞上的单唾液酸神经节苷脂GM1结合而使得A亚单位进入细胞，由5个相同的11.6 kDa的多肽组成。C...
- 王志刚朱水荣张俊彦
- 关键词：基因分型蛋白结构功能分析
- 文献传递
- 浙江省疾病预防控制中心王志刚主任医师等在《欧洲生物学化学会联盟通讯》(FEBS Letters)发表SARS研究论文
- 2006年
- 王志刚
- 关键词：SARS冠状病毒主任医师研究论文
- 甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC-a基因的克隆、原核表达及鉴定
- 2012年
- 目的:克隆甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白抗原(H1抗原)fliC-a基因,构建原核表达系统并鉴定重组蛋白的抗原性。方法:PCR方法扩增fliC-a基因,克隆到质粒pET-42a构建原核表达载体pET-fliC-a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的重组蛋白rfliC-a表达,用SDS-PAGE鉴定rfliC-a,Western blot和双向免疫扩散法鉴定rfliC-a的抗原性和免疫原性。结果:成功表达并纯化获得相对分子量为14.4 kDa的重组蛋白rfliC-a,rfliC-a能与兔抗甲型副伤寒沙门菌全菌血清发生特异性结合,免疫家兔获得高效价抗体。结论:成功构建了fliC-a基因原核表达系统,所表达的rfliC-a具有良好的抗原性。
- 张小贤张家敏王志刚朱永良
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌克隆原核表达
