王曙
- 作品数：10 被引量：15H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Kelch家族基因KLHL5、KLHL6的克隆和功能研究
- 近年来发现了一类新的和肌动蛋白结合的kelch家族蛋白,它的特征是kelch结构域串联重复而成的kelch-repeat结构域.kelch结构域由约50个氨基酸组成的.复旦大学生命科学院实验室通过cDNA文库构建和大规模...
- 王曙
- 关键词：克隆
- 文献传递
- 人卵透明带蛋白huZP3a^(22～176)和huZP3b^(177～348)肽段在大肠杆菌中的表达及其纯化被引量：9
- 2004年
- 目的:探索将huZP3a22~348蛋白编码基因拆分成两段,分别表达的可行性,并研究表达产物的免疫原性。方法:用PCR技术, 将去N-端信号肽和C-端跨膜区的huZP322~348蛋白编码基因拆成大小相近的两段, 以完整阅读框的形式分别重组插入热诱导型pBV221的多克隆区。结果:大肠杆菌分别特异地表达了可单独或复合应用的huZP3a22~176和huZP3b177~348,在经过抗人ZP3不同抗原区合成肽抗体的蛋白印迹鉴定后, 用改良的制备性PAGE方法分离纯化这两种表达产物。同时用兔抗猪ZP IgGs蛋白印迹试验表明, huZP3a和pZP3b的几个共同线性抗原表位都存在于其肽链的前半区域。结论:通过基因重组技术可获得足够量的huZP3a和huZP3b,这为开展huZP3a和huZP3b的免疫原性以及huZP3诱发人精子顶体胞吐的功能域等研究奠定了基础。
- 徐万祥何亚萍洪爱真季朝能钱吉王曙谢毅Elvira HinschKlaus-Dieter Hinsch
- 关键词：基因表达免疫印迹纯化
- 一条新的人类组氨酰tRNA合成酶类似物全长cDNA的克隆及表达谱分析被引量：1
- 2002年
- 从人胎脑文库中克隆到一条长为 12 19bp的cDNA ,它编码 2 3.4ku的肽链 .该肽链与葡萄球菌组氨酰tRNA合成酶N端同源 5 8% .利用humangenomicblast可将其定位于 2 0p11.Northern杂交显示胎脑中有一约1.5kb的单一条带 .基因芯片杂交分析表明 ,其在肺癌和前列腺癌组织中表达较高 .
- 孟宪芳陈金中杨泉胜王曙周光云应康谢毅毛裕民
- 关键词：克隆
- 半乳糖凝集素PPL13在人胎盘血管内皮细胞中表达的实验研究
- 2004年
- 目的 :以原位杂交法检测PPL13在人胎盘组织的表达情况。方法 :用DIG标记的PPL13有义RNA探针及反义RNA探针与胎盘组织切片进行原位杂交。结果 :反义RNA探针杂交标本显色 3h ,显微镜下可见胎盘毛细血管内皮细胞中出现棕色沉淀物 ,滋养层细胞中未见棕色沉淀物 ;而有义RNA探针杂交标本显色 2 4h仍无棕色沉淀物出现。结论 :PPL13在人胎盘内皮细胞中特异性表达 ,提示PPL13可能与胎盘的屏障作用有关。
- 刘华王曙杨泉胜
- 关键词：半乳糖凝集素胎盘原位杂交
- PMA激活内皮细胞早期应答基因谱分析被引量：1
- 2000年
- 血管内皮细胞具有一系列重要生理功能 ,内皮细胞受外界刺激时可转录众多的mRNA ,体现了它们的生物学重要性 .内皮细胞的极早期应答基因 (Immediateearlyresponsegene ,ERG)是一类重要的介导基因 ,决定了外界刺激条件下细胞的最后反应模式 .以包含 40 96条各种人体基因的DNA芯片观察了血管内皮细胞受分化诱导剂PMA(phorbolmyristateacetate)激活后早期应答基因的表达谱 ,证实 17条ERG属已知基因 .数据处理聚类结果表明 ,多数ERG属蛋白质激酶及转录调控因子 ,2 3条上调新基因从功能上归类为ERG ;并且报道了其中的一条新基因的序列特征及其染色体位置和基因结构 ,为研究这个基因的功能提供了有力的实验依据 .
- 王曙和桂芬陈沁吴超群李瑶刘建平谢毅毛裕民
- 关键词：DNA芯片信号传导染色体定位
- 抗HPV11 E2核酶的计算机设计被引量：3
- 2001年
- 借助计算机软件分析 ,设计出能特异性切割HPV11型 6 4 4ntE2mRNA的核酶 (ribozyme) .遵循Symon′s锤头状核酶结构和GUX剪切位点原则 ,靶序列存在 32个这样的剪切位点 .通过计算机软件分析出核酶的最佳剪切位点 ,并对底物及核酶的二级结构进行预测及进行相应基因生物学功能和基因同源性分析 ,筛选出 2个锤头结构核酶 .针对这两位点设计的核酶分别命名为RZ2 777和RZ32 81.计算机分析显示 ,两核酶与底物切点两翼碱基形成锤头状结构 ,切点所在基因序列具有相对松弛的二级结构 ,位于该基因重要生物功能区内 ,是核酶的理想攻击区域 .通过基因库检索 ,在已知人类基因排除了与上述两核酶切点两翼碱基有基因同源性序列的可能性 .将两核酶用于体外剪切实验取得了良好的实验结果 。
- 侯化杨光彩王曙黄扬中刘德忠
- 关键词：核酶计算机设计HPV11E2尖锐湿疣
- 圆弧青霉PG37碱性脂肪酶的纯化和酶学性质研究
- 近年来,碱性脂肪酶在家用洗涤产品的应用受到很大重视.国外已有用基因工程方法生产的商品化碱性脂肪酶,而国内在这方面的研究比较落后.该实验对圆弧青霉PG37所产碱性脂肪酶进行了分离纯化和特性的研究,PG37菌株分泌三种同工酶...
- 王曙
- 关键词：碱性脂肪酶纯化同工酶层析
- 文献传递
- 抗HPV11 E2核酶的计算机设计
- 2001年
- 借助计算机软件分析 ,设计出能特异性切割HPV11型 644ntE2mRNA的核酶。遵循Symons锤头状核酶结构和GUX剪切位点原则 ,靶序列存在 3 2个剪切位点 ,通过计算机软件分析核酶的最佳剪切位点 ,并对底物及核酶的二级结构进行预测及进行相应基因生物学功能和基因同源性分析 ,筛选出 2个锤头结构核酶。针对这两位点设计的核酶分别命名为RZ2 777和RZ3 2 81。计算机分析显示 ,两核酶与底物切点两翼碱基形成锤头状结构 ,切点所在基因序列具有相对松弛的二级结构 ,位于该基因重要生物功能区内 ,是核酶的理想攻击区域 ,通过基因库检索 ,在已知人类基因中排除了与上述两核酶切点两翼碱基有基因同源性序列的可能性。并非所有的GUX位点 (X :C、U、A)或CUX均可作为核酶的最佳剪切位点 ,计算机分析可帮助尽快选择出最适核酶 ,指导进行核酶体外转录载体构建并进行切割反应 ,为下一步将核酶用于细胞内和体内试验打下基础。
- 侯化王曙杨光彩
- 关键词：核酸计算机设计人乳头瘤病毒
- 人卵透明带蛋白-3在E.coli中的分段表达、纯化及其鉴定
- ＜正＞ 哺乳动物包括人的卵子外都围有一层半透明带（zona pellucida, ZP）,它们通常由按电泳迁移率大小命名的ZP1、ZP2和ZP3或按所克隆基因大小命名的ZPA、ZPB和ZPC三种糖蛋白组成。长期以来,ZP...
- 徐万祥何远何亚萍王丽婷孙志达季朝能钱吉王曙谢毅
- 文献传递
- 半乳糖凝集素PPL13的表达纯化及免疫组织化学研究被引量：1
- 2003年
- 在E.coliM15中表达纯化半乳糖凝集素PPL13(placentaproteinlectin13),制备兔抗人PPL13多克隆抗体,以免疫组织化学法检测PPL13在人胎盘及脐静脉的表达情况.结果显示PPL13分布在胎盘及脐静脉的内皮细胞中.提示PPL13可能与胎盘及脐静脉内皮细胞的功能相关.
- 刘华陈金中杨泉胜王曙应康谢毅毛裕民
- 关键词：表达纯化多克隆抗体免疫组织化学
